Ультрацентрифугирование оборудование

К аналитическим методам фракционирования относятся ультрацентрифугирование, турбидиметрическое титрование, гель-про никающая хроматография и др. Количественную картину распределения дает метод ультрацентрифугирования, однако он относительно сложен и требует дорогостоящего оборудования. Турбидиметрическое титрование — простой и быстрый метод, но он дает лишь качественную картину ММР. [c.95]

Оборудование для свободного электрофореза и ультрацентрифугирования достаточно дорого и сложно по своему устройству, что ограничивает широкое применение этих методов. Поэтому возникла идея замены свободного электрофореза (электрофоретического разделения белков в растворе) электрофорезом в специальной поддерживающей среде, который основан на том же принципе, но намного проще в осуществлении. [c.10]

Основной недостаток ультрацентрифугирования заключается в необходимости наличия очень дорогого оборудования, в связи с чем этот метод не нашел широкого применения, особенно для определения вирусов в воде в натурных условиях. [c.281]

Здесь будут рассмотрены только те варианты электрофореза, которые пригодны для разделения существенных количеств белковых смесей с выделением отдельных фракций. Применение для этой цели свободного электрофореза в растворе без каких-либо опорных сред затруднено теми же обстоятельствами, что и препаративное ультрацентрифугирование. При попытке выделить ту зону раствора, где расположена та или иная фракция, легко возникают токи жидкости, размывающие границы и перемешивающие содержимое различных зон. Предлагалось немало методических приемов для преодоления этого препятствия. Так, например, на определенной стадии процесса часть кюветы отсекали вдвигающейся стеклянной пластинкой. Применялись также пористые перегородки, не препятствующие движению белковых частиц, но предотвращающие смешивание при отборе части содержимого кюветы. Эти и другие аналогичные приемы не получили широкого распространения. Причина этого прежде всего в том, что они позволяют получать в чистом виде только фракции, занимающие в кювете крайние положения. Кроме того, производительность этих методов относительно невелика, а необходимое оборудование довольно дорого и сложно в эксплуатации. [c.30]

Совершенно очевидно, что использование метода ультрацентрифугирования ограничено из-за сложности оборудования. [c.132]

Разработка этого оборудования, описанного в гл. П1, является, по-видимому, наиболее важным достижением в области ультрацентрифугирования за последние десять лет. Это оборудование дает следующие возможности [c.222]

В книге продолжены детальное описание и анализ современных методов исследования, используемых в молекулярной биологии (см. Л. А. Остерман. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование , 1981 г,). Для каждого метода дано подробное описание его существа и первоначальных приемов постановки эксперимента, необходимого оборудования и реактивов, затем следует тщательный анализ влияния выбора параметров эксперимента на его результаты. Описание метода заключает обзор всех его новейших вариантов и модификаций по материалам, опубликованным в периодической научной литературе на середину 1982 г. [c.2]

В идеале при одной и той же температуре значение 5 будет постоянным для частицы в данном растворителе. Однако в случае макромолекул это не так, вследствие их больших размеров, поэтому здесь теория должна быть дополнена. Эти дополнения следовало бы привести здесь же, однако они будут более понятными при рассмотрении реальных седиментационных данных, поэтому сначала рассмотрим оборудование для ультрацентрифугирования и виды получаемой информации. [c.277]

Основы теории скорости седиментации 276 Оборудование для ультрацентрифугирования 277 Распределение концентрации в эксперименте по скоростной седиментации в секторной ячейке 283 Измерение распределения концентрации в аналитической ячейке 286 [c.577]

Этот метод составил сильную конкуренцию другим общеизвестным методам, что объясняется прекрасной разрешающей способностью геля в широком диапазоне молекулярных весов, а также тем, что величина молекулярного веса может быть установлена простым способом в течение одного дня и с малым количеством белка, требуемым для анализа. Метод ультрацентрифугирования, например, теоретически разработанный очень полно, требует использования специального дорогостоящего оборудования. Недостатком этого метода является большая или меньшая точность определения удельного парциального объема. Неопределенность в 0,02 мл/г в этом параметре (т. е. 2—3%) вводит погрешность до 10% в величину рассчитываемого молекулярного веса, даже если все центрифужные измерения, необходимые для расчета, были проделаны точно. В диапазоне молекулярных весов от 15000 до 100 000 точность определения молекулярного веса при электрофорезе в полиакриламидном геле с натрийдодецилсульфатом лучше 10%. Этот диапазон легко перекрывается большим числом белков-стандартов, имеющихся в продаже. Трудность с более высокими молекулярными весами происходит, видимо, оттого, что в диапазоне от 90000 до 200000 имеется слишком мало стандартных белков. Молекулярные веса полипептидных цепей обычно не превышают 100 ООО. [c.421]

Разделить смесь соединений в соответствии с молекулярными размерами последних можно методами дробного диализа [8], ультрафильтрации и ультрацентрифугирования. Некоторые из этих методов требуют много времени и малопроизводительны, для других необходимо специальное дорогостоящее оборудование. Относительно просто осуществить такое разделение при помощи молекулярых сит [24]. Молекулярными ситами называют определенные типы природных и синтетических цеолитов (алюмосиликатов), кристаллическая структура которых не меняется в процессе их дегидратации. В результате дегидратации в структуре кристаллов образуются микроканалы и микропоры определенных размеров. Через эти поры могут проходить только низкомолекулярные соединения, а для высокомолекулярных соединений они недоступны, таким образом и происходит разделение в соответствии с молекулярными размерами. Среди водорастворимых веществ свойства молекулярных сит наблюдаются у гранулированного крахмала [29, 32]. [c.339]

Из относительно небольшого объема культуральной жидкости вирус можно сконцентрировать ультрацентрифугированием. Обычно тогавирусы осаждают центрифугированием при 50 000 g в течение 2 ч. Можно использовать как угловые роторы, так и бакет-роторы в зависимости от объема материала и имеющегося оборудования. Пробирки для угловых роторов следует тщательно закрывать, лучше всего термическим способом, предложенным фирмой Be kman. [c.98]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология