Сыворотка использование в ростовой среде

Культуры тканей готовы для использования тогда, когда вокруг посаженных кусочков образуется хорошая зона роста клеток (рис. 5). Перед заражением тканей питательную среду в культурах меняют на новую, обычно обедненную питательными веществами и не содержащую сыворотки. [c.56]

Увеличение концентрации сыворотки в среде до 20% повышало интенсивность деления клеток в фазе логарифмического роста. При использовании более изких концентраций сыворотки (2— [c.94]

Данная концентрация питательных веществ может поддерживать существование только определенного количества клеток. При истощении того или иного питательного вещества клетки часто могут использовать другие вещества, но на практике такой путь используется редко, поскольку он всегда сопровождается снижением скорости роста (например, при индукции альтернативных ферментов). Если минимальные среды, такие как МЕМ или основная базальная среда Игла, используются с сывороткой в качестве единственной добавки, то проблема истощения возникает скорее, чем при использовании полных сред (например, среды 199) или сред с добавками гидролизата лактальбумина, пептона или БСА (сред, включающих многие жирные кислоты). К питательным веществам, истощающимся в первую очередь, относится глутамин, частично вследствие его спонтанной циклизации до пирролидоновой карбоновой кислоты, а также в результате ферментативного превращения (ферментами сыворотки и клетск) в глутаминовую кислоту, лейцин и изолейцин. Диплоидные клетки человека почти уникальны по интенсивной утилизации цистина. Многочисленные публикации об аргинине как лимитирующем факторе, по-видимому,, ошибочны вследствие частого загрязнения клеток микоплазмой. Напомним, что то или иное питательное вещество перед истощением начинает тормозить рост клеток. По мере снижения концентрации аминокислот клеткам становится все труднее-поддерживать достаточный внутриклеточный пул. Проблема [c.63]

Поддерживающие среды. Их применяют для сохранения выросших монослоев клеток после заражения их вирусами. Эти среды содержат меньшее количество сыворотки или добавляются к культуре без нее. Перед использованием среды в нее вносят антибиотики для предотвращения роста случайно попавших микроорганизмов. Культуральные среды стерилизуют, а при наличии нестабильных компонентов — фильтруют. Оптимальные значения pH питательных сред (7,2 —7,6) поддерживают с помощью буферных систем (чаще всего используют бикарбонатный буфер). В среды добавляют индикатор феноловый красный, который становится оранжево-желтым при закислении и малиновым при защелачива-нии среды. [c.262]

Роль сыворотки в дифференцировке до конца еще не выяснена, и действие ее зависит от типа клеток и состава используемой среды. Низкие концентрации сыворотки способствуют дифференцировке олигодендроцитов [19], но для дифференцировки бронхиального эпителия в ороговевающий используются высокие концентрации сыворотки [20]. В последнем случае активным началом оказываются молекулы сыворотки, близко родственные или идентичные фактору опухолевого роста р, выделяемому из тромбоцитов. Решению проблем, связанных с влиянием сыворотки на дифференцировку, несомненно будет способствовать использование химически определенных сред. [c.12]

Дереворазрушающие базидиомицеты способны развиваться на средах относительно простого состава. Ранее было показано, что единственным витамином, необходимым для роста этих грибов на синтетических средах, является тиамин. Вместе с тем внесение в культуральные среды дополнительных факторов роста (аминокислот и витаминов) значительно интенсифицирует процессы образования биомассы и белка. Использование субстратов растительного и животного происхождения во многом способствует рещению проблемы обеспечения мицелия факторами роста. Такие субстраты, как меласса, отходы переработки картофеля, отвары и экстракты растений, молочная сыворотка и другие, сами по себе являются источниками таких факторов. Однако во многих случаях требуется внесение дополнительных стимуляторов. Наиболее часто с этой целью применяется кукурузный экстракт, который в более высоких концентрациях может служить источником органического азота, так же как дрожжевой экстракт, пептон и гидролизат казеина. Стимулирующее влияние на рост мицелия дереворазрушающих базидиомицетов оказывают липиды. При выращивании Pleurotus sapidus на средах с тростниковой мелассой, вытяжкой из соевых бобов или соком [c.93]

Среды Хэма. С использованием жесткого критерия отбора — размножение одиночных клеток (клональный рост) — разработан метод оптимизации состава питательных сред, позволяющий минимизировать количество компонентов неопределенного состава [12]. Так были созданы щироко используемые F-10 [19] и ее модификация F-12 [20], а также набор сред M DB, где каждый состав подогнан к определенному типу клеток [21]. Клетки яичников китайского хомячка клонируются в Р-Ю, которую достаточно дополнить либо минимальным количеством сыворотки (2 %), либо фетуи-ном и альбумином (белка менее 100 мкг/мл), и в Р-12, в которую введен селенит. Эти среды применяются также в случае культивирования плохо растущих клеток, в том числе первичных культур дифференцированных клеток разных видов. F-12 в смеси с DME является основой ряда бессывороточных сред. [c.56]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология