Антитела моноклональные

Хранение моноклональных антител. Моноклональные антитела могут быть сохранены в виде лиофильно высушенной Культуральной жидкости, однако при этом часто происходит потеря иммунологической активности. Культуральная надосадочная жидкость хорошо хранится в течение 1 г при 4°С в присутствии 0,1% азида натрия. Она может быть сохранена неопределенно долго при замораживании ( =70°С) при этом необходимо избегать повторного замораживания и оттаивания. [c.169]

Гибридомы, продуцирующие антитела, могут выращиваться в больших масштабах в культиваторах или специальных аппаратах. Поскольку образующиеся гибридомой антитела произошли от одной родоначальной клетки (В-лимфоцита), то они называются моноклональными антителами. Моноклональные антитела широко используются для создания диагностических препаратов, а также в некоторых случаях применяются с лечебной целью (в онкологии). [c.105]

Клоны с иммобилизованными антителами к -галактозидазе можно приготовить, как это описано в разд. 5.4, или использовать коммерческие препараты. Возможность повторного использования колонки зависит от свойств антител (моноклональных или поликлональных) и жесткости элюирующих растворов. Колонки с поликлональными антителами (полученные, как здесь описано) могут быть использованы более 20 раз без значительного уменьшения их связывающей способности. Колонка, содержащая 5 мг аффинноочищенных поликлональных антител к -галактозидазе, обычно связывает по меньшей мере 1 мг гибридного белка. [c.157]

Определение констант скоростей комплексообразования с использованием меченых реагентов. Этот метод, нашел большое применение в связи с развитием высокочувствительных методов иммуноанализа, основанных на использовании меченых реагентов радиоим-мунологического, иммуноферментного и других -методов. Кинетические закономерности простейшей схемы (3.38) взаимодействия антиген — антитело (моноклональные антитела — одновалентный антиген) описывает система дифференциальных уравнений [c.52]

Наиболее простой способ снятия неспецифического фонового излучения состоит в использовании твердофазных вариантов метода. В качестве твердой фазы берут пблистирольные пробирки, микропланшеты, полиакриламидные шарики. Иммобилизация антител (моноклональных или поликлональных) на полистироле осуществляется методом нековалентной физической адсорбции, а в случае полиакриламидных частиц — ковалентным связыванием. Различие в способах иммобилизации обусловливает некоторые различия в свойствах иммобилизованных антител. Из. всех перечисленных носителей полиакриламидные шарики, как правило, обеспечивают. повышенную стабильность и иммунореактивность иммобилизованных антител, более быструю кинетику специфического взаимодействия, что улучшает точность анализа и его воспроизводимость. [c.142]

В некоторых случаях удается изменить выраженность гуморального ответа на полидетерминантный антиген путем связывания с ним антител (моноклональных антител, специ- [c.54]

В 50-е гг. Вернет, Ерне, Ледерберг и Тол1мейдж постулировали, что каждый В-лимфоцит запрограммирован на синтез антител одной определенной специфичности, относящихся к тому же идиотипу, что и молекулы, экспрессированные на поверхности данного лимфоцита в качестве антигенных рецепторов. В настоящее время это положение убедительно доказано. Если животное иммунизируют каким-либо антигеном, то начинается клональная экспансия и дифференцировка тех В-лимфоцитов, которые распознают этот антиген. В результате образуются плазматические клетки, которые продуцируют антитела. Если бы индивидуальные антиген-реактивные клетки лимфоидной ткани иммунизированного животного удалось длительное время поддерживать в культуре, то надосадочная жидкость содержала бы однородные молекулы антител (моноклональные антитела), которые были бы способны распознавать только один или несколько близкородственных антигенов. К сожалению, потомство индивидуального реактивного лимфоцита не удается длительное время выращивать в культуре для получения больших количеств моноклональных антител (МКА). Впервые эта проблема была решена Келером и Мильштейном в 1975 г. [1]- Исследователям удалось трансформировать антителообразующие лимфоциты путем слияния их с клетками иммортализованной клеточной линии с последующим клонированием индивидуальных гибридных клеток. Таким образом были получены линии гибридных клеток (гибридомы), каждая из которых продуцировала молекулы антител одного и того же идиотипа. [c.116]

До настоящего момента мы рассматривали главным образом преимущества замены поликлональных антител моноклональными для целей иммунометрического анализа. Повышение чувствительности, специфичности и воспроизводимости результатов (для различных партий антител) является безусловным вкладом в арсенал существующих методов. Однако этим дело не исчерпывается. Становится все более очевидным, что моноклональные антитела обладают рядом уникальных свойств, которые невозможно было выявить при работе с поликлональными антисыворотками. Для моноклональных антител удалось изучить, как это делается обычно для любых других белков, зависимость их функциональной активности от таких параметров окружающей среды, как pH, ионная сила, температура, присутствие детергентов. Несомненно, компонентам поликлональной антисьшо-ротки присущи подобные свойства, которые, однако, из-за гетерогенности популяции молекул в таких,препаратах не поддаются четкому выявлению. Наблюдать влияние указанных факторов можно только при работе с химически однородной популяцией антител. В качестве примера можно рассмотреть влияние pH на связывание моноклональных антител с гормоном роста человека (ГРЧ) (рис. 24-5). При pH 7 наблюдается образование прочного комплекса антител с ГРЧ, который при pH 4 и ниже разрушается с высвобождением молекул гормона (Bartholomew et al., 1983). Другие моноклональные антитела к этому же гормону не обнаруживают подобных свойств, прочность их связывания с ГРЧ при изменении pH в указанном дйа- [c.395]

В каждой из отобранных таким образом лунок еще содержалось около 200 ООО клеток. В силу полиспецифичности иммунного ответа (см. выше) они еще не были моноклональны, поэтому далее клетки из этих лунок рассеивали ло одной, выращивали колонии и снова их сканировали, т. е. производили обычные операции клонирования, позволяющие в конце концов отобрать наилучший по заданным параметрам клон гибридом, образующих совершенно одинаковые <смоноклональные> антитела. Моноклональные гибридомы в суспензии вырабатывают 5—10 мкг антител на 1 мл среды. Однако полученные от чистых линий BALB гибридомы сохраняют присущую миеломным клеткам способность к опухолевому росту. Ими инокулируют мышей и после нескольких пассажей получают в асцитной жидкости моноклональные антитела в огромном количестве — до 50 мг чистых антител на мышь (титр 10 10 ). [c.115]

Большинство проблем, возникающих при использовании по-ликлональных антител, может быть решено с помощью новой технологии получения моноклональных антител [106]. Применяемые при этом оборудование и методы достаточно просты, но к ним предъявляются более высокие требования, чем при производстве обычных антител. Моноклональные антитела по-сравнению с поликлональными имеют следующие преимущества при получении иммуноадсорбентов [c.177]

Биофизика (1988) -- [ c.126 ]

Биотехнология (1988) -- [ c.315 , c.329 , c.330 , c.331 , c.332 ]

Биотехнология - принципы и применение (1988) -- [ c.2 , c.3 , c.4 , c.5 , c.6 , c.7 , c.313 , c.315 , c.329 , c.333 ]

Молекулярная биология клетки Т.3 Изд.2 (1994) -- [ c.225 ]

Новое в клонировании ДНК Методы (1989) -- [ c.196 , c.207 ]

Клеточная инженерия (1987) -- [ c.6 , c.7 , c.8 , c.90 , c.91 , c.96 , c.97 , c.122 ]

Теория и практика иммуноферментного анализа (1991) -- [ c.12 , c.37 , c.38 , c.41 , c.44 , c.47 , c.52 , c.163 , c.167 , c.169 , c.170 , c.174 , c.259 ]

Иммунологические методы исследований (1988) -- [ c.0 ]

Методы исследований в иммунологии (1981) -- [ c.135 , c.141 , c.235 , c.402 ]

Иммуноферментный анализ (1988) -- [ c.49 , c.67 , c.385 , c.389 , c.392 , c.399 ]

Искусственные генетические системы Т.1 (2004) -- [ c.0 ]

Биохимия мембран Клеточные мембраны и иммунитет (0) -- [ c.131 ]

Методы очистки белков (1995) -- [ c.177 , c.178 ]

Что если Ламарк не прав Иммуногенетика и эволюция (2002) -- [ c.137 ]

Молекулярная биология клетки Т.3 Изд.2 (1994) -- [ c.225 ]

Микробиология (2003) -- [ c.156 , c.191 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология