Общие методы очистки или выделения вирусов

Б, ОБЩИЕ МЕТОДЫ ОЧИСТКИ ИЛИ ВЫДЕЛЕНИЯ ВИРУСОВ [c.33]

Для очистки вирусов используют общие методы выделения белков. Методы отделения вирусов от клеточных белков основаны, во-первых, на том, что вирусы по своей природе представляют собой обособленные частицы, а во-вторых,— на более высокой плавучей плотности вирусных частиц, обусловленной присутствием в них нуклеиновой кислоты. Однако для отделения вирусов от нуклеопротеидных частиц самой клетки, имеющих такой же состав и размеры, как и вирусная частица, требуются специальные методы. [c.33]

В следующих разделах описана в общих чертах теория каждого метода центрифугирования, а также следующие аппараты 1) низкоскоростная ультрацентрифуга, применяемая для определения кривых распределения коллоидных частиц, 2) высокоскоростная ультрацентрифуга с масляной иди воздушной турбиной для определения констант седиментации органических макромолекул, 3) равновесная ультрацентрифуга, применяемая для соединений с молекулярным весом порядка нескольких тысяч, и 4) препаративная воздушная центрифуга для выделения и очистки таких высокомолекулярных веществ, как вирусы. Для каждого аппарата описана методика проведения измерений, а также специальные области применения и примеры проведенных исследований. [c.463]

Но в книге X. Френкель-Конрата нас привлекла прежде всего ясность, оригинальность и свежесть изложения тех вопросов, которым уделено сравнительно мало места в большинстве других, близких по теме монографий. Это вопросы выявления, выделения и очистки вирусов, химического состава и структуры целых вирионов и их компонентов, взаимного расположения этих компонентов (гл. II—VIII), а также сборки и искусственного воссоздания вирусов (гл. X). Эти главы, которые составляют большую часть книги и материал которых наиболее близок личным научным интересам автора, являются, несмотря на компактность изложения, прекрасным и почти исчерпывающим введением в общую и структурную химию вирусов. Они дают полное представление не только о составе вирусных частиц, но и о современных методах их химического, биохимического и физико-химического исследования. Многочисленные указания на возможные методические ошибки и практику проведения экспериментов делают книгу особенно ценной для начинающих научных работников. [c.6]

Методы выделения вирусов простого герпеса довольно сложны по сравнению с другими вирусами. Более того, метод, хорошо зарекомендовавший себя при работе с одним штаммом вируса на определенной клеточной линии, может оказаться неприемлемым для других штаммов на той же линии или того же штамма вируса на других клетках. Поэтому мы опишем два метода. Мы показали, что первый метод можно успешно применять для получения штамма HFEM и некоторых других при условии, что для выращивания вируса используют клетки Нер-2. Данный метод прост и позволяет получать вирусные препараты высокой степени чистоты. Второй метод позволяет достигнуть удовлетворительных результатов со всеми штаммами вируса и различными типами клеток. Для выбора оптимальных условий получения высокого выхода вируса и качественного исходного материала для дальнейшей очистки следует вначале изучить кривую роста исследуемого вирусного штамма на различных линиях клеток. На рис. 10.4 показана кривая роста штамма HFEM на клетках Нер-2 при высокой множественности инфекции и культивировании клеток при 32 °С. Оптимальные условия, которые требуются для приготовления исходного материала, в общих чертах описаны в разд. 2.5.1. [c.279]

Оптимальный метод выделения высокомолекулярной ДНК из донорного штамма или трансфецирующей ДНК бактериального вируса часто зависит от особенностей соответствующих бактерий ил1/ вирусов. Общие принципы и методы разрушения клеток грамотрицательных и грамположительных бактерий с целью выделения ДНК приведены в гл. 22. Чаще других для выделения и очистки высокомолекулярной ДНК из микроорганизмов применяется метод, описанный Мармуром [29]. Он подробно изложен в разд. 22.2.1. Однако в большинстве случаев использование высокоочищенных препаратов ДНК, не содержащих РНК и другие примеси, необязательно поэтому можно обойтись без обработки рибонуклеазой. Специальные методы выделения ДНК плазмид описаны в гл. 15. [c.67]