Активные димеры рибонуклеазы

АКТИВНЫЕ ДИМЕРЫ РИБОНУКЛЕАЗЫ [c.75]

РИС. 16.12. Образование активных димеров рибонуклеазы из молекул, содержащих СМ-Н15-12 и СМ-Н15-119 (рисунок Ирвинга Гейса). [c.76]

Справедливость такого механизма димеризации была показана с использованием рибонуклеазы, модифицированной иодацетатом. Рибонуклеазу, содержащую M-His , смешивали с ферментом, содержащим M-His , и лиофилизовали. Согласно схеме на рис. 16.12, это должно было бы привести к образованию гибридных димеров (содержащих модифицированные и немодифицированные пары остатков гистидина), активность которых равна активности мономеров (один активный центр). Эксперименты подтверди- [c.75]

С помощью гель-хроматографии уже давно уда лось установить наличие ассоциатов в некоторых белковых препаратах. Педерсен [96] на сефадексе G-150 выделил и охарактеризовал чистый димер из старых препаратов сывороточного альбумина. Компоненты, выходящие с колонки еще раньше, представляли собой тример и тетрамер сывороточного альбумина (см. [163]). После того как чистую рибонуклеазу А в 50%-ной уксусной кислоте лиофилизировали, а затем фракционировали на сефадексе G-75, в элюате было обнаружено несколько активных фракций. Главный пик соответствует исходному мономеру белка, тогда как остальные компоненты, судя по объемам выхода, являются ассоциатами [97]. Очевидно, аналогичное явление образования димера и других полимеров обна> ружили Зигель и Монти [98] при исследовании уре-азы. Хроматографией на сефадексе G-200 им удалось из кристаллического фермента (Sigma, тип С 1) выделить несколько более быстро движущихся фракций. На основании объемов выхода для них с помощью уравнения Эккерса [59] был вычислен радиус по Стоксу это дало возможность определить молекулярный вес. Таким образом был установлен чрезвычайно интересный факт из препарата, помимо уреазы (мол. вес 483 000), удалось выделить ее димер и тример. По-видимому, в свободном объеме элюировались также продукты еще более высокой степени агрегации. [c.175]

Среди первых сообщений об отрицательном влиянии неблагоприятных условий (температуры и дефицита влаги) на метаболизм нуклеиновых кислот была работа, в которой показано нарушение синтеза нуклеиновых кислот и белков [508]. Уменьшение содерл<ания суммарной РНК по мере обезвол ивания тканей томатов, фасоли, гороха, яблони и других культур, как показали исследования Кесслера [509], связано с нарушением ее синтеза и особенно с усилением ее распада вследствие возрастания активности рибонуклеазы. Правда, на начальных этапах содержание нуклеиновых кислот не только не снилсается, но, напротив, возрастает [510]. Впрочем, это и неудивительно, принимая во внимание возмол ную интенсификацию белкового синтеза в подобных условиях. При более сильной засухе, однако, полисомы распадаются, появляются свободные рибосомы и димеры, резко снижается синтез белка и уменьшается содержание РНК, в первую очередь информационной. Уменьшение водного потенциала от —3,6 до —7,8 бар в течение 15 мин, например, снил<ало содержание полирибосом, замедляло синтез белка и прирост листьев кукурузы [511]. Регидратация же спо- [c.187]

Кристфилд и др. ( restfield et а ., 1963) получили интересные данные относительно ди-меризации рибонуклеазы. При лиофилизации рибонуклеазы из 50%-ной уксусной кислоты отмечено образование димеров фермента, активность которых (в расчете на моль димера) в два раза выше активности мономеров. Предполагая, что для активности существенны оба остатка гистидина His-12 и His-119, эти данные можно объяснить частичным разворачиванием и димеризацией фермента, как это схематически представлено на рис. 16.11. Согласно схеме, остатки гистидина в димере группируются в две симметрично расположенные пары. [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология