Гликопротенды

Предохранение от потери белков в почках Муцины используются в качестве защитных оболочек, смазкн и среды для транспорта Препятствуют росту, но не образованию кристаллов льда в жидких средах организма. Гликопротенды понижают точку замерзания водных растворов в той же степени, что и эквивалентное количество КаС1 Поскольку существует высокоэнергетический барьер для прохождения углеводного фрагмента через гидрофобную часть мембраны, гликоироте-иды помогают установлению и поддержанию асимметричного распределения мембранных белков [c.269]

Природный Г.— гликопротенд, белковая часть к-рою отщепляется при обычных способах выделения. Г. — сильный электролит, мол. масса 10 ООО—20 ООО, растворим в воде, 11ерастворим в органич. растворителя с. В кристаллич. состоянии м. б. выде,пец в виде различных солей. [c.296]

Остатки сиаловой кислоты гликопротендов можно пометить, восстанавливая окисленные углеводы Н боргидридом натрия (NaB H4) (Gahmberg, Andersson, 1977). Вначале 1—2 10 лимфоцитов в 1 мл ЗФР инкубируют 10 мин при о С с перйодатом натрия (1 мМ) для образования альдегидных групп на остатках сиаловой кислоты. Реакцию останавливают добавлением глицерина до конечной концентрации 25 мМ, а затем клетки дважды отмывают ЗФР. Осажденные клетки суспендируют в 0,5 мл сбалансированного солевого раствора Дульбекко и до- [c.53]

Выбор того или иного метода выделения антигенов клеточной поверхности определяется несколькими соображениями. Одно из них — это доступность клеток или тканей в качестве источника антигена. Культуры клеточных линий представляют собой постоянный и очень однородный источник антигенов. Мо лекулы, с которыми специфически реагируют поликлональные и моноклональные антитела, как правило, относятся к интегральным мембранным гликопротендам, поэтому первым этапом очистки этих молекул должно быть выделение мембран. Уже этот этап дает примерно 50-кратиую очистку поверхностных антигенов, так как мембраны содержат около 1% всех белков клеткн. [c.54]

Поверхность клетки играет решающую роль в осуществлении определенных клеточных функций, включая иммунный ответ. Но, несмотря на это, наши знания о структурной организации биологических мембран и о механизме биохимических реакций, которые в них протекают, к сожалению, очень скудны. Для накопления информации в этой области мы должны прежде всего разделить мембраны на определенные субъединицы. При фракционировании мембранных белков и гликопротендов обычными биохимическими методами возникали трудности из-за того, что приходится одновременно очищать много разных белков, имеющих сходные молекулярные размеры или заряд. Применение моноспецифических сывороток для очистки антигенов клеточной поверхности помогает обойти эти препятствия, однако сложность получения таких сывороток ограничивает возможности их использования. [c.68]

Так как изучаемые антигены клеточной поверхности представляют собой интегральные гликопротенды плазматической мембраны, нх прежде всего нужно извлечь из мембранного матрикса в растворимой форме. Для этого лучше использовать агенты, не нарушающие антигенную структуру белка. С этой точки зрения для солюбилизации большинства антигенов пригодны вещества с относительно мягким действием — анионный сурфактант дезоксихолат и неионные детергенты. [c.68]

Поскольку большинство встроенных мембранных белков (еслн не все онн)—гликопротенды, вторым этапом очистки может быть аффинная хроматография на иммобилизованных лектинах. [c.68]

В настоящей главе дается общий обзор ряда методов тонкого аналитического разделения белков и гликопротендов. Все это методы двумерного разделения, которое включает два последовательных этапа, основанных на использовании разных биохимических и биофизических свойств. По крайней мере одни из этих этапов — электрофорез в полиакриламидном геле. [c.72]

Заполняют лунки буферным раствором с яичным белком и выдерживают 30 мин для насыщения участков пластиковой поверхности, связывающих белок, и участков лектина, связывающих гликопротенды. Следует отметить, что бычий сывороточный альбумин не пригоден для этого, так как лектии его не связывает. [c.334]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология