Пурины флуоресценции

Количественное определение нуклеиновых кислот. Принцип метода основан на выделении рибонуклеиновых (РНК) и дезоксирибонуклеиновых (ДНК) кислот и на дальнейшем их анализе прямыми и косвенными методами. К прямым методам относятся такие, которые включают гидролиз нуклеиновых кислот с последующим выделением из гидролизатов пуринов и пиримидинов и определение их хроматографическим методом. Хроматография позволяет производить точный микроанализ нуклеиновых кислот. Исследование пуринов и пиримидинов проводят в ультрафиолетовом свете, наблюдая флуоресценцию пятен на хроматограммах или в экстрактах, полученных из соответствующих участков хроматограмм. Кроме хроматографического метода, применяют также способ электрофореза на бумаге. [c.60]

Исследованы спектры флуоресценции ряда пуринов, представляющих интерес с биологической точки зрения [26—30]. Эти спектры весьма характерны для различных пуриновых производных и, как правило, зависят от pH. Гуанин, например, имеет флуоресцентный эмиссионный максимум при pH 11, равный 340 ммк, а при pH 2—355 ммк [30]. [c.210]

Достаточно широко изучены флуоресцентные свойства производных пурина. Незамещенный пурин в спектре поглощения имеет две полосы с максимумами в области 242 и 263 нм. В метилциклогексане и в диоксане при 77 К он не флуоресцирует, а в дихлорэтане, метаноле, глицерине наблюдается флуоресценция в области 350— 380 нм. Измерения спектров поглощения, флуоресценции и фосфоресценции в разных растворителях указывают на то, что нижнее возбужденное синглетное состояние соответствует п -> я -переходу, а Г 5 о-излучение принадлежит я л -переходу [53]. Введение электронодонорных заместителей сказывается на положении длинноволновой полосы поглощения. В положениях 2 и 8 эти заместители вызывают батохромный, а в положении 6 — либо батохромный [c.129]

Тушение флуоресценции рпбофлавипа пуринами обус.довлп-вается образованием комплексов с теплотой диссоциации око.ло ккал [c.11]

К этим выводам автор приходит в резу.дьтате изучения процессов тушения флуоресценции рибофлавина электро.литами и пуринами. Приведены измеренные автором величины степени [c.11]

Однако гораздо более чувствительным является оиределение пуринов на основе их флуоресценции после окисления хлором. Бумагу при 50 100%-ном насыщении водой оставляли в течение 3 мин в атмосфере хлора ипослесушки при 80—90° несколько минут выдерживали в атмосфере, насыщенной аммиаком. Ксантиповые производные дают фиолетовое окрашивание, все остальные пурины флуоресцируют зеленым цветом. Другие флуоресцирующие вещества из растительного материала при действии хлора утрачивают флуоресценцию и поэтому не мешают обнаружению. Чувствительность проявления составляет 0,2 1г (Михль.) [c.510]

Таким путем удается добиться и разделения сахаров. Хроматография на бумаге была применена для качественного анализа редуцирующих сахаров в таких разнообразных материалах,. как яблочный сок, яичный белок и кровь [49, 216]. Для локализации положения отдельных сахаров на бумаге был применен аммиачный раствор окиси серебра, хотя в более поздней работе указывается, что флуоресценция, появляющаяся после конденсации редуцирующего сахара с ж-фенилендиамином, дает более надежные результаты. Как силикагель, так и фильтровальная бумага были применены для хроматографического разделения органических кислот, выделенных из фруктов [99, 139]. На этом же принципе основано определение молочной кислоты в молоке и янтарной — в яичных продуктах [60]. Особый интерес для биохимика представляет применение хроматографии на бумаге для разделения пуринов, пиримидинов и нуклеозидов из гидролизата нуклеиновой кислоты [134]. Удалось улучшить метод определения витамина В в рыбьих жирах и продуктах облучения эргостерина, основанный на измерении характерной абсорбции в ультрафиолетовом свете или интенсивности окраски производных с треххлористой сурьмой точность определения была значительно повышена после хроматографического удаления примесей, мешающих определению [79, 95]. [c.164]

Аналогичные исследования иа олигонуклеотидах были выполнены для комплексов с этидием. Следить за образованием комплексов в этом случае можно по изменению флуоресценции и поглощения, а также спектров ЯМР. Результаты исследований методом ЯМР подтверждают, что и в растворе сахара принимают конформации С-3 -эндо (3 -> 5 ) С-2 -эндо, характерные для больщинства кристаллических комплексов с интеркаляцией лигандов. Полученные для растворов данные были неожиданными в одном отнощенин оказалось, что комплексы с UpA UpA, pG pG и UpG СрА значительно стабильнее, чем комплексы с соответствующими изомерами, имеющими обратные последовательности. Тот факт, что в смеси некомплементариых динуклеозидфосфатов практически отсутствуют комплексы с этидием, указывает на необходимость образования в комплексах двойной спирали. Было показано, что этидий предпочтительно связывается с двухцепочечными последовательностями пиримидин(3 -> 5 )пурин. Эта специфичность, однако, не является абсолютной, и полученные данные носят качественный характер Крайне важно тем не менее, что даже такая простая молекула, как этидий, способна узна вать некоторые специфические последовательности нуклеиновых кислот. Не удивитель но, что белки, взаимодействующие с ДНК, обладают несравненно более высокой специ фичностью, связываясь лишь со строго определенными последовательностями ДНК и РНК. Следует отметить, однако, что физическая природа специфичности взаимодействия этидия с нуклеиновыми кислотами еще не вполне ясна. [c.379]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология