Молекулярная масса и при помощи гель-хроматографии

Детальное обсуждение достоинств различных методов, используемых для фракционирования полимеров, выходит за рамки данной книги. Большинство этих методов достаточно сложно и требует длительного времени, причем число получаемых при разделении фракций в значительной степени зависит от продолжительности фракционирования. Следует различать препаративное фракционирование, когда осу-щ,ествляется разделение полимера на фракции с последующим определением молекулярной массы каждой фракции, и аналитическое фракционирование, при котором определяется молекулярно-массовое распределение без выделения каждой отдельной фракции. В первой группе методов следует упомянуть новую быструю методику фракционирования с помощью гель-проникающей хроматографии. В этом методе разделения используется хроматографическая колонка, в которой в качестве стационарной фазы применяют пористый набухший полимер сетчатого строения. По мере прохождения полимерного раствора по колонке молекулы полимера диффундируют через гель в соответствии с их размерами. Молекулы небольшой длины глубоко проникают в гель, и, следовательно, для их прохождения через колонку тре- [c.239]

Если снабдить ГПХ-хроматограф специальными детекторами, позволяющими определять молекулярные массы элюируемых полимерных фракций, — нефелометрическим и вискозиметрическим, то это облегчает последующую интерпретацию гель-хроматограмм и позволяет отказаться от калибровки хроматографа по молекулярной массе исследуемого полимера. Эти детекторы должны работать в паре с рефрактометрическим детектором, позволяющим определять концентрацию полимера в элюате. Сигналы обоих детекторов обрабатываются мини-ЭВМ в режиме оп Ипе . Если вискозиметрический детектор работает по принципу дифференциального манометра со стабилизированной скоростью течения раствора, то повышение давления, фиксируемое чувствительным датчиком, пропорционально вязкости элюата ц. Определяя одновременно с помощью рефрактометра концентрацию полимера с, удается получать соответствующие значения т]/с, совпадающие при малых концентрациях полимера со значениями характеристической вязкости [т]1. Подобный вискозиметр-рефрактометр позволяет, используя универсальную калибровку Бенуа, непосредственно в условиях ГПХ-эксперимента определять ММР любых полимеров (включая разветвленные) и сополимеров (однородных по составу внутри ГПХ-фракций). Если полимер известен, то, заложив в мини-ЭВМ значения констант Марка — Куна, можно получать ММР без предварительной калибровки хроматографа по молекулярной массе. [c.98]

Полученные гидролизаты анализируют различными методами гель-хроматографией, ионообменной хроматографией, электрофорезом и хроматографией на бумаге и в тонком слое, электрофорезом в полиакриламидном геле, методом пептидных карт на бумаге или в тонком слое (в одном направлении пептиды подвергаются электрофорезу, в другом — хроматографии) и др. При этом пептиды, содержащие остат ки аргинина, триптофана и гистидина, могут быть открыты с помощью специфических цветных реакций (с. 129). Выбор метода диктуется величиной (молекулярной массой) и характером пептидов гидролизата. [c.139]

Кислые компоненты высококипящих дистиллятов американских нефтей (370—535 и 535—675°С) исследовались [36] с помощью ИК-, масс- и флуоресцентной спектроскопии определены карбоновые кислоты, фенолы, карбазолы и амиды. В ИКС обнаружены все характерные ПП 1750—1730 (С=0 мономера) и 1700—1710 (С=0 димера) карбоновых кислот 3585 и 3540 (О—Н) фенолов двух типов, 3460 (N—Н) карбазолов, 1700—1650 (С=0 мономера и димера) амидов. Для расчета относительных количеств каждого типа соединений предварительно были рассчитаны групповые молярные коэффициенты экстинкции из ИКС модельных соединений (табл. 1). Для всех типов соединений молекулярная масса принята равной 350. Для количественных определений предложены два ИК-метода. По первому снимались ИКС отдельных подфракций после гель-хроматографии кислого концентрата, измерялись площади под соответствующими ПП п вычислялось содержание каждого типа соединений в граммах. Затем строилась кривая весового распределения этого типа в подфракциях. Содержание каждого типа соединений в суммарном кислом концентрате определялось измерением площадей под кривыми весового распределения типов и сравнением их с площадью под кривой весового распределения кислого концентрата по подфракциям. Второй ИК-метод предусматривал запись ИКС всего кислого концентрата, определение интегральных интенсивностей для каждого типа соединений в концентрате и расчет концентраций в образце. Основная трудность состояла в правильном разрешении (рис. 2) сложных контуров поглощения в областях 3600—3400 (фенолы и карбазолы) и 1800—1600 см (карбоновые кислоты, амиды, ароматические кольца). Преимущество второго способа — в быстроте определения. [c.28]

При определении с применением гель-хроматографии ранее неизвестных молекулярных масс следует помнить, что полученные значения молекулярных масс являются лишь приближенными и их необходимо подтвердить с помощью другого независимого метода, например ультрацентрифугирования. Определяя молекулярные массы методом гель-хроматографии, всегда следует проводить калибровку при данных экспериментальных условиях на нескольких соединениях подобного же типа с различными, но заранее известными молекулярными массами. [c.390]

Знание таких усредненных молекулярных характеристик полимеров, как средняя характеристическая вязкость < [г ] >, среднемассовая М и среднечисленная молекулярная масса, существенно расширяет возможности гель-проникающей хроматографии при анализе полимеров. В предыдущих разделах мы видели, как можно определять с помощью ГПХ константы уравнения Марка — Куна — Хаувинка К, и а, ММР и параметры длинноцепной разветвленности ветвящихся полимеров, если для них измерены значения средних характеристических вязкостей < ]1] ] >. [c.244]

Разделение происходит потому, что стационарная фаза имеет поры разного диаметра. Более мелкие молекулы могут проникать в большее число пор, чем более крупные молекулы, и потому они более длительное время будут находиться в колонке, чем более крупные молекулы, и, следовательно, более крупные молекулы будут вымываться из колонны первыми. Молекулы еще большего размера, которые не могут проникнуть даже в самые крупные поры используемого носителя, сразу проходят через колонку без разделения. Промежуток времени, за который молекула проходит через всю колонну, зависит от размера молекулы и ее массы. Поэтому если прокалибровать колонну по образцам с известной молекулярной массой, то с помощью гель-хроматографии можно определять молекулярную массу. [c.319]

В работе [761] изучался состав продуктов деструкции нестабилизированного полипропилена после его переработки в расплаве, причем определялось изменение молекулярной массы. Авторы этой работы использовали вискозиметр Брабендера для моделирования условий, в которых происходит переработка полимеров. Состав и количество образующихся карбонильных соединений определяли с помощью ИК-спектроскопии и химическими методами (путем обработки щелочами и кислотами). Для определения молекулярной массы использовалась гель-проникающая хроматография полученные данные позволили рассчитать число разрывов цепи на одну функциональную группу в окисленном образце. [c.201]

С 1964 г. гель-проникающую хроматографию (ГПХ) стали щироко применять в химии и технологии полимеров как быстрый и надежный метод определения молекулярных масс и молекулярно-массовых распределений (ММР) пластмасс, смол, каучуков и т. п. В настоящее время этот метод практически полностью вытеснил ранее существовавшие трудоемкие методы фракционирования полимеров. В промышленности ГПХ используют для идентификации и анализа новых полимеров, а также для контроля за качеством продукции [1]. При помощи метода ГПХ можно не только быстро установить несоответствие полимера техническим требованиям, но даже иногда указать причину нарушения технологии, поскольку кривая молекулярномассового распределения непосредственно отражает условия получения полимера. Это относится как к процессам полимеризации и поликонденсации, так и к процессам приготовления полимерных композиций на основе заранее синтезированных компонентов [2]. В таких случаях нет необходимости иметь хроматограмму в виде истинной кривой распределения, поскольку прямое сопоставление графиков, полученных методом ГПХ в стандартных условиях, дает достаточную информацию о соответствии полимера техническим требованиям. Хроматограммы можно получать за 3—4 ч, причем очередной образец полимера можно вводить в колонку, не дожидаясь выхода предыдущего. Как метод разделения веществ по молекулярной массе ГПХ применяют для определения концентрации и типа низкомолекулярных добавок к полимеру, например органических растворителей, антиоксидантов, пластификаторов и пр. В настоящее время выпускают различные хроматографические материалы, предназначенные для разделения методом ГПХ низкомолекулярных веществ, а сам метод успешно используют для анализа смазочных материалов, полигликолей, асфальтенов и ряда других олигомерных соединений. [c.280]

На основании различий в молекулярной массе белки могут быть разделены с помощью гель-хроматографии на специальных пористых полимерах (сефадексах). [c.24]

Рис. 17-21 демонстрирует, как распределяются продукты реакции полимеризации ео их молекулярным массам при разделении их с помощью гель-проникающей хроматографии. В этом случае пористым материалом служил мягкий полистирольный гель, сшитый с 2% диви- [c.600]

В гель-хроматографии применяются наполнители различных марок, отличающиеся размером пор. При использовании в качестве наполнителя, например, сефадекса марки 0-50 для разделения фракций поли-21Тиленгликоля Н(-СНОН—СНг—),,0Н первыми будут выходить из колонки фракции с относительной молекулярной массой больше 10 000 (/< =0). Последними будут выходить фракции полимера с молекулярной массой, меньше 500, и в их числе часто присутствующие минеральные соли (ЫаС1 и др.), для которых К = Таким образом, с помощью се( )адекса 0-50 могут быть разделены фракции полиэтилеигликоля с молекулярной массой в области 500—10 000. [c.59]

Большие возможности структурных исследований нефтяных порфиринов открылись с началом использования масс-спектромет-рии. Первые же работы с применением этого метода, появившиеся в 1966—1967 гг., выявили значительную сложность состава порфиринов нефти и, прежде всего, наличие в них соединений нескольких изобарных серий и широкого набора молекулярных масс. В конце 60 — начале 70-х гг. опубликовано несколько работ зарубежных авторов, где затронуты весьма важные вопросы методологии исследования и выявлены некоторые структурные характеристики порфиринов нефтей. В частности, были подобраны оптимальные условия съемки масс-спектров низкого разрешения, с помощью гель-хроматографии показано наличие в порфиринах сланцев соединений с высокими молекулярными массами, анализом кислотных гидролизатов нефтяных порфиринов обнаружены связанные с ними аминокислотные остатки, предложен метод окислительной деградации порфиринов в малеинимиды, позволяющий определить заместители на каждом пиррольном кольце порфиринов. [c.319]

Следует отметить, что степень полидисперсности с-фальтенов очень высока. Так, было показано [58]., что отношение средневесовой молекулярной массы асфальтенов к среднечисловой составляет 3,5. Действительно, молекулярно-весовое распределение асфальтенов, полученное с помощью гель-хроматографии, оказалось в пределах от 650 до 40000 [11]. Это также может косвенно свидетельствовать [c.11]

Сложность состава асфальтенов заставляет искать пути фракционирования их на более узкие, поддающиеся изучению группы. Большинство методов фракционирования основывается на различной растворимости асфальтенов в ряде растворителей [20]. Причем анализы построены на принципе дробного осаждения [20, 59, 64] или ступенчатой экстралсции [20, 65, 66]. Они показали, что по мере уменьшения растворимости фракций растут их молекулярная масса, степень ароматичности и конденсированности. Эти выводы в основном были подтверждены при фракционировании асфальтенов с помощью гель-хроматографии [И, 34]. [c.13]

В табл. 6.14 дан список белков, использованных Брайсом и Кричтоном [6] для калибровки заполненной сефарозой 6В колонки при элюировании 6М раствором гуанидингидрохлорида, а на рис. 6.18 показана кривая зависимости gM от Kav При определении с применением гель-хроматографии ранее неизвестных молекулярных масс следует помнить, что полученные значения молекулярных масс являются лишь приближенными и их необходимо подтвердить с помощью другого независимого метода, например ультрацентрифугирования. Определяя молекулярные массы методом гель-хроматографии, всегда следует проводить калибровку при данных экспериментальных условиях на нескольких соединениях подобного же типа с различными, но заранее известными молекулярными массами. [c.390]

Определение молекулярных характеристик по данным эксклюзионной хроматографии проводят с помощью калибровочной кривой, отражающей связь удерживаемых объемов с молекулярной массой. Существует несколько методов калибровки хроматографической системы. Наиболее надежным из них является калибровка по узкодисперсным образцам исследуемого полимера (М лг/Мп=<1,1). В этом случае хроматографируют ряд стандартов, перекрывающих требуемый диапазон молекулярных масс, измеряют удерживаемые объемы в максимумах пиков и строят зависимость логарифма молекулярной массы от удерживаемого объема, получая калибровочную кривую типа показанной на рис.2.16. Если по каким-либо причинам не удается получить линейную калибровочную зависимость, то нелинейную 8-образную кривую аппроксимируют полиномом (обычно достаточно полинома третьей степени). Этот метод часто используют при исследовании индивидуальных макромолекул, в частности, белков. Так, на рис.2.18 приведена Калибровочная зависимость для геля TSK3000SW, построенная по 25 белкам. Однако для многих типов синтетических полимеров такие стандарты обычно отсутствуют, а их приготовление чрезвычайно трудоемко. Наиболее доступны стандарты полистирола. Они, как правило, имеют нормальное логарифмическое ММР, для которого справедливо соотношение Мр= /Муу Мп (Мр — молекулярная масса, соответствующая максимуму пика полимера), и широко применяются в практике эксклюзионной хроматографии. При использовании калибровочной кривой, построенной по полистирольным стандартам, для определения молекулярных характеристик других полимеров результаты получают в относительных величинах (в так называемой полистирольной шкале ). [c.53]

Очень часто нужно решать задачи, связанные с разделением сульфонатов лигнина. Эти вещества могут выделяться в чистом виде из сульфитного щелока (отработанного) посредством обработки его трихлоридом гексамминкобальта и превращением его в бариевые соли на ионообменной колонке [41]. Используя сефадекс 0-75 и 0-100, можно получить фракции с молекулярными массами вплоть до 100 000. Механизм разделения лигно-сульфонатов кальция и лития с помощью гель-хроматографии был исследован на колонке, наполненной сефадексом 0-25 и 0-50, при использовании в качестве элюента воды, смеси диок-сан—вода и водных растворов хлоридов кальция и лития [42]. [c.57]

Лецитины яйца были достаточно хорошо отделены от нейтральных липидов. Киселев [86] фракционировал липиды, содержащиеся в тканях мозга, на сефадексе LH-20. В смеси хлороформ—метанол (2 1) сефадекс вел себя как слабоосновный анионит, так что фосфолипиды разделялись в соответствии с их основными свойствами. Однако в смеси хлороформ—метанол— вода (65 35 8) сефадекс выступает в роли молекулярного сита, и поэтому вещества разделялись согласно их молекулярным массам. Использование метилированного сефадекса рассмотрено в обзоре [87] сефадекс G-25 был метилирован так, чтобы содержать 40% метоксигрупп липиды элюировали смесью хлороформ—метанол—вода (85 85 30). При этих условиях фосфолипиды элюировались в первой фракции наряду с липопептидами и глиголипидами. DEAE-целлюлоза оказалась полезна для фракционирования кислых липидов, содержащихся в Es heri hia соИ [88]. Фосфолипиды успешно были выведены также с помощью гель-хроматографии на сефадексе LH-20 [77, 89]. [c.208]

Применение колоночной жидкостной хроматографии (КЖХ) для анализа состава почв носило до недавнего времени ограниченный характер. При анализе гумуса почвы основное внимание уделяли разделению экстрактов на компоненты фракциониробанием по молекулярной массе с помощью гель-хроматографии на сефадексе. Соотношения количеств компонентов, присутствующих во фракциях с различными молекулярными массами, используют для качественной характеристику гумусовых кислот (фульвокислот и гуминовых кислот) из разных типов почв. [c.272]

Предварительное фракционирование по молекулярным массам дает большой эффект при последующем фракционировании на хроматографических колонках. Так, если смесь должна быть фракционирована в широком диапазоне молекулярно-массового распределения, то применение гель-хроматографии малоэффективно, так как раствор должен быть пропущен через ряд колонок, чтобы достичь нужной степени разделения индивидуальных компонентов. Но если исходную смесь предварительно разделить с помощью ультрафильтрации на несколько фракций, то дальнейшее фракционирование на хроматографических колонках не представляет труда. При этом разделение будет пр01ведено не только быстрее, но и качественней. Более того, ультрафильтрацией рас- [c.284]

На рис. VI-3 показано молекулярно-массовое распределение исходного и фракционированного с помощью ультрафнльтрации поливинилпирролидона (использовались мембраны, задерживающие вещества с молекулярной массой от 50 000 и выше). Помимо того что данный процесс очень эффективен, использование ультрафильтрации в гель-хроматографии позволяет быстро оценить молекулярно-массовое распределение простым измерением вязкости или концентрации. [c.285]

С помощью гель-хроматографии впервые удалось разделить высокомолекулярные соединения на группы [70]. Для разделения соединений в широком интервале молекулярных масс использовали многоступенчатую колоночную хроматографию с применением трех типов сефадекса [71]. Большой интерес представляет разделение природных высокомолекулярных органических соединений на порагеле-100 с помощью новой высокоскоростной методики, которая позволяет получить более точные результаты [72]. [c.408]

С помощью СФХ можно определять соединения со значительно более высокими молекулярльши массами, чем в ГХ. Молекул ные массы могут быть такими же, как и в ЖХ, то есть до 10. Соединение с более высокими молекулярными массами, до 10 , могут быть разделены только гель-хроматографией. [c.301]

Частичный гидролиз полисахаридов позволяет выделить фрагменты с промежуточной молекулярной массой и разделить их с помощью таких хроматографических методов, как гель-фильтрация, ионообменная или распределительная хроматография. Строение этих более простых олигосахаридов установить легче, чем строение исходного полисахарида. Если все гликозидные связи в полисахариде гидролизуются с одной и той же скоростью (как, например, в линейных гомополисахаридах), то, например, в случае-амилозы продукт частичного гидролиза будет состоять из глюко.чы и ряда олигосахаридов — мальтозы, мальтотриозы и мальтотетра-озы. В гетерополисахаридах присутствуют гликозидные связи разных типов, и скорости гидролиза их различны. Фуранозиды обычно гидролизуются быстрее пиранозидов в 10—1000 раз, что приводит например, к удалению остатков арабинофуранозы, связанных с остатками ксилопиранозы в арабиноксиланах. Условия гидролиза влияют также на специфичность расщепления полисахарида. (1- 6)-Связи более устойчивы к действию минеральных кислот чем (1- 4)-связи, однако если гидролиз проводился в уксусном ангидриде, содержащем около 5 % серной кислоты, менее устойчивы (1-)-б)-связи. Параллельное использование этих двух методов гидролиза, приводящих к образованию фрагментов разного состава, позволит лучше воспроизвести строение полисахарида. Концентрация углеводов в реакционной смеси должна быть ниже [c.219]

Частичный гидролиз полисахаридов иозволяет выделить фрагменты с промежуточной молекулярной массой и разделить их с помощью таких хроматографических методов, как гель-фильтра-цня, ионообменная или распределительная хроматография. Строение этих более простых олигосахаридов установить легче, чем строение исходного полисахарида. Если все гликозидные связи а полисахариде гидролизуются с одной и той же скоростью (как, например, в линейных гомоиолисахаридах), то продукт частичного-гидролиза будет состоять из моносахаридов и соответствующих гомоолигосахаридов. [c.60]

Характеристика материала. ПММА представлял собой коммерческий материал, плексиглас RV 811, производимый фирмой Rohm and Haas Со. Этот полимер был специально выбран вследствие его широкого использования в качестве акрилового термопласта. Полимер анализировали методом гель-проника-ющей хроматографии. Молекулярные массы, определенные с помощью калибровки по полистиролу, указывают на то, что среднемассовая молекулярная масса составляет 1,5-105, [c.513]

В этой главе будут рассмотрены методы оценки ММР с помощью препаративного фракционирования, скоростпой седиментации, гель-проникающей хроматографии н турбндиметрии. Каждый из этих методов имеет свои преимущества и недостатки. Метод скоростпой седиментации является самоконтролируемым на том же приборе можно определить и абсолютную молекулярную массу в другом опыте. Метод гель-проникающей хроматографии значительно быстрее позволяет получить необходимую информа- [c.206]

III. Бланделл с сотр. [39] разрушали складчатые участки цепей, обрабатывая монокристаллы полиэтилена дымящейся азотной кислотой, и определяли молекулярно-массовое распределение образовавшихся фрагментов с помощью гель-проникающей хроматографии. На хроматограммах были обнаружены пики при значениях молекулярной массы, соответствующей номинальной, удвоенной и утроенной толщине кристалла. Результаты этого эксперимента, которые, по-видимому, являются первым однозначным доказательством существования резкого периодического складывания макромолекул, можно объяснить с помощью рис. III.61 следующим образом. В результате травления азотной кислотой большая часть складок разрушается, однако могут оставаться также фрагменты с одной [c.227]

Р. Филби [И] изучил распределение ряда микроэлементов по фракциям высокомолекулярных соединений (ВМС) из калифорнийской нефти, выделенным с помощью гель-фильтрацион-ной хроматографии и различающимся по средним молекулярным массам. Полученные им результаты характеризуют микроэлементный состав собственно молекул лишь для самых низкомолекулярных фракций смол и асфальтенов. Чрезмерно высокие значения измеренных масс остальных смолистых и асфальтеновых компонентов указывают, что последние являются крупны.ми полимолекулярными ассоциатами, в образовании которых важную роль должны играть микроэлементы, связывающие отдельные макромолекулы за счет донорно-акцепторных взаимодействий. [c.215]

Гель-хроматография (гель-фильтрация, или ситовая хроматография) — метод разделения, очистки и анализа веществ, основанный на различии в размерах или массе молекул. В качестве стационарной фазы используют различные гели с трехмерной сетчатой структурой декстраны (полисахариды), полиакри ламиды, пористые силикагели, цеолиты и др. При разделении смеси небольшие молекулы диффундируют через поры набухшего в растворителе геля, а крупные молекулы проходят через пространство между частицами геля. При промывании геля растворителем в первую очередь перемещаются крупные молекулы, а затем уже мелкие, т. е. компоненты смеси элюируют в порядке уменьшения их молекулярной массы. Гель действует как молекулярное сито. Аппаратурная простота метода и мягкие условия разделения способствовали особенно широкому применению гель-хроматографии в биохимических исследованиях. Основное назначение гель-хроматографии — разделение высокомолекулярных веществ. С ее помощью выделены и очищены многие ферменты, пептидные гормоны, нуклеиновые кислоты. [c.498]

Основным детектором в гель-хроматографе является дифференциальный рефрактометр с чувствительностью 10 -4-10 . Через рабочую и сравнительную кюветы рефрактометра (объемом 10—25 мкл) пропускают соответственно анализируемый раствор полимера и растворитель. При этом с помощью дросселирующего устройства и балластных хроматографических колонок в сравнительной линии выравниваются давление и скорость потоков через рабочую и сравнительную кюветы рефрактометра. Гидравлическая схема хроматографа ХЖ-1303 показана на рис. III. 11. В качестве второго детектора в гель-хроматографе используется фотометрический (спектрофотометрический) детектор. Он обеспечивает, например, непрерывный анализ состава сополимера, синхронный с определением молекулярной массы. Специальные устройства отключают хроматограф при повышении температуры и давления сверх заданных величин. Это обеспечивает автоматическую работу [c.99]

При адсорбционной ТСХ блоксополимеров СТ — БД в системе циклогексан — хлороформ (9 1) с постепенным добавлением хлороформа возможно разделение двух- и трехблочных сополимеров при этом Rf трехблочного сополимера меньше, чем двухблочного (т. е. двух- и трехблочные сополимеры СТ — БД движутся но нластинке в ином порядке, чем более полярные блоксополимеры СТ — ММА). В этой системе значения сополимеров СТ — БД не зависят от М. При использовании осадительной ТСХ в системе хлороформ — метанол (3 2) с добавлением метанола удается разделить блоксополимеры по молекулярной массе. Применение этих систем дало возможность с помощью двумерной ТСХ установить, что промышленный блоксополимер СТ — БД Кратон-101 состоит из трех компонентов двух трехблочных сополимеров одного состава, но разной М и ПС с = = 10. Эти данные совпали с результатами анализа Кратон-101 на гель-хроматографе с рефрактометрическим и спектрофотометрическим детекторами. [c.310]

Эксклюзиопная хроматограмма асфальтенов любого происхождения, полученная методом ГПХ на твердом геле vit-X в смеси хлороформа с изопропиловым спиртом (9 1), носит бимодальный характер. Калибровка кривой с помощью препаративной хроматографии показала, что фракция асфальтенов, входящая в первые 10—15 мни (соответствующая высокомолекулярному пику), имеет среднюю молекулярную массу 1600—1700 фракции асфальтенов, элюируемые в последующие 15—25 мин,— [c.37]

И спользованне аффинной хроматографии тем не менее не ограничивается только выделением биологически активных веществ. Уже в 1960 г. Яги и др. [22] описали определение небольших количеств антител с помощью нерастворимых носителей с привязанными антигенами. Применение нерастворимых носителей в количественном радиоиммунном анализе детально рассмотрено в ра.зд. 11.7. Иммобилизованные олигомеры полнтпмидиловой кислоты использовали Эдмондс и др. [11] для количественного определения полнадениловой кислоты. Аффинная гель-фильтрация как микрометод при экспрессных определениях молекулярных масс [c.16]

При создании точных функциональных полимерных мембран с помощью радиационно-индуцированной полимеризации и контроля процесса прививки весьма полезно знать молекулярно-массовое распределение в прививке. В частности, длина и плотность полимерных цепей, привитых на микрофильтровальные мембраны из триацетатцеллюлозы, определяют проницаемость жидкости и адсорбцию молекул на созданной мембране. Например, молекулярно-массовое распределение метилметакрилата, привитого на триацетатцеллюлозу, было найдено с помощью кислотного гидролиза подложки. Молекулярно-массовое распределение определялось также методом гель-проникающей хроматографии [71]. Этот метод эффективен только если можно разрушить подложку. Например, при прививке натурального каучука обработка озоном является очень удобным процессом для разрушения сегментов каучука с оставлением цепи пластполимера нетронутыми [72]. Альтернативой является окисление надбензойной кислотой [73]. Осмометрию или измерение вязкости раствора можно использовать для определения молекулярной массы изолированной некаучуковой фракции. [c.221]

Гель-проникающая хроматография имеет преимущества перед другими методами фракционирования, так как здесь происходит разделение только по молекулярным массам, в то время как в других методах, основанных на растворимости полимеров, разделение может одновременно происходить и по химическому составу (если полимер неоднороден по химическому составу). Этот метод очень эффективен для разделения олигомеров. С его помощью можно разделять димеры, тримеры, тетрамеры и т. д. [c.297]

Наиболее часто тонкослойную хроматографию используют для определения молекулярной массы белков и белковых соединений. Показано [193, 194], что при помощи тонкослойной гель-фильтрации можно проводить приблизительную оценку молекулярной массы белков, используя сефадексы 0-75 и 0-200. Объем элюирующего буферного раствора находится в линейной зависимости от логарифма молекулярной массы белка [195]. [c.117]

Важно отметить, что степень набухания глобул, измеренная этим методом, практически совпала с результатами препаративного центрифугирования. Эти данные свидетельствуют о том, что плотность сетки химических связей в глобулярном геле фторкаучуков относительно невелика (типична для глобулярных микрогелей, полученных при эмульсионной полимеризации). Однако при умеренных температурах она возрастает вследствие влияния вклада физических узлов сетки, связанных с сильным межмолекулярным взаимодействием во фторкаучуках. Поэтому общая плотность сетки возрастает, и глобулярные образования приобретают высокую устойчивость. Близкие к приведенным в табл. 1.3 результаты получены в работе [5]. С помощью методов гель-хроматографии определена молекулярная масса высокомолекулярной фракции каучука СКФ-26, равная 2-10 и число узлов разветвления на такую молекулу , равное 5-10 Завыщен-ная степень сшивания, очевидно, связана с заниженным размером элюируемой частицы (глобулы), равным 50 нм, который определяли расчетным путем с учетом ряда допущений. На основании полученных данных авторами работы [5] разработан новый количественный метод определения гель-фракции СКФ-26 с помощью ГПХ-анализа растворов СКФ-26. [c.30]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология