Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Нуклеотиды содержание в нуклеиновых кислотах

    Настоящая книга, издаваемая в серии научных трудов ВИР, освещает методы и методики по определению содержания нуклеиновых кислот в растительных тканях и препаратах. В ней также изложены — идентификация и количественный учет свободных нуклеотидов выделение нативных РНК и ДНК из растений фракционирование их на колонках определение нуклеотидного состава РНК и ДНК методами колоночной и бумажной хроматографии изучение свойств макромолекул нуклеиновых кислот, обнаружение их в клетке, цитофотометрия, определение состояния ДНК и РНК в клетке. [c.2]


    Определению белка данным методом мешает присутствие нуклеиновых кислот и нуклеотидов. Измеряя оптическую плотность раствора при 260 нм (для учета поглощения соединений нуклеотидной природы) и 280 нм, содержание белка рассчитывают с помощью номограммы (рис. 6) экспериментально полученные величины оптической плотности при 260 и 280 нм находят в соответствующих столбцах номограммы и соединяют их прямой линией точка пересечения этой прямой со шкалой, на которой дана концентрация белка, определяет содержание белка в исследуемом растворе. [c.83]

    Огромное разнообразие и специфичность химических свойств нуклеиновых кислот, которые теснейшим образом связаны с наследственностью организмов, определяются рядом факторов различным содержанием азотистых оснований, последовательностью чередования нуклеотидов, различной укладкой нуклеотидных цепочек. [c.562]

    РНК вирусов (обзоры — см.РНК вирусов выделяют обычно из очищенных вирусных частиц с помощью фенольного или детергентного метода (типичные методики — см. ). Как правило, нуклеиновые кислоты вирусов существуют в виде одноцепочечной молекулы с мол. весом 1—3-10 , хотя известны примеры значительно более низкого молекулярного веса. Так РНК одной из разновидностей фага Рр имеет мол. вес 2- 10 , что соответствует содержанию 550 остатков нуклеотидов 1 . Излюбленными объектами изучения являются РНК из вируса табачной мозаики и вируса желтой мозаики турнепса, полиовирусов животных и вирусов гр иппа. Наконец, значительное число работ посвящено исследованию вирусов бактериофагов, таких, как 2, М52, К17, М12, Гг, Рр и др. Нативность выделяемой вирусной РНК можно контролировать с помощью биохимического теста — по способности инфицировать организмы, являющиеся хозяином данного вируса. [c.37]

    В тканях с высоким содержанием ДНК можно обнаружить также свободные дезоксирибонуклеотиды, которые играют важную роль в синтезе ДНК (другие функции неизвестны). Кроме нуклеотидов, весьма необходимых для биосинтеза нуклеиновых кислот, имеются еще нуклеотиды с основаниями, не входящими в структуру ДНК или РНК. Такие нуклеотиды во время обмена веществ играют важную роль как необходимые коферменты. Это пиридин- и флавин-нуклеотиды. [c.96]

    Исследовалась также зависимость величин Rf от концентрации хлорида лития в элюирующем растворителе. Величины Rf нуклеотидов менялись в зависимости от концентрации растворителя, а степень изменения зависела от типа разделяемых соединений, например какие соединения анализировались— ди- или моноэфиры. Б то же время выяснилось, что Rf оснований нуклеиновых кислот, а также нуклеозидов не зависят от концентрации солей, если только концентрация последних не чрезмерно высока в этом случае уменьшение Rf, по-видимому, вызывается высаливанием. Для улучшения разделения между различными группами нуклеотидов можно использовать многостадийное хроматографирование. Например, смесь нуклеотидов аденина и урацила элюируют раствором хлорида лития 1 мин 0,1 М раствором, 5 мин 0,3 М раствором, 15 мин 0,7 М раствором и, наконец, 25 мин 1,5 М раствором. Элюирование проводят без промежуточной сушки, т. е. фактически осуществляется градиентное элюирование. Большое содержание солей мешает [c.129]


    Для определения состава нуклеиновых кислот их расщепляют, образующиеся азотистые основания, нуклеозиды и нуклеотиды разделяют и оценивают их относительное содержание. Перед [c.162]

    Фосфор. По содержанию в организме человека (0,95 %) (см. табл. 5.3) фосфор относится к макроэлементам. Фосфор — элемент органоген и играет исключительно важную роль в обмене веществ. В форме фосфата фосфор представляет собой необходимый компонент внутриклеточной АТФ. Он входит в состав белков (0,5—0,6%), нуклеиновых кислот, нуклеотидов и других биологически активных соединений. Фосфор является основой скелета животных и человека (кальций ортофосфат, гидроксилапатит), зубов (гидроксилапатит, фторапатит). [c.347]

    В случае РНК-содержащих вирусов абсолютное количество нуклеиновой кислоты изменяется в узких пределах для большинства (—90%) изученных вирусов и соответствует среднему содержанию РНК в одной частице 2-10 (приблизительно 6000 нуклеотидов) . [c.466]

    В лаборатории М. Я. Школьника (1962, 1964) в условиях цинковой недостаточности было обнаружено увеличение поступления фосфора в растения, значительное увеличение содержания в листьях, стеблях и корнях томатов неорганического фосфора и уменьшение количества различных органических соединений фосфора (общего фосфора нуклеотидов, лабильного фосфора,, фосфора липидов и нуклеиновых кислот). По мнению автора, все эти изменения свидетельствуют о нарушении в отсутствие цинка процесса окислительного фосфорилирования. В доказательство этого предположения привлекаются данные о концентрировании цинка в митохондриях и активировании цинком гексокиназы. [c.136]

    Содержание и локализацию нуклеиновых кислот в клетке можно определить, используя основные красители в сочетании с обработкой срезов ферментами-нуклеазами, способными разрывать связи между нуклеотидами ДНК или РНК. [c.92]

    При дефиците цинка у растений нарушается фосфорный обмен фосфор накапливается в корневой системе, задерживается его транспорт в надземные органы, замедляется превращение фосфора в органические формы — в несколько раз возрастает содержание неорганических фосфатов, снижается содержание фосфора в составе нуклеотидов, липидов и нуклеиновых кислот. [c.256]

    Эффективное лечение подагры достигается путем сочетания соответствующей диеты с лекарственной терапией. Исключаются из рациона продукты с высоким содержанием нуклеотидов и нуклеиновых кислот, например печенка, а также кофе и чай, в которых содержатся пурины кофеин и теобромин. Хороший эффект дает применение аллопуринола этот препарат является ингибитором ксантиноксидазы-фермента, ответственного за [c.674]

    Установлено аиболее высокое содержание свободных нуклеотидов и нуклеиновых кислот в листовых пластинках побегов израстания и наименьшее — в транспортных системах (срединная жилка израстающего листа и стебель побега израстания), что подтверждает предположение об использовании гипертро- [c.144]

    Определение по фосфору считается наиболее надежным методом оценки количества нуклеиновых кислот, так как его процентное содержание в наименьшей степени зависит от нуклеотидного состава для ДНК оно составляет 9,8—10,1%, для РНК —9,1—9,6 26. При определении фосфора нуклеиновых кислот в тканях необходимо предварительно удалить свободные нуклеотиды, неорганический фосфат, а также все фосфорсодержащие соединения ненуклеотидной природы, в частности липиды. [c.163]

    Определению белка данным методом мешают присутствие нуклеиновых кислот и нуклеотидов (более 20%). В этом случае оптическую плотность одного и того же раствора измеряют при двух длинах волн — 260 и 280 нм содержание белка X (мг/мл) рассчитывают по формуле Калькара  [c.33]

    Различные олиго- и полинуклеотиды отличаются друг от друга содержанием нуклеотидов каждого типа. Выраженные в процентах относительные количества мономерных 1веньев называют нуклеотидным составом, а их последовательность— первичной структурой нуклеиновой кислоты. [c.306]

    Пурином называют конденсированную гетероциклическую систему, построенную сочленением пиримидинового и имидазольного колец. Пурины играют важную роль в живой природе, так как, наряду с уже упоминавшимися пиримидиновыми нуклеотидами, участвуют в биосинтезе нуклеиновых кислот. Сушествуют всего два нуклеиновых основания пуринового ряда аденин 6.737 и гуанин 6.738. Их рибозиды и дезоксирибозиды называются соответственно аденозин 6.739 и дезоксиаденозин 6.740, гуанозин 6.741 и дезокси гуанозин 6.742. Они объединяются под общим названием пуриновых нуклеози юв. Фосфаты их именуются нуклеотидами. Во всей живой природе распространены метаболически связанные с ними инозин 6.743 и ксантин 6.744. Кроме того, в состав РНК входят так называемые минорные нуклеиновые основания, как пуриновые, так и пиримидиновые. Их количественное содержание в РНК незначительное, но структурное разнообразие велико. В качестве примера можно назвать деазапурин квеуин 6.745, найденный как минорный компонент РНК многих организмов, в том числе у млекопитающих. [c.590]


    Значительную ценность представляют собой рибонуклеазы высокой специфичности, так как они не только расщепляют нуклеиновую кислоту на олигонуклеотиды, которые во многих случаях можно разделить и определить их структуру, но и указывают также в общем распределение нуклеотидов. Так, обнаружено, что пропорция пиримидиновых нуклеозид-З -фосфатов (по отношению к общему содержанию пиримидинов в нуклеиновой кислоте), выде ляющихся под действием панкреатической рибонуклеазы, в значительной степени варьирует. Нри известной специфичности фермента высокий процент выделения свободных пиримидиновых нуклеотидов по отношению к общему содержанию пиримидинов указывает на наличие участков цепи, в которых два или более пиримидинов следуют подряд друг за другом, в то время как выделение мононуклеотидов в относительно малом количестве указывает на то, что пиримидиновые нуклеотиды в основном соединены (через 5 -гидро-ксильную группу) с З -фосфатами пуриновых нуклеотидных звеньев. В этой связи представляет интерес факт, что из растворимых в солевом растворе дрожжевых нуклеиновых кислот выделяется около 50% цитидиловой, уридиловой и псевдоуридиловой кислот в расчете на общее содержание каждой из них и только 10—20% тиминовых нуклеотидов [161]. Из рибонуклеиновой кислоты вируса табачной мозаики штамма М после исчерпывающего переваривания панкреатической рибонуклеазой выделено значительно большее количество пиримидиновых нуклеотидов, чем в случае штаммов ТМУ, НК и УА следовательно, распределение пиримидиновых нуклеотидов в РНК из штамма М отличается от распределения нуклеотидов в РНК штаммов ТМУ, НР или УА [162] (ср. с приведенными ниже данными). [c.392]

    При обработке РНК вируса табачной мозаики РНК-азой Т1 освобождается в виде мононуклеотида около 26,9% общего содержания гуанина таким образом, такое количество гуаниловых нуклеотидов содержится (как полагают) в нуклеиновой кислоте в виде участков из двух или более гуаниловых остатков [173]. Образуются также ДИ-, три- и тетрануклеотиды с гуанозин-3 -фосфатом на конце. Однако независимое определение гуанозин-З -фосфата и гуанозин-2, З -циклофосфата, выделяющихся при действии очищенной РНК-азы Т1 на РНК вируса табачной мозаики, показало, что освобождается около 55,7% общего содержания гуанина (по сравнению с теоретическим значением 24,0% при расчете на беспорядочное распределение оснований) [174]. При подобной обработке дрожжевой РНК выделяется 48,7% общего содержания гуанина при беспорядочном распределении оснований надо ожидать только 27,5%. Однако приводится также значительно более низкая величина процента выделения [559]. Фракционирование на ЭКТЕОЛА-целлюлозе пуриновых олигонуклеотидов (содержащих на конце пиримидиновый нуклеотид) из гидролизатов РНК панкреатической рибонуклеазой показало, что продукты более высокого молекулярного веса особенно богаты остатками гуаниловой кислоты, т. е. действительно имеются цепочки из остатков гуаниловой кислоты [175]. [c.394]

    Ч- УЗ ф + ГЗ Ф+(АЗ Ф) 5 ЦЗ Ф+ (АЗ ф) 5 УЗ ф+ АЗ ф) 5ТЗ ф. причем продуктам в интактной нуклеиновой кислоте предшествуют в каждом случае ЦЗ ф, УЗ ф или ГЗ ф. Как утверждают, в нуклеиновой кислоте вируса около 56,6% адениновых нуклеотидов (к общему содержанию аденина) присутствует в виде одиночных звеньев (19,1% в виде АфЦф, 19,6% в виде АфУф, 17,9% в виде АфГф) 37,8% присутствуют в виде групп из двух или трех соединенных друг с другом звеньев (за которыми следуют Цф, Уф или Гф в приблизительно равных количествах) [176]. [c.395]

    Что касается низкой гетерогенности бактериальных ДНК по составу (но не обязательно по последовательности), то она очевидна также из данных по определению плотности ДНК методом ультрацентрифугирования в градиенте плотности [245, 246[. При изучении большого числа дезоксирибонуклеиновых кислот вновь была найдена линейная зависимость между плотностью ДНК и содержанием гуанина и цитозина. Экстраполирование этих результатов показало, что двойная спираль из аденин-тиминового полидезокси-нуклеотида должна иметь плотность 1,662, а плотность соответствующего гуанин-цитозинового полимера должна быть 1,764. Если известна плотность нативной ДНК и ее величина укладывается между этими крайними значениями, то это позволяет точно определять состав ДНК. Соответствующие денатурированные ДНК имеют плотность на 0,015 выше. Если гетерогенность двух препаратов ДНК из животных тканей удалось выявить по увеличению ширины полос, то бактериальные нуклеиновые кислоты характеризуются узким распределением по составу (половина ширины полосы соответствует 3—5 мол. % гуанина + цитозина по сравнению с 11 % для ДНК из зобной железы теленка), а распределение по составу ДНК бактериофага настолько узко, что его не удалось измерить. Избирательная тепловая денатурация ДНК из зобной железы теленка (с низким содержанием гуанин-цитозиновых пар) дает фракцию нативного препарата с более высокой плотностью, чем плотность исходного препарата, из которого она была выделена [245[. [c.577]

    Патаки и др. [116, 117] измеряли интенсивность флуоресценции in situ для количественной оценки содержания оснований нуклеиновых кислот, нуклеозидов и нуклеотидов. Гиссель и Штолль [118] применили этот же метод для рутинного определения инозина и гипоксантина в мышечных тканях трупов. [c.137]

    Поскольку образование нуклеиновых кислот, так же как н других необходимых для роста и развития веществ, связано с потреблением энергии, главным источником которой в живом организме являются трифосфаты (в основном АТФ и другие нуклеотиды), для выхода из состояния иокоя необходим, видимо, определенный уровень нуклеотидов в тканн. Если содержание нуклеотидов не достигает этого уровня, то покой продолжается. Когда же энергии запасено достаточно в процессе окислительного фосфорилирования, то при наличии других благоприятных условий меристематические ткани могут перейти к активному делению, не испытывая нехватки в нуклеиновых кислотах, белках и других жизненно важных соединениях. [c.188]

    Содержание свободных нуклеотидов и суммы нуклеиновых кислот, в разных частях израстающего гюбега томата сорта Лучший из всех  [c.145]

    В работе Уокера и Валли [58] было показано, что в нативных образцах нуклеиновых кислот, выделенных с надлежащей предосторожностью в отношении занесения каких-либо примесей извне, всегда содержатся довольно значительные (от 0,14 до 0,33%) количества разнообразных металлов. В числе найденных металлов всегда имеются железо, магний, кальций и цинк. Содержание железа в различных образцах рибонуклеиновой кислоты находилось в пределах от 1 до 10 атомов на 100 нуклеотидов. Интересно отметить, что в нуклеиновых кислотах, выделенных из разных организмов, обнаружено специфическое соотношение между количествами атомов разных металлов, внедренных в структуру РНК и ДНК. Поэтому можно высказать предположение, что примеси металлов в нуклеиновых кислотах могут иметь биологическое значение, о котором пока известно очень мало. Достоверно показана лишь структурирующая роль некоторых металлов (железо, никель), особенно важная для проявления биологической активности вируса табачной мозаики [59]. [c.432]

    Определение креатинкиназной активности используется при диагностике некоторых заболеваний. Интересно, что уже в первые часы после инфаркта миокарда в крови резко нарастает содержание креатинкиназы Рибонуклеаза. Различают два основных вида нуклеаз эндонуклеазы и экзонуклеазы. Экзонуклеазы по своему действию относятся к классу гидролаз. Они катализируют реакцию последовательного гидролитического отщепления нуклеотидов от полинуклеотидной цени путем разрыва фосфодиэфирной связи. Эндонуклеазы катализируют расщепление фосфодиэфирных связей внутри молекулы нуклеиновой кислоты, проявляя определенную специфичность к одному из двух типов нуклеиновых кислот в соответствии с этим различают рибонуклеазы и дезоксирибонуклеазы, рассматриваемые в разделе Гидролазы . [c.296]

    Определяющий вклад в проблему внутриклеточной регуляции был сделан в 50-60-е годы Э.Сазерлендом, сформулировавшим представление о роли циклических нуклеотидов как вторичных посредников, накапливающихся в клетке в ответ на ней-ромедиаторный или гормональный стимул (первичный посредник) и осуществляющих связь между рецепторами и исполнительными системами. В результате дальнейшего развития этих исследований оказалось, что циклический аденозинмонофос-фат (цАМФ) регулирует обмен белков, углеводов, липидов и нуклеиновых кислот, влияет на проницаемость мембран, электрическую, сократительную и секреторную функции клеток, дифференцировку и пролиферацию. Установлена роль фосфорилирования белков как основного пути действия этого нуклеотида на клетки животных. Найдена связь между содержанием циклических нуклеотидов и характером протекания некоторых патологических процессов в тканях. Описано участие цАМФ и цГМФ в проявлении действия многих лекарственных препаратов на организм. Спустя лишь 10-15 лет после открытия, сделанного Э.Сазерлендом, представления о роли и механизме дей- [c.334]

    Геномы различных бактерий сравнивают по их размерам, общему содержанию оснований ДНК (молярная доля гуанина и цитозина в ДНК, %) по последовательностям нуклеотидов рибосомных РНК и степени гибридизации нуклеиновых кислот. Для разных прокариот установлены границы молярного содержания ГЦ в ДНК от 23 до 75%. Значение ГЦ постоянно для данного микроорганизма. Если по этой характеристике штаммы значительно отличаются (более чем на 10%), то это свидетельствует, что они относятся к разным родам. Однако близкие значения ГЦ в ДНК не обязательно говорят о филогенетическом родстве, поскольку организмы могут значительно отличаться по последовательностям нуклеотидов в ДНК. Поэтому более важным является сравнение гомологии участков ДНК или РНК изучаемых видов. Достаточно простыми и доступными являются методы гибридизации ДНК—ДНК или ДНК—рРНК сравниваемых объектов, которые используют после их выделения и очистки. [c.142]

    Изучение генотипа микроорганизмов стало возможным в результате успешного развития молекулярной биологии и привело к возникновению геносистематики. Исследование генотипа, основанное на анализе нуклеиновых кислот, в принципе дает возможность построить со временем естественную (филогенетическую) систему микроорганизмов. Филогенетические взаимоотношения бактерий оценивают определением содержания ГЦ в ДНК, ДНК—ДНК и ДНК—рРНК гибридизацией, с помощью ДНК-зондов, а также изучением последовательности нуклеотидов в 55, 165 и 235 рРНК см. гл. 8). [c.196]

    Белки имеют характерные спектры флуоресцешщи в ультрафиолетовой и видимой области. Пропорщюналь-ность интенсивности флуоресценции при определенных условиях содержанию белка в клетках является теоретической предпосылкой возможности количественной оценки. Однако практическому применению этого метода мешают трудности дифференцирования отдельных белков и разграничения бежов и ведущих себя сходным образом нуклеиновых кислот. Кроме того, такую же флуоресценцию дают связанные нуклеотиды (например, АТФ, АДФ). [c.316]

    Этот способ стал использоваться для определения количества белка с тех пор, как Варбург и Христиан 174] сообщили о методе, основанном на измерении оптической плотности при 260 и 280 нм, что позволяет ввести поправку на содержание в препаратах нуклеиновых кислот и нуклеотидов. Такая поправка очень важна, когда работают с сырыми экстрактами, но становится менее существенной по мере очистки белков и удаления мешающих веществ. В этом случае достаточно просто определить оптическую плотность при 280 нм. Белки поглощают при 280 нм единственно из-за присутствия в их молекулах остатков тирозина и триптофана (если только они не содержат поглощающих в УФ-свете простетических групп). Так как содержание этих двух аминокислот в белках очень сильно варьирует, коэффициент поглощения, выражаемый обычно как 280 или 280 также варьирует в значительной степени. У большинства белков величина 280 лежит в интервале 0,4—1,5, но имеются белки, занимающие по этому показателю крайние положения в ряду всех известных белков — это некоторые пар-вальбумины и сходные с ними Са +-связывающие белки (0,0), с одной стороны, и лизоцим (2,65) — с другой. Поглощение при 280 нм дает лишь приблизительное представление об истинном содержании белка исключение составляют чистые белки. Если точно известен коэффициент экстинкции чистого белка (он должен быть стандартизирован относительно сухого веса или по крайней мере относительно поглощения при 205 нм — см. ниже), то величина поглощения при 280 нм позволяет точно определить его содержание. По существу, это самый точный метод для определения чистых белков, поскольку в этом случае не требуется производить с ним никаких манипуляций, за исключением соответствующего разбавления. Разумеется, растворитель не должен поглощать при 280 нм, а если он поглощает — необходим точный контрольный опыт. Во время измерений белки не подвергаются никаким вредным воздействиям и не ра зрушаются, поэтому, хотя для точного определения нужно около 1 мг бел- [c.312]

    Долгое время для определения нуклеотидного состава ДНК и РНК использовали разделение нуклеотидов, нуклеозидов или свободных азотистых оснований, полученных в результате деструкции исследуемых нуклеиновых кислот, при помощи хроматографических методов с последующим спектрофотометрическим анализом природы и содержания каждого из оснований. Однако в последнее время классические методы анализа нуклеотидного состава нуклеиновых кислот заменены физическими методами. Так, содержание ТЦ-пар в составе ДНК сейчас находят по температуре плавления ДНК и по ее плавучей плотности. В первом случае содержание ГЦ-пар связано с температурой плавления ДНК следующей зависимостью ГЦ (мол. %) = ( пл—69,3)-2,44. Эта зависимость справедлива, если ДНК растворена в стандартном солевом растворе (0,15 моль КаС1 и 0,015 моль цитрата натрия в 1 л, pH 7,0). Во втором случае содержание ГЦ-пар прямо пропорционально значению плавучей плотности ДНК, определяемой при ее ультрацентрифугировании в градиенте плотности С8С1. [c.202]


Смотреть страницы где упоминается термин Нуклеотиды содержание в нуклеиновых кислотах: [c.80]    [c.14]    [c.218]    [c.60]    [c.221]    [c.130]    [c.449]    [c.263]    [c.442]    [c.520]    [c.143]    [c.520]    [c.323]    [c.142]    [c.354]   
Биохимия растений (1966) -- [ c.468 , c.481 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Нуклеиновые кислоты

Нуклеотиды



© 2025 chem21.info Реклама на сайте