Хомячок китайский

Таблица 5.17. Частота спонтанных мутаций устойчивости к 8-азагуанину в клетках человека и китайского хомячка [1683]

Для создания любой субъединичной вакцины прежде всего нужно идентифицировать те компоненты патогенного микроорганизма, которые индуцируют выработку антител. В случае HSV типа 1 (HSV-1) таким компонентом является гликопротеин D оболочки (gD). В ответ на введение этого гликопротеина мышам у них вырабатываются антитела, нейтрализующие интактный HSV. Ген gD HSV-I был изолирован, клонирован в одном из экспрессирующих векторов в клетках млекопитающих и введен в яйцеклетки китайского хомячка (СНО), в которых в отличие от Е. соН происходит гликолизирова-ние чужеродных белков. Полноразмерный ген gD кодирует белок, в норме связывающийся с мембраной клетки млекопитающего (рис. 11.2, А). Такой белок труднее очистить, чем раствори- [c.230]

Радиоавтографические опыты, в принципе аналогичные изображенному на фиг. 243, были впоследствии проведены с быстро делящимися клетками китайского хомячка в этих опытах было исследовано включение метки не только в ДНК, но и в хромосомные белки в ходе последова- гельных клеточных делений. Оказалось, что включение метки в ДНК происходит согласно полуконсервативной схеме, ранее доказанной Тэйлором для корней фасоли вместе с тем включение метки в хромосомные белки происходило совершенно иначе. В первой метафазе после обработки Н-ами-нокислотами белок обеих сестринских хромосом содержал одинаковые количества метки однако спустя три и более циклов деления в отсутствие меченых аминокислот метка практически полностью исчезала из белка метафазных хромосом. Следовательно, можно заключить, что белки, и в частности гистоны, являются лишь временными компонентами хромосомы, материальная и информационная непрерывность которой обеспечивается исключительно молекулой ДНК- [c.501]

Китайский хомячок Мышь [c.59]

По данным Синклера (1968), защитный агент цистеамин вызывает исчезновение возрастной зависимости радиочувствительности клеток. китайского хомячка 1— на всех стадиях цикла клетки одинаково реагируют на облучение. Это означает, что радиационное повреждение состоит из двух компонент — зависящей от возраста, защищаемой цистеамином, и не зависящей от возраста, не защищаемой цистеамином. Природа этих компонент неизвестна. [c.126]

Рис. 2.89. Контурный график (интенсивность флуоресценции) двумерной лазерной сортировки хромосом из гибридных клеток китайский хомячок X человек , в которых осталась только человеческая У-хромосома. Буквы А-К относятся к разным хромосомам хомячка буква Ь указывает на У-хромосому человека. А. Все хромосомы Б. Только маленькие хромосомы. (По [330].)

Фибробласты китайского хомячка 12-15 3-6 4-8 2-3 [c.127]

Высеять клетки в бутыли за 24 ч до первичного отбора. При работе с линией фибробластов китайского хомячка Don- можно высевать 5-10 клеток во вращающиеся бутыли в среде Мак-Коя (см. разд. 11.2.2). [c.147]

АЭТ-Вг-НВг в дозе 150 мг/кг (внутрибрюшинно) существенно снижает частоту хромосомных аберраций в костном мозге китайских хомячков при их гамма-облучении в дозе 3 Гр. Доза излучения 10,5 Гр, соответствующая Л Дбо/зо. обусловливает повышение частоты хромосомных изменений, на которые введение АЭТ не влияет [Barta, Fremuth, 1976]. [c.156]

Пример 16. Фракционирование гистонов Н1 и Н1° из культуры клеток яичников китайского хомячка [D Anna et al., 1981]. Эти гистоны экстрагировали из ядер 0,83 М H IO4. 9,.3 мг белка экстракта растворяли в 0,6 мл 8%-ного раствора гуанидинхлорида (ГХ) в 0,1 М фосфатном буфере (pH 6,8) с 0,5 мМ ФМСФ и вносили на колонку Bio-Rex 70 (1,5 X 22 см), уравновешенную тем же раствором. Элюцию вели линейным градиентом (8—14%) концентрации ГХ. Результат фракционирования представлен на рис. 121. [c.310]

Отдаленные последствия. В концентрации 2,5—15 мг/л индуцирует сестринские хроматидные обмены в клетках китайского хомячка in vitro (Obe, Веек). [c.61]

Сравнительно недавно, в 1975 г., была описана пострепликативная репарация в клетках китайского хомячка, облученных ионизирующей радиацией. Как и в случае УФ-поврежденных клеток, новообразованная ДНК синтезируется в виде коротких фрагментов, а затем происходит заделывание брешей в пострепликатив- [c.149]

Еще меньшие величины получены при использовании нейтронов с той же энергией для облучения клеток китайского хомячка — около 1.5 (Hall, 1969). [c.33]

Важно отметить, что колебания ОБЭ по стадиям клеточного цикла возможны только в том случае, если чувствительность клеток к нейтронам и редкоионизирующей радиации в течение цикла меняется неодинаково. Имеются прямые наблюдения в пользу такой закономерности. Так, в опытах на синхронизированных клетках китайского хомячка показано, что выживаемость клеток, облученных нейтронами деления, меньше зависит от стадии цикла, чем при действии рентгеновых лучей, причем кривые выживаемости для того и другого вида радиации имеют неодинаковую форму. В связи с этим ясно, что ОБЭ нейтронов зависит и от дозы, и от стадии клеточного цикла (Sin lair, 1968). [c.34]

Вместе с тем в опытах на проростках бобов, у которых популяция меристемных клеток была синхронизирована гидроксимоче-виной, и на синхронизированных клетках китайского хомячка [c.34]

Рис. 24. Зависимость выживаемости меристемных клеток проростков бобов А) и клеток китайского хомячка (Б) от стадии клеточного цикла при облучении. (По Hall,

Примерно такой же коэффициент кислородного усиления определен для нейтронов с энергией 14 Мэв при облучении клеток китайского хомячка (1.5) и проростков бобов (1.б6). Исследовалась выживаемость клеток по клонообразованию и рост корешков бобов в течение 10 дггей. Тот же коэффициент для рентгеновых [c.148]

Несколько большее модифицирующее влияние оказывает кислород на эффект гамма-нейтронного излучения При подсчете одноударных хромосомных перестроек в клетках яичника самок китайского хомячка, облученных in vitro, обнаружено, что частота таких перестроек в условиях оксигенации 0.0125/кл. рад, а в условиях гипоксии 0.0077/кл. рад. Таким образом, коэффициент кислородного усиления для этого излучения равен 1.75, а для редкоионизирующей радиации — 2.5 (Bnshong et al., 1970). Возлюжно, что высокое значение кислородного коэффициента объясняется большим вкладом гамма-радиации (41%) в смешанное излучение [c.148]

Все последовательности, расщепляемые рестриктазой Alu, по-видимому, являются членами одного семейства, названного (в соответствии со способом его обнаружения) Alu-семейством. На гаплоидный геном приходится примерно 300000 членов, входящих в его состав (это эквивалентно тому, что на каждые 6 т. п. н. ДНК приходится один его член). Отдельные Alu-последовательности щироко распространены в геноме по меньщей мере одна копия Alu-последовательности обнаруживается практически в каждом клоне библиотеки фрагментов геномной ДНК со средней длиной 18 т. п. н. Семейство аналогичных последовательностей обнаружено у мыщи (оно называется семейством В1 и в его состав входит 50000 членов), у китайского хомячка (где оно называется Alu-подобным семейством) и у других млекопитающих. [c.299]

Было установлено также, что по крайней мере некоторые члены семейства могут транскрибироваться in vitro с образованием небольших РНК с помощью РНК-полимеразы III (ответственной за синтез малых ядерных РНК, тРНК и 5S-PHK). Некоторые (хотя и не все) члены Alu-подобного семейства китайского хомячка, по-видимому, транскрибируются in vivo. Такого рода транскрипционные единицы обнаруживаются поблизости от других транскрипционных единиц. Например, две такие транскрипционные единицы расположены в области кластера Р-глобиновых генов человека. [c.299]

С культивируемыми клеточными линиями млекопитающих можно проводить генетические эксперименты, используя подходы, аналогичные тем, которые применяются при генетическом исследовании микроорганизмов. Например, можно отобрать температурочувствительные мутанты, растущие при 34° С, но не при 40°С. При обработке мутагенами культуры клеток яичника китайского хомячка удалось получить целый ряд мутантных линий с фенотипом чувствительности к температуре. Клетки некоторых из этих линий не растут при 40°С из-за нарушения способности к синтезу белков. Этот же дефект проявляется и в опытах in vitro при 40°С. Однако мутантные клетки приобретают способность к росту при 40°С на среде с 10-100-кратным превышением концентрации одной из 20 содержащихся в обычной среде аминокислот. Для каждого типа мутантов спасительным оказывается избыток только одной определенной аминокислоты. На основании ваших знаний о механизме биосинтеза и об особенностях функционирования белков ответьте на вопрос [c.64]

Клетки прокариот, например Е. соН, гаплоидны, для соматических клеток эукариот характерна диплоидность. Это ограничивает возможности генетического анализа, так как рецессивные аллели не выявляются в гетерозиготе. Растительные клеточные линии, состоящие из гаплоидных клеток, можно получить при культивировании клеток гаметофитов. Это позволяет отбирать ауксотрофные мутанты и производить другие манипуляции подобно тому, как это делается для гаплоидных микроорганизмов. Клеточные линии животных могут стать функционально гаплоидными при утере целых хромосом или их частей. К этому же приводит инактивация генов с помощью транслокаций или других хромосомных перестроек. Например, в линии клеток яичника китайского хомячка один из двух аллельных генов в целом ряде локусов инактивирован в результате хромосомных перестроек. Хромосомный набор длительно поддерживающихся культур клеток отличается от набора нормальных клеток. При культивировании часто [c.291]

Клетка мыши,трансформированная геном HPRT+ китайского хомячка [c.306]

Рис. 10.9. Накопление митотических клеток. Показана зависимость функции накопления митотических клеток Ig (1+iVm) от времени для клеток китайского хомячка (Г=12,4 ч) и клеток HeLa (7 =20,1 ч), к которым в нулевое время добавляли колцемид. [Перепечатано с любезного разрешения автора (Риск,

Обнаружено, что СаТ1, экспрессированный в яйцеклетках китайского хомячка, проявляет уникальные биофизические [c.144]

Факторы, изменяющие распределение клеточной популяции по возрасту. Известно, что на разных стадиях клеточного цикла клетки обладают неодинаковой радиочувствительностью. Для большинства клеток наиболее радиочувствительные стадии — поздняя Оз , М и поздняя 01>. На стадиях поздняя 5 и ранняя 01 клетки наиболее устойчивы к облучению. Некоторые воздействия изменяют продолж ительность отдельных стадий клеточного цикла и, таким образом, модифицируют радиочувствительность популяции клеток. В сыворотке уменьшенной он-, центрации пролонгировалась стадия 61 клеток китайского хомячка, при этом радиочувствительность популяци и была иже, чем при культивировании в сыворотке нормальной концентрации, где значительно меньше клеток в стадии 61. Агенты, блокирующие синтез ДНК, вызывают накопление клеток на поздней стадии 0 и (или) 1ранней 5. При этом клетки оказываются наиболее радиочувствительными. [c.126]

Аналогичные результаты на клетках китайского хомячка были получены с использованием актиномицина D, который увеличивает гибель облученных клеток, переводя сублетальные повреждения в летальные (уменьшает плечо на кривой выживаемости). Если между облучением и добавлением актиномицина D проходит 2—8 ч, то способность антибиотика увеличивать летальное поражение резко падает. Это означает, что восстановительные системы клетки переводят сублетальные повреждения, чувствитзльные к актиномицину D, в нечувствительное состояние. По ряду признаков, последний эффект имеет много общего с восстановлением, описанным Элкиндом и СатТон, но отличается от репарации потенциально летальных повреждений, реализуемых оксимочевиной. [c.145]

Сортировка X- и Т-хромосом. В работе [333, 330] осуществлена препаративная проточная цитофотометрия X- и У-хромосом человека. Х-хромосома была выделена из клеточной линии с кариотипом 48,ХХХХ с помощью однолучевой сортировки. Этот материал был использован для приготовления библиотеки хромосомной ДНК после обработки рестриктазой ЕсоК1 и клонирования в фаге (см. разд. 2.3,2,2), У-хромосома отобрана с помощью двулучевого сортера из материала гибридной клеточной линии китайский хомячок X человек . Получение клеточных гибридов будет описано в разд, 3,4,3 в связи с локализацией генов в хромосомах. Важная особенность гибридных клеток человек х мышь или [c.132]

Единственным животным, удовлетворяющим всем этим условиям, является мышь (Mus mus ulus). Поэтому радиационная генетика млекопитающих представляет собой главным образом радиационную генетику мыши. Другие виды, такие как крысы, китайские хомячки или обезьяны-мармозетки, используются лишь эпизодически. По этой причине последующие разделы будут посвящены в основном мутагенезу у мышей, хотя они и содержат [c.230]

Есть химические соединения, которые не влияют на саму ДНК, но нарушают ре-паративные процессы. Наиболее широко известен среди них-кофеин. Это вещество не индуцирует каких-либо хромосомных аномалий у млекопитающих, согласно результатам, полученным в тест-системах in vivo, однако в его присутствии в культурах лимфоцитов человека обнаруживаются хромосомные бреши и разрывы. Вероятно, условия культивирования приводят к значительным повреждениям ДНК, которые в норме репарируются, а в присутствии кофеина-нет. Доказательство, что кофеин действительно является ингибитором репарации, получено в исследованиях на низших организмах [1419 1604]. При применении вместе с алкилирующим мутагеном кофеин увеличивал число хромосомных разрывов и транслокаций в клетках костного мозга китайского хомячка. Такие синергические эффекты мутагенных агентов легко могут пройти незамеченными и могут иметь важное значение для людей, подвергающихся воздействию разнообразных потенциальных мутагенов. [c.264]

Мы не можем проводить эксперименты на половых клетках человека. Поэтому экстраполяции данных, полученных на других организмах, неизбежны. Эти организмы должны находиться в близком филогенетическом родстве с человеком, настолько близком, насколько это вообще возможно. По практическим соображениям работы следует проводить на лабораторных млекопитающих, используемых в радиационной генетике-мышах, китайских хомячках, крысах. Результаты, полученные на более отдаленных в филогенетическом смысле видах, таких как бактерии или Drosophila, дадут очень мало данных, применимых к человеку. Поэтому следует использовать [c.267]

Тканевые различия в индукции мутаций. Третья экстраполяция-эго экстраполяция с одной ткани на другую. Хромосомные мутации, например, можно легко проанализировать в костном мозге мышей или китайских хомячков или в культурах лимфоцитов человека. Было бы заманчиво провести экстраполяцию с этих соматических клеток на половые клетки. Однако опыт, полученный в радиационной генетике, показал, что чувствительность половых клеток может очень отличаться от чувствительности других клеток (разд. 5.2.1.3). Для практических целей не так важно, обусловлены ли эти различия клеточным отбором или действительными различиями в индукции мутаций. Кроме того, у обоих полов отмечена неодинаковая чувствительность на разных стадиях развития половых клеток. По всем этим причинам проверка на мутагенность в соматических клетках не может дать информации, необходимой для вычисления оценок генетического риска. Однако методы цитогенетического тестирования m vivo очень ценны для получения оценок риска возникновения соматических мутаций, особенно тех из них, которые, возможно, приводят к раку. [c.269]

Другой путь увеличения выхода митотических клеток — это накопление клеток в метафазе после кратковременной обработки колцемидом. При пересеве линии фибробластов китайского хомячка Don- каждые 24 ч (Stubblefield et al., 1967) была получена частичная синхронизация клеток с пиками митозов че- [c.147]

Фазу G2 клеточного цикла исследовать, по-видимому, труднее всего, поскольку наиболее трудно получить популяцию клеток, синхронизированных в фазе G2. Дело в том, . что если клетки синхронизированы путем отбора митотических клеток или накоплением на границе фаз G1/S, то при достижении ими фазы G2 степень синхронизации заметно снижается. Это происходит в результате дисперсии скоростей, с которыми индивидуальные клетки проходят клеточный цикл. Популяции клеток в фазе G2 всегда содержат клетки, находящиеся в других фазах клеточного цикла, и максимальное обогащение клеток китайского хомячка СНО, находящихся в фазе G2, оказывается 0,7 в случае двойного тимидинового блока и 0,4 в случае отбора митотических клеток (Enger et al., 1968). [c.162]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология