Гибридизация политенных хромосом

Б —результат гибридизации радиоактивного элемента МДГ-1 с ДНК политенных хромосом дрозофилы (3 хромосома). [c.342]

Рве. 9-13. Соотношение количеств ДНК в разных участках хромосом из диплоидных тканей и политенных хромосом (задача 9-14). Сегмент хромосомы, покрываемый клонированными рестрикционными фрагментами, изображен внизу, на нем указаны хромосомные области и диски. Клонированные фрагменты изображены над хромосомой, отмечено расположение фрагментов 2851 и 2842. Над каждым фрагментом указано отношение уровней его гибридизации с ДНК из политенных хромосом и с ДНК из диплоидных тканей. [c.139]

В геноме многоклеточных эукариот выделяют два компонента эухроматин и гетерохроматин. Гетерохроматин включает значительную, иногда более половины по весу, часть ДНК. У дрозофилы гетерохроматин составляет более 30% ДНК. На рис. 1, А показаны эухроматиновые и гетерохроматиновые участки хромосом, наблюдаемые в делящихся клетках. Гетерохроматин сконцентрирован в основном около центромеры. Основная масса генов локализована в эухроматине, материал которого доступен для визуального анализа благодаря наличию у дрозофилы политенных хромосом, присутствующих в ядрах не делящихся клеток слюнных желез (рис. 1, Б). Политенные хромосомы представляют собой жгуты, составленные из параллельно расположенных молекул ДНК, образующихся в процессе последовательных актов редупликации ДНК. Существование таких гигантских политенных хромосом открывает новые возможности исследования геномов и определения в хромосомах локализации трансгенов, а также подвижных элементов (см. ниже) с помощью гибридизации in situ. [c.15]

Гистоновые гены у других видов. С помощью гибридизации in situ было показано, что все гистоновые гены Drosophila локализованы в одной области политенной хромосомы 2. Пять разных генов сцеплены в пределах одной единицы, повторяющейся примерно 100 раз расположение генов и направление транскрипции существенно отличаются от таковых у морского ежа (рис. 9.18). Переключение синтеза гистонов на путь их образования в массовом количестве в ходе эмбриогенеза у Drosophila, как и у морского ежа, по-видимому, связано с экспрессией альтернативных генов, а не с модуляцией экспрессии одного и того же набора генов. [c.183]

При отжиге in situ радиоактивных зондов сателлитных последовательностей I и IV с политенными хромосомами Drosophila гибридизация происходит со всеми центромерами (рис. 9.27). Однако ее эффективность у разных хромосом значительно различается, что свидетельствует о вариабельности числа повторяющихся единиц. Кроме того, каждая сателлитная последовательность гибридизуется с определенной областью центромеры, что говорит [c.191]

Высокая частота мутаций и реверсий у дисгенных мух в значительной степени обусловливается встраиванием и вырезанием Р-элементов. Встраивание, по-видимому, происходит только в клетках зародышевой линии с частотой примерно одно встраивание на хромосому в одном поколении мух (эти оценки получены с помощью гибридизации in situ с политенными хромосомами). Как показывают результаты реверсии мутации в локусе white, вырезание происходит очень точно (рис. 10.14). Частоту этих событий можно оценить генетически исходя из частоты реверсий они наблюдаются у каждых четырех из тысячи мух, т.е. эта частота [c.239]

Гибридизация in situ одного из ретротранспозонов семейства 412 с политенной хромосомой Drosophila-потомка от скрещивания мух двух разных линий. Четко видна разная локализация членов семейства 412 в двух [c.258]

Первые предположения о мобильности Р-эле-мента основывались на данных о его разной локализации в геноме мух и о дупликации сайтов-мише-ней. Об этом свидетельствовали результаты опытов по гибридизации in situ клонированных Р-зондов с политенными хромосомами D. melanogaster разных [c.264]

Вы можете найти ответ на этот вопрос, поскольку получил последовательный ряд клонов, который охватывает отрезок длиной 315 т. п. н. ДНК дрозофилы, включающий примерно 12 диет и междисковых участков. В качестве зондов для гибридизации вн можете использовать радиоактивно меченные фрагменты эт клонов, чтобы определить количество комплементарной им ДНК присутствующей в диплоидных тканях и политенных хромосомал Вы выделяете ДНК из диплоидных тканей и политенных хромо сом, обрабатываете равные количества ДНК рестриктазами, взя тыми в различных сочетаниях, разделяете фрагменты путем гель-электрофореза и переносите их на нитроцеллюлозные фильтры дш гибридизации. В каждом случае набор фрагментов, образовавших- ся при рестрикции, одинаков для ДНК из диплоидных ткане и политенных хромосом, как показано на рис. 9-12. Вы измеряем интенсивность полос многих специфических фрагментов, образо- вавшихся при рестрикции, и выражаете результат как отношение интенсивности полос фрагментов из политенных хромосом к ш- тенсивности полос соответствующих им фрагментов из диплоид- ных тканей (рис. 9-13). [c.138]

Анализ политенных хромосом свидетельствует о том, что в интерфазном ядре каждая хромосома расположена отдельно, т.е разные хромосомы не сильно перевиты друг с другом (рис. 9-98) Более того, установлено, что в интерфазном ядре и другие типы хромосом, а не только политенные, стремятся занять дискретные домены Папример, методом гибридизации in situ с соответствующими ДПК-зондами можно выявить отдельную хромосому в гибридных млекопитающих, растущих в культуре (рис. 9-99). Замечено, что большая часть ДПК такой хромосомы занимает очень небольшую часть интерфазного ядра. Этот факт свидетельствует о том, что каждая отдельная хромосома остается компактной и структурированной, благодаря чему отдельные ее части могут активно участвовать в синтезе РПК. [c.168]

Первоначально метод гибридизации in situ был наиболее успешно применен для выявления нуклеиновых кислот, находящихся в клетках в большом количестве копий. Этим методом выявляли, например, повторяющиеся последовательности сател-литных ДНК, амплифицированные рибосомальные ДНК в ооци-тах амфибий, латерально амплифицированные ДНК в политен-ных хромосомах двукрылых, рибосомальную и 5S РНК. Более того, с помощью этой же техники были идентифицированы и локализованы накапливающиеся в клетках транскрипты генов. [c.305]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология