Радиохроматография, меченые соединения

Радиохроматография, эффективный и часто используемый аналитический метод в органической химии и биохимии, сочетает высокую разделительную способность хроматографии на бумаге с большой чувствительностью при определении ионизирующего излучения. Ее значение в синтезе меченых органических соединений возрастает еще благодаря тому, что часто необходимо бывает обнаружить и выделить радиоактивные примеси в очень малых количествах. В некоторых современных синтезах меченых соединений с применением радиоизотопов с весьма высокой удельной активностью и с сильным радиационным действием [66, 84] применение хроматографических методов совершенно необходимо, поскольку они дают возможность обнаружить и отделить очень малые количества продуктов радиолиза, оказывающих существенное влияние на общую активность неочищенного продукта. [c.672]

В период с 1950 г. до начала 60-х годов проявлялся повышенный интерес к использованию БХ для разделения меченых соединений, и именно в этот период появилось большинство публикаций, посвященных методу бумажной радиохроматографии. В настоящее время БХ применяется лишь для разделений, которые по каким-либо причинам нельзя выполнить с помощью ТСХ или других методов. [c.37]

Существует ряд задач, включающих процедуру разделения меченых соединений и связанных таким образом с радиохроматографией. Некоторые примеры таких задач обсуждаются в данной главе, поскольку они иллюстрируют целесообразность применения радиоизотопов в биологических исследованиях. Методы регистрации активности аналогичны рассмотренным в предыдущих главах. [c.246]

При биосинтезе и исследованиях процессов метаболизма, по-видимому, нельзя обойтись без использования меченых соединений. Анализ с помощью ГЖХ и обычного массового детектора, как правило, показывает присутствие в разделяемой смеси многочисленных соединений, некоторые из которых удается идентифицировать по известным временам удерживания ожидаемых продуктов разделения. Решающее значение имеет обычно присутствие или отсутствие радиоактивности в определенных соединениях если соединение радиоактивно, то его так или иначе следует связать с исходным меченым материалом. Наиболее простой способ проверки радиоактивности разделенных соединений — объединить процесс сбора этих соединений и измерение их радиоактивности (при тех значениях времен удерживания, которые соответствуют ожидаемым меченым соединениям). Измерение радиоактивности можно проводить при этом в течение продолжительного времени. Это позволяет работать с малыми уровнями радиоактивности, и в этом основное преимущество данного способа. Использование сигнала массового детектора для управления сбором разделенных веществ сопряжено с риском, так как радиоактивное соединение может иметь малую массу и не быть обнаружено детектором. Для того чтобы по возможности не пропустить радиоактивного соединения, отбор фракций следует проводить часто и в течение одинаковых промежутков времени на протяжении всего процесса хроматографического разделения (или до тех пор, пока не будет точно известно, что из колонки вышли все нужные соединения). Выполнить все это вручную довольно трудно, поэтому здесь имеет смысл использовать автоматические устройства для отбора фракций [93]. Систему для газовой радиохроматографии с двойной меткой (изотопом С и тритием) и с высоким уровнем автоматизации описали Томас и Дюттон [94]. Эта система включала в себя не только устройство для автоматического [c.297]

К середине 40-х годов была хорошо разработана методика применения радиоактивных меток в биологических исследованиях, и вскоре возник интерес к возможности разделения меченых соединений методом бумажной хроматографии (БХ). Так появилась радиохроматография . В 1947 г. Финк с сотр. [4] описал использование в исследованиях метаболизма у крыс, причем метаболиты разделяли методом распределительной хроматографии на фильтровальной бумаге и затем детектировали авторадиографически на рентгеновской пленке. [c.9]

В конце 50-х годов метод ГЖХ прочно вошел в практику как мощный инструмент аналитического и препаративного разделения большого числа соединений. Были разработаны детекторы на отдельные элементы и к высокой чувствительности метода добавилась еще и избирательность. Разделения меченых соединений методом ГЖХ описываются в литературе с 1955 г. [6], и в настоящее время метод газожидкостной радиохроматографии (ГЖРХ) разработан очень хорошо. Развитие и при- [c.10]

Имеется сравнительно немного полных обзоров, посвященных методу БРХ [1—3]. В работе Почиари и Росси [1] рассмотрена вся литература по этому вопросу за период до 1961 г. Позже Толгисси [2] затрагивает вопросы, связанные с БРХ, в более общем обзоре по радиохроматографии и электрофорезу и приводит описание приборов, выпускавшихся в 1972 г. В некоторых ранних трудах по БХ отдельные главы посвящены анализу меченых соединений (например, в работе Хайса [3]), одпако в более поздних публикациях этот вопрос рассматривался не всегда. [c.38]

Хроматографические методы разделения смесей получили особенно широкое расгаростраиение в химии сложных природных соединений, так как многие из этих соединений не перегоняются без разложения и трудно кристаллизуются. Техника хроматографии быстро совершенствуется это о собенно относится к распределительной хроматографии, в частности к хроматографии на бумаге. Так, например, используя метод меченых атомов (радиохроматография на бумаге), удается быстро разделять очень малые количества смесей. [c.34]

Попьяк с сотр. [11, 12] разработал свой радиохроматограф в основном для решения задач, связанных с анализом жирных кислот. Наиболее распространенные в то время аналитические методики (например, бумажная и колоночная распределительная хроматография) были либо очень трудоемкими, либо неэффективными при анализе жирных кислот, и в связи с этим была сделана попытка использовать ГЖХ для анализа их метиловых эфиров. Задача разделения такого типа эфиров методом ГЖХ была вскоре решена [52], однако детектора для регистрации меченых производных еще не было. Первый прибор, созданный Попьяком [П], использовали для разделения эфиров жирных кислот, меченных С, а на усовершенствованном приборе [12] можно проводить уже одновременную регистрацию соединений, меченных и Н. [c.233]