Пурины, разделение

Разделение методом ХТС и методом хроматографии на бумаге пуринов и пиримидинов, а таюке их нуклеозидов (растворитель — вода) [69] [c.444]

Одновременное разделение пуринов, пиримидинов, аминокислот и других азотистых соединений ионообменной хроматографией [1473]. [c.211]

Рис. 37.5. Разделение пуринов и пиримидинов на колонке со смолой дауэкс 1.

Разделение и анализ пуринов 595 [c.12]

Среди методов, используемых для аналитического и препаративного разделения пуринов, следует отметить бумажную, колоночную (иногда на субстратах, пропитанных солями меди и серебра), газожидкостную, ионообменную, тонкослойную и высокоэффективную жидкостную хроматографию, а также электрофорез на бумаге и гель-фильтрацию на сефадексе G-10. [c.595]

В настоящее время распределительную хроматографию на бумаге широко применяют - для разделения аминокислот, аминов, белков, углеводов, алифатических кислот, стероидов, пуринов, фенолов, антибиотиков, витаминов, неорганических соединений и т. д. [c.106]

Схема разделения гуминовых соединений, пуринов, пиримидинов и керогена [c.21]

В то время как дезоксицитидин-3 - и -5 -фосфаты могут быть получены аналогичным образом [21], хорошо известная лабильность гликозидной связи пуринов при кислотном гидролизе создает сложности при синтезе пуриновых нуклеотидов. Они были преодолены тщательным разделением смеси 3 - и 5 -моноацетатов дезоксиаденозина, полученной в результате частичного дезацети-лирования 3, 5 -ди-0-ацетилдезоксиаденозина (20) [20], Структура этих моноацетатов была подтверждена тем, что в результате мягкого кислотного гидролиза первого из них образуется известная 3-0-ацетилдезоксирибоза (21). Изомерные моноацетаты были раздельно подвергнуты фосфорилированию, и после удаления защитных групп получены дезоксиаденозин-З -фосфат (22) и -5 -фос-фат (8) схема (5) . Аналогичная процедура была использована для синтеза дезоксигуанозин-З -фосфата и -5 -фосфата (9) [22]. [c.38]

Белер [1] осуществил разделение трех пуринов на слоях силикагеля, приготовленных обычным способом, используя различные растворители (см. табл. 58). После разделения проводили обнаружение путем сублимирования пуринов на охлаждаемую пластинку, накладываемую на хроматограмму. Чувствительность 1—5 1г. Таким же образом были обнаружены барбитуровые кислоты. Другими авторами [7] были разделены методом ХТС мочевая кислота, ксантин, гипоксантин и 6-меркаптопурин, а также кофеин, теофиллин и ксантин. [c.310]

Согласно Тамму, Шапиро, Лифшицу и Чаргафу [88], дистиллированная вода пригодна для разделения методом хроматографии на бумаге пурин-и пиримидин-оснований и их нуклеозидов. Рандерат [69, 71], а также Рандерат и Струк [70] нашли, что вода обеспечивает также хорошее разделение на слое целлюлозы в течение 45 мин. Рандерат [69] использовал воду для фракционирования пуклеооснований и нуклеозидов на силикагеле Г. [c.443]

Кон, впервые сообщивший в 1949—1950 гг. о ионообменной хроматографии осколков нуклеиновых кислот на синтетических обменных смолах [16—18], затем указал, что разделение этих веществ нужно проводить методом анионо- или катионообменной хроматографии [23]. Он применил оба вида хроматографии для разделения пуринов и пиримидинов [16], нуклеозидов и нуклеотидов [17—19, 24, 46]. [c.446]

Слой эктеола, в зависимости от растворителя, может служить в качестве неподвижной фазы при распределительной хроматографии или в качестве ионообменника. Дистиллированная вода в качестве растворителя пригодна для разделения пуринов и пиримидинов, а также их нуклеозидов, на слоях [c.448]

Масс-спектральные исследования [3], часто в комбинации с разделением полностью триметилсилилированных пуринов методом ГЖХ выявили направления фрагментации, характерные для молекул азотистых гетероциклов, т. е. потерю H N, Me N и в случае оксопроизводных — фрагментов СО. Наблюдаемый для некоторых 7-метил-6-тиозамещенных необычный ион (М—1) +относят к структурам (14), имеющим дополнительный пятичленный цикл, возникший за счет образования связи между серой и соседней метильной группой [17]. [c.594]

Одним из основных факторов, обусловивших быстрое развитие биохимии нуклеиновых кислот после 1945 г., была разработка хроматографических методов, пригодных для разделения пуринов и ниримидинов и их производных. Эти методы нашли широкое применение не только при определении нуклеотидного состава нуклеиновых кислот, но и при изучении различных сторон метаболизма нуклеиновых кислот [3, 4, 5, 6, 17]. Все известные хроматографические методы можно разделить на 3 группы [c.29]

Собраны сведения о разделении фосфорорганическпх пестицидов, инсектицидов, стероидов, гиббереллинов, пигментов, сложных эфиров, пуринов, сахаров, мономеров и олигомеров в найлоне, тирнмидинов, фенолов, ароматических кислот, спиртов, алкалоидов, аминокислот, карбоновых кислот, смол, карбонильных соединений, амидов, пищевых консервантов, органических галогенпроизвод-ных, иодотирозинов и триглицеридов. Описано также разделение [68, 69] протеинов, ферментов, нуклеиновых кислот, углеводов, пептидов, липидов, гуминовых кислот, сырой нефти, полимеров, например полиэтилена, полибутадиена и ацетата целлюлозы. Гель-хроматография может быть применена для обессоливания растворов, для выделения лития из солевых рассолов [82], а также для удаления низкомолекулярных соединений из растворов высокомолекулярных веществ. [c.550]

Ионообменные смолы обычно наиосят иа пластинки в виде смесей с целлюлозой (ср. [32]). В этих целях можно использовать большое число товарных продуктов (см. гл. 5, разд. 5.6) с гранулами размером 40—80 мкм, например дауэкс-50. Его сначала переводят в требуемую форму, после этого смешивают в ступке 5 г порошка целлюлозы МНЗОО с несколькими миллилитрами дистиллированной воды и к этой смеси небольшими порциями добавляют при перемешивании суспензию 30 г ионообменника в 20—30 мл воды. В заключение добавляют еще 25 мл воды. Полученную суспензию наносят слоем толщиной Ю,25 мм и сушат при комнатной температуре. Приготовленные лластинки хранят в закрытой коробке, причем их надо обязательно использовать в течение недели. Некоторые фирмы выпускают готовые слои ионообменников, нанесенные иа гибкую фольгу (см. табл. 9.5). Перед употреблением их нужно выдержать 16 ч с соответствующим буферным раствором (см. разд. 9.8.3). Эти пластинки применяют в тех же целях, что и слои с целлюлозными ионообменниками, например для разделения аминокислот, нуклеотидов, пуринов, пиримидинов, неорганических ионов, антибиотиков и т. п. [c.108]

Пурины и пиримидины. Окончательное разделение и очистка оснований осуществляется одномерной хроматографией на бумаге (ватманская фильтровальная бумага № 1). Для этого существует несколько типов распределительных сред н-бутиловый спирт и гидроокись аммония пригодны в тех случаях, когда отсутствует гуанин в присутствии гуанина хорошие результаты получаются при использовании смеси изонронанола и соляной кислоты (Linskens, 1959). Места пятен определяют с помощью ультрафиолетового света. Количественный анализ заключается в элюировании пятен и спектрофотометрическом измерении. [c.28]

Последнее время иониты довольно часто применяют в высокоэффективной жидкостной хроматографии высокого давления для аналитического разделения производных пуринов, пи-римидинов и других соединений, входящих в состав физиологических жидкостей и поглощающих в УФ-области. Для быстрого (в пределах нескольких минут) анализа синтетических смесей этого типа применялись поверхностно-пористые иониты (см. монографию Киркленда [97], а также Дейла и сотр. [40а]). Однако низкая емкость этих ионитов мешает их практическому использованию в анализах физиологических жидкостей. Скотт и Ли [174] сконструировали анализатор, в котором они соединили короткую колонку, заполненную ионитом классического типа, с более длинной колонкой, заполненной поверхностно-пористым ионитом. Первая колонка отличается относительно высокой емкостью, хотя и не обеспечивает идеального разделения, а вторая колонка обеспечивает быстрое и тонкое фракционирование. На этой установке авторы <[174] успешно анализировали мочу (рис. 5.40). [c.330]

Нуклеиновые кислоты — составные части сложных белков клеточных ядер — нуклеопротеидов. Продуктами распада нуклеиновых кислот являются пурины, ниримидины и их производные (нуклеозиды, нуклеотиды). Бумажная распределительная хроматография может быть с успехом использована для разделения всех этих органических веществ. Методика разделения остается той же, что и для аминокислот и пептидов. Поэтому здесь можно остановиться лишь на рассмотрении способов идентификации. [c.169]

Дезоксирибонуклеаза стрептококка (стрептодорназа) также расщепляет межнуклеотидные связи, образуя фрагменты различной длины, несущие на конце 5 -фосфатную группу. При этом получаются главным образом олигодезоксинуклеотиды с длиной цепи более двух нуклеотидов, а также небольшое количество динуклеотидов и следы мононуклеотидов [357]. Анализ этих продуктов указывает на преимущественное расщепление связей ф5 -пиримидин-3 -ф5 -пурин, т. е. действие этого фермента комплементарно действию панкреатической дезоксирибонуклеазы I. Оба эти фермента действуют при одних и тех же условиях pH, требуют присутствия одинаковых ионов металлов и оба являются эндонуклеазами (расщепляют цепь не постепенно, а сразу по всей ее длине) [357]. Присутствующие в каждом случае в гидролизатах следы мононуклеотидов могут представлять собой концевые нуклеотиды цепи ДНК. Не вполне ясно, заключается ли действие всех таких ферментов на нативную двуспиральную дезоксирибонуклеиновую кислоту в расщеплении межнуклеотидных связей с последующим разделением олигонуклеотидных тяжей [358] или, наоборот, в разрыве водородных связей и разделении цепей ДНК, за которым следует гидролиз ковалентных связей. Существуют некоторые данные, показывающие, что на начальных этапах действия дезоксирибонуклеазы гидролизу предшествуют структурные изменения [359]. [c.422]

Друрйе авторы [2, 3] предлагают проводить прямое спектрофотометрическое определение нуклеиновых кислот по сумме пуринов без хроматографического разделения этих компонентов. Под-готовк а образца для спектрофотометрирования осуществляется также по методу Мак-Дональда. Расчет суммы нуклеиновых кислот ведется по одному максимуму полосы поглощения. Испытывая этот метод, нами было установлено, что с его помощью можно по--лучить лишь приближенный результат, так как аденин и гуанин [c.228]

Кирнос и др. [51а] описали методику линейного градиентного элюирования раствором хлорида натрия, концентрация которого в 0,01 М буферном растворе ацетата натрия (pH от 5,1 до 5,3) менялась от нуля до 0,35 М для фракционирования дезоксирибонуклеотидов на отдельные изоплизы (группы олигонуклеотидов с одинаковым числом нуклеотидных остатков) авторы применяли 5М раствор мочевины. Пурины двигались вблизи фронта растворителя, а по числу пиримидиновых фрагментов совершалось четкое разделение на моно-, ди-, три-, тетра-, пента-, гекса-и гептануклеотиды. Можно также использовать ступенчатое градиентное элюирование. С целью разделения пиримидиновых нуклеотидов по составу отдельные изоплизы элюировали с пластинок и наносили их в виде пятен на другой слой ОЕАЕ-целлю- [c.124]

Дозе и Ризи [92] использовали электрофорез высокого напряжения на слоях агара для разделения компонентов смеси нуклеиновых кислот с последующей спектроскопической идентификацией их. Вайнер и Зак [93] разделили методом электрофореза пурины и пиримидины рубонуклеиновой кислоты на тонких слоях геля агара, нанесенных на тефлоново-стеклянную бумагу (Fiberfilm Т-20, А-60, Pallflex). Для денситометрических измерений применяли также тонкие слои агара на кварцевых [c.135]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология