Кислоты нуклеиновые, определение

Установление химического типа белков (и только белков ) является для чисто химических методов принципиально неразрешимой задачей, так как белки не являются классическими объектами органической химии. Они обладают практически неограниченной химической потенцией, и их исключительность состоит не в особой склонности к тем или иным, вполне определенным и характерным только для них химическим реакциям, а, напротив, в их универсальности. Химическое поведение белков характеризуется необозримо широким спектром действия, несопоставимым по своему функциональному многообразию с действиями любого другого класса молекул живой и неживой природы или соединений, синтезированных человеком. Именно благодаря универсальным биохимическим свойствам белков назначение генетического аппарата любого живого организма сведено только к их синтезу. В органической химии аналитические методы основаны на эмпирическом тестировании реакций, на выявлении тех химических особенностей, которые присущи лишь данному типу молекул или атомных групп. Со времени Бутлерова считалось незыблемым, что такому условию удовлетворяют все синтезируемые соединения. Не явились исключением здесь и жиры, углеводы и нуклеиновые кислоты. Поэтому определение типов их молекулярного строения на чисто химической основе не встретило непреодолимых осложнений. Подчеркнем, что сказанное относится ко всем природным и синтетическим полимерам, в том числе и к ближайшим искусственным аналогам белков -полиаминокислотам. Таким образом, предпринятые после Фишера попытки решить с помощью органической химии структурную задачу белков не достигли и не могли достичь цели. История химии белка данного периода скорее свидетельствует об обратном - имевшее место увеличение количества химических данных о белках сопровождалось ростом неопределенности в понимании их химического строения. Изучение на такой основе белков не приближало, а, напротив, уводило в сторону от решения этой типичной по своей постановке для синтетической органической химии задачи. [c.65]

Очевидно, что исчезновение гипохромизма при переходе спираль — клубок, при денатурации, может дать количественную меру а-спиральности белка. Ввиду трудностей, с которыми сопряжены спектрофотометрические измерения в дальней ультрафиолетовой области вблизи 2000 А, этот метод в применении к белкам малоупотребителен. Напротив, он весьма прост и эффективен в случае нуклеиновых кислот при определениях степени спаривания цепей. Длинноволновые электронные полосы поглощения нуклеиновых кислот лежат вблизи 2600 А. Эти полосы, обусловливаемые лл -переходами, характеризуются дипольными моментами, лежащими в плоскостях азотистых оснований. В табл. 5.3 приведены характеристики полос поглощения в спектрах азотистых оснований 71]. [c.288]

Нуклеиновые кислоты структура, определение и синтез. Г. М. Блек-борн 177 [c.6]

НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ СТРУКТУРА, ОПРЕДЕЛЕНИЕ И СИНТЕЗ [c.177]

Предназначена для получения чистых растворителей, а также для очистки ряда химических соединений, используемых в методиках по исследованию состава нуклеиновых кислот, биосубстратов, определению гормонов, работ с белками и т. д. [c.53]

Нуклеиновые кислоты структура, определение и синтез [c.912]

Выдерживая растения при низкой температуре, можно выявить наличие в хромосомах полиморфизма, который при нормальной температуре не проявляется это было впервые показано Дарлингтоном и Ла Куром. Низкая температура, по-видимому, влияет на содержание нуклеиновых кислот в определенных участках хромосом, которые начинают хуже окрашиваться и кажутся более узкими, чем другие участки, окрашивающиеся нормально. Последствия такого нуклеиновокислотного голодания выявляются в определенных частях хромосом при этом границы между изменившимися и неизменив-шимися участками выражены очень четко, и по ним можно различать специфические типы хромосом. [c.183]

Кодон. Последовательность из трех соседних нуклеотидов в нуклеиновой кислоте, кодирующая определенную аминокислоту или какой-либо сигнал. [c.1012]

Нарушения синтеза, Сущ,ествуют, по-видимому, ещ,е некоторые заболевания, которые следует поставить в связь с нарушениями в обмене нуклеиновых кислот. Примером такого рода заболеваний может служить пернициозная анемия (злокачественное малокровие). Витамин Big, а также фолиевая кислота оказывают определенный лечебный эффект при пернициозной анемии. В настоящее время имеется ряд фактов, которые указывают на участие фолиевой кислоты (стр. 174) и витамина Ви (стр. 176) в биосинтезе нуклеиновых кислот. Было показано, что молочнокислые бак- [c.375]

Механизм репликации одноцепочечной вирусной РНК неизвестен. Так как цень нуклеиновой кислоты характеризуется определенным направлением, цепь, комплементарная к исходной, должна определять совсем другой белок, если только последовательность оснований РНК не является совсем уж особенной. [c.363]

Азаурацил — аналог пиримидиновых оснований, не свойственный природным нуклеиновым кислотам. В определенных условиях может занимать место урацила в нуклеиновых кислотах. Азаурацил заметно подавляет биосинтез нормальных пиримидиновых производных. [c.36]

Молекулярное плавление — так называемый переход спираль—клубок, которым характеризуются нуклеиновые кислоты при определенных условиях. Нагревание растворов указанных кислот сопровождается возрастанием поглощения в области 260 нм (гиперхромный эффект). Для нуклеиновых кислот различного происхождения температура, при которой наблюдается такое возрастание поглощения ультрафиолета, может быть различной. Эту температуру называют температурой плавления. Характер перехода спираль—клубок обусловливается несколькими факторами. Прежде всего он зависит от природы нуклеиновой кислоты (гомогенные нуклеиновые кислоты плавятся в узком интервале температур, а гетерогенные — в более широком), от содержания в молекулах нуклеиновых кислот Г—Ц-пар, обеспечивающих их дополнительную стабилизацию, от природы растворителя. [c.60]

Первым этапом в изучении структуры нуклеиновых кислот является определение их нуклеотидного состава. С этой целью проводят гидролиз нуклеиновых кислот до мононуклеотидов или свободных азотистых оснований последующее разделение продуктов гидролиза производится с помощью хроматографии на бумаге, на ионообменных смолах, посредством электрофореза. [c.384]

Жидкокристаллическое состояние нуклеиновых кислот. Для нуклеиновых кислот характерна определенная ориентационно-пространственная [c.284]

В результате независимо гидролизуются различные фосфодиэфирные связи нуклеиновой кислоты. При определенных условиях каждая фосфодиэфирная связь подвергается действию нуклеазы, но при этом гидролиз данной связи происходит только в ограниченном числе молекул ДНК. Если РНК-полимераза блокирует доступ нуклеазы к ДНК, то определенные связи вообще не будут разорваны. [c.141]

Обе методики позволяют определять общее количество углеводов в бактериальных клетках, содержащих 10% полимеров гексозы. При низком содержании гек-соз в клетках пентозы в нуклеиновых кислотах мешают определению. [c.294]

Продукты относительно богатые белком представляют интерес с точки зрения содержания в них нуклеиновых кислот. Их определение производят по методу, описанному А. С. Спириным [5, 17]. [c.285]

С другой стороны, образование комплексов некоторых тяжелых металлов (Ag+, Hg +) с нуклеиновыми кислотами в определенных условиях носит избирательный характер и может быть использовано для создания различий в плавучей плотности разных типов нуклеиновых кислот. Этот и другие приемы целенаправленной модификации плавучей плотности нуклеиновых кислот (например, путем присоединения некоторых антибиотиков или красителей) будут рассмотрены ниже. [c.249]

Важными параметрами мол. графов, используемыми для определения таутомерных форм данного в-ва и их реакционной способности, а также при классификации а.мино-кислот, нуклеиновых к-т, углеводов и др, сложных прир. соединений, являются средняя (Я) и полная (Н) информац. емкости. Параметр Я вычисляется по ф-ле энтропии нн- [c.611]

Т4-полинуклеотидкиназа широко используется для фосфори-лирования олиго- и полинуклеотидов при работе с рекомбинантными ДНК, при химико-ферментативном синтезе нуклеиновых кислот и определении их последовательности. [c.353]

В отличие от химии белков и нуклеиновых кислот, где определение первичной структуры сводится к установлению последовательности аминокислот или нуклеиновых оснований в линейной цепи биополимера, в случае углеводных биополимеров задача существенно усложняется. Для выяснения строения олигосахарида необходимо определить его моносахаридный состав, последовательность моносахаридных остатков и места разветвления олигосаха-ридной цепи, места присоединения моносахаридных остатков друг к другу, размеры циклов моносахаридных звеньев, конфигурацию гликозидных связей. [c.463]

Строение нуклеиновых кислот. Участие их в синтезе клеточных белков. Синтез белков лежит в основе построения новых клеточных структур. Организмы синтезируют свои собственные гбелки, отличающиеся от белков других видов характером чередования аминокислот. Первичная структура белков определяет многие их биохимические особенности. Изменение чередования аминокислот в молекулах ферментов в некоторых случаях приводит к потере свойств катализатора. Чем же определяется последовательность расположения аминокислот при синтезе белков Для ответа на этот вопрос была выдвинута теория матриц. Согласно этой теории, в клетках имеется нечто подобное типографским матрицам или штампам, каждый из которых штампует белок определенного вида или точнее белок со строго определенным порядком расположения аминокислот в его полипептидной цепи. Роль матриц выполняют нуклеиновые кислоты. Нуклеиновые кислоты имеются во всех без исключения клетках. Различают две группы нуклеиновых кислот—дезоксирибонуклеиновые кислоты (ДНК) и рибонуклеиновые кислоты (РНК). ДНК содержится главным образом в клеточном ядре, РНК — Э ядре и цитоплазме. [c.122]

Мы уже убедились (см. гл. 1), что, хотя в живых организмах содержится множество различных белков и нуклеиновых кислот, построение этих сложных структур основано на весьма простых принципах. В качестве строительных блоков, из которых состоят все белки и нуклеиновые кислоты, используются простые молекулы число этих молекул невелико, и они имеют одно и то же строение у всех видов организмов. Молекулы всех белков, представляющие собой длинные цепи, построены всего из 20 разных аминокислот, расположенных в той или иной линейной последовательности. Аналогичным образом длинные, напоминающие цепи молекулы нуклеиновых кислот у всех организмов построены из небольшого числа нуклеотидов, образующих различные последовательности. Белки и нуклеиновые кислоты являются информационными макромолекулами каждый беяок и каждая нуклеиновая кислота несут определенную информацию, закодированную в последовательности строительных блоков. [c.67]

Нуклеиновые кислоты имеют первостепенное значение в биосинтезе белка. На основании имеющихся данных строение дезоксирибонуклеиновой кислоты, повидимому, определяет специфичность синтеза рибонуклеиновой кислоты на поверхности последней при участии ряда энзимов и кофакторов в соответствии с ее структурой располагаются в определенной последовательности активированные аминокислоты, которые затем соединяются друг с другом кислотноамидными (пептидными) связями в полипептидную цепь. Такое формирование полипептидной цепи на частице рибонуклеиновой кислоты, имеющей определенную структуру, приводит к образованию специфической белковой молекулы, как бы отлитой на рибонуклеиновой модели. [c.328]

Нарушения синтеза. Существуют, по-видимому, еще некоторые за-болемния, которые следует поставить в связь с нарушениями в обмене нуклеиновых кислот. Примером такого рода заболеваний может служить пернициозная анемия (злокачественное малокровие). Витамин В а, а также фолиевая кислота оказывают определенный лечебный эффект при пернициозной анемии. В настоящее время имеется ряд факторов, которые указывают на участие фолиевой кислоты (стр. 181) и витамина Bj2 (стр. 183) в биосинтезе нуклеиновых кислот. Было показано, что молочнокислые бактерии находятся в оптимальных условиях развития также и в том случае, если в питательной среде витамин Bjg замещен тимидином (тиминдезокси-рибозидом) или ТИМИНОМ. На основании этого было высказано предположение о том, что витамин Bj2 играет коферментную роль в биосинтезе тимина или тимидина. Известно далее, что фолиевая кислота усиливает синтез тимина в тканях. При недостаточности названных двух витаминов нарушается также использование гликокола, серина и муравьиной кислоты для синтеза пуриновых оснований. [c.398]

Рассмотренные два типа взаимодействия оснований поперечные (путем образования водородных связей со стабилизацией за счет ван-дер-ваальсово-лондоновских сил) и межплоскостные взаимодействия— определяют стабильность и специфичность структуры нуклеиновых кислот. В определенных случаях имеют место оба типа взаимодействия (как, например, в ДНК или РНК), в других реализуются только межплоскостные взаимодействия (в односпиральных гомополинуклеотидах). Далее будут рассмотрены конкретные черты вторичной и третичной структур полинуклеотидов. [c.249]

Сделана поправка для глицина с гидролизованной нуклеиновой кислотой. Триптофан определен по методу Гордона и Митчелла. [c.69]

Проведенные нами исследования показали, что наиболее отчетливо радиационно-биохимические изменения в нуклеиновых кислотах сразу после рентгеновского облучения in vivo могут быть выявлены при помощи фракционированного осаждения нуклеиновых кислот при определенном способе их выделения. Основное внимание в нашей работе было уделено разработке методов отчетливого выявления изменений в ДНК и РНК непосредственно после облучения in vivo. [c.45]

Молекулярная гибридизация нуклеиновых кислот — метод определения степени гомологичности нуклеиновых кислот, основанный на их спосо б-ности к ренативации. [c.553]

Представим себе молекулу нуклеиновой кислоты, плавающей в жидкости, в которой одновременно находится больщое количество свободных аминокислот. Поскольку молекула нуклеиновой кислоты заряжена, да и просто благодаря броуновскому движению, в котором находятся аминокислоты в жидкости, они будут сталкиваться с огромной, превышающей их в тысячи раз поверхностью нуклеиновой кислоты. Но для каждой аминокислоты приготовлено только несколько мест на поверхности нуклеиновой кислоты, и поэтому аминокислота сможет сесть на нуклеиновую кислоту, только когда она попадает на свое место. На соседнее место сядет другая аминокислота, и так далее. В результате на поверхности нуклеиновой кислоты строго определенным образом в ряд выстроятся десятки и сотни аминокислот. Теперь им остается только соед1Шиться друг с другом в цепь, которая соскакивает с молекулы нуклеиновой кислоты и свертывается определенным образом. Молекула белка начинает свое существование, а освободившаяся поверхность нуклеиновой кислоты готова для нового синтеза. [c.87]

Наиболее характерным представителем третьей группы, по-видимому, является гидразид малеиновой кислоты, который определенных условиях способен замещать в молекуле нуклеиновых кислот урацил [51]. Из веществ, инактивирующих хлорофилл, можно назвать аминотр,иазол. [c.12]

Аминоациладенилаты далее присоединяются к особому типу рибонуклеиновых кислот, так называемым транспортным РНК. Это наиболее короткие нуклеиновые кислоты, содержащие около 80 оснований. Каждая транспортная РНК сяособна давать комплекс с аминоацнладенилатом, содержащим определенную а-минокислоту. Такие комплексы (т. е. транспортные РНК, нагруженные соответствующими аминокислотами) также поступают в рибосому (или систему из. нескольких рибосом — полисому, в которой отдельные рибосомы временно соединяются посредством информационной РНК). Таким образом в рибосому (нли, точнее, в полисому) поступают соответствующие детали (активированные аминокислоты) и план (информационная РНК), по которому надлежит их собирать. На 508-компонентах рибосом имеются особые участки, на которых временно удерживаются различные транспортные нуклеиновые кислоты, содержащие определенные аминокислоты, вплоть до того момента, когда ответствии с планом данную аминокислоту нужно встроить в создаваемую на рибосоме полипептидную цепь. Полипептидная цепь начинает строиться с аминокислоты, со- еря ащей свободную аминогруппу последующие аминокислоты присоединяются к карбоксильному концу полипептидной [c.132]

Определение креатинкиназной активности используется при диагностике некоторых заболеваний. Интересно, что уже в первые часы после инфаркта миокарда в крови резко нарастает содержание креатинкиназы Рибонуклеаза. Различают два основных вида нуклеаз эндонуклеазы и экзонуклеазы. Экзонуклеазы по своему действию относятся к классу гидролаз. Они катализируют реакцию последовательного гидролитического отщепления нуклеотидов от полинуклеотидной цени путем разрыва фосфодиэфирной связи. Эндонуклеазы катализируют расщепление фосфодиэфирных связей внутри молекулы нуклеиновой кислоты, проявляя определенную специфичность к одному из двух типов нуклеиновых кислот в соответствии с этим различают рибонуклеазы и дезоксирибонуклеазы, рассматриваемые в разделе Гидролазы . [c.296]

Рис. 4-71. Использование гибридизации нуклеиновых кислот для определения участка клонированного фрагмента ДНК, который транскрибируется в мРНК. Данный метод предполагает обработку нуклеазой, расщепляющей цепи ДНК, не спаренные с комплементарной цепью РНК Этот метод позволяет точно выявлять начало и конец молекулы РНК. Аналогичные процедуры эффективны и для определения расположения нитронов

Предметом обсуждения в этой главе будет то воздействие, которое генетические методы, по-видимому, оказали на сенсорную технологию. В семидесятых годах, т. е. в течение последних десяти лет, в генетике было сделано четыре революционных открытия рестрикция ДНК эндонуклеазами, обнаружение плазмид (первоначально в бактериях), гибридизация нуклеиновых кислот, методы определения нуклеотидной последовательности ДНК. Благодаря этим открытиям стало возможным трансфеци-ровать в различные организмы, обычно бактериальные клетки, гены разного происхождения и затем экспрессировать их. Современное состояние техники получения рекомбинантных ДНК кратко описано ниже. [c.89]

Покоящиеся почки растения характеризуются сннжепным метаболизмом. Однано в них идут определеиные процессы обмена, в частности не тгрекращается процесс дыхания. Имеются данные, что в этот период происходит накопление предшественников нуклеиновых кислот, идет определенная дифференциация клеточных структур. Именно это подготавливает почву для последующей активации ростовых процессов. [c.271]

В завершение обсуждения методических приемов, используемых для разделения нуклеиновых кислот и рестриктаз, хотелось бы обратить внимание на некоторые вопросы. Взаимодействие рестриктаз и нуклеаз — основных интересующих исследователя компонентов грубого экстракта, с нуклеиновыми-кислотами, вносит ощутимый вклад в результаты экспериментов. Использование высокой ионной силы позволяет исключить-этот фактор в случае гельфильтрации и высаждения нуклеиновых кислот при помощи ПЭИ. Однако в этих условиях в общем случае должен наблюдаться переход во фракцию, содержащую рестриктазы, неспецифических нуклеаз. Поэтому, если цель эксперимента сводится не просто к разделению нуклеиновых кислот и рестриктаз, а к определенной функциональной очистке целевого фермента, более привлекательным является использование таких приемов, которые позволяют варьировать ионную силу. Перспективным в этом отношении является применение катионитов. При взаимодействии грубых экстрактов с катионитами нуклеиновые кислоты в общем случае должны оказаться в несорбированной фракции. Проведение процесса в условиях низкой или умеренной ионной силы призвано обеспечить удаление вместе с нуклеиновыми кислотами и определенной части иеспецифических нуклеаз. Хотя это специально и не оговорено, данные об эффективной функциональной очистке более десяти рестриктаз по схеме, разработанной Грин с соавт. [109], прошедших, вслед за стадией фракционирования грубых экстрактов на ФРП, хроматографию на ГАП, косвенно подтверждает это предположение. [c.153]