Обработка воды с помощью электрофореза

Обработка воды с помощью электрофореза [c.64]

Анализ гелей после извлечения их из трубок. Извлеченные из трубок гели можно сканировать, не подвергая их никакой дальнейшей обработке или после окрашивания. Окрашенные гели можно также разрезать на сегменты и проанализировать материал, полученный путем элюирования. Кроме того, гели можно солюбилизировать, например для определения в них радиоактивности. Гели извлекают из трубок и окрашивают сразу же после электрофореза во избежание диффузии полос. Извлечение гелей связано с трудностями, и для того, чтобы успешно провести эту процедуру, не повредив поверхности гелей, необходим определенный опыт. Один из возможных способов заключается в том, что в пространство между стенкой трубки и гелем медленно вводят вращательным движением иглу шприца длиной около 8 см, выдавливая из шприца воду или 50%-ный глицерин. Иглу вынимают после того, как гель начинает свободно перемещаться в трубке или когда его можно вытеснить под давлением с помощью медицинской капельницы с грушей, заполненной водой. Это следует делать над лотком с водой или в самом лотке. [c.268]

Замена в положении 5. А1а -Брадикинин. Синтез А1а -брадикинина осуществлен Шрёдером [1963, 1969]. Конденсация СЬо-А1а-5ег-ЫНКН2 с H-Pr0-Phe-Aгg(N02)-0Me привела к защищенному пентапептиду, который подвергали декарбобензоксилированию обработкой бромистым водородом в трифторуксусной кислоте, а полученный эфир пентапептида Н-А1а-5ег-Pг0-Phe-Arg(N02)-0Me конденсировали с bo-Aгg(N02)-Рго-Рго-01у-ЫНЫН2. Удаление защитных групп у образовавшегося нонапептида осуществляли щелочным гидролизом и каталитическим гидрогенолизом. Свободный нонапептид был очищен с помощью электрофореза без носителя [а] —109,4° (с = 0,5 вода). Как и следовало ожидать, при инкубации А1а -брадикинина с химотрипсином происходит отщепление только С-концевого [c.130]

Обработка гелевых столбиков после электрофореза. Трубочки вынимают из камеры, помещают в пронумерованные пробирки. Гель из них извле- кают с помощью воды, вводимой шприцем с длинной иглой между столбиком геля и стенкой трубочки, при этом гель выскальзывает из трубочки. [c.35]

В настоящее время большинство описанных выше приемов вытеснены методами хроматографии и электрофореза. Применяли адсорбцию на смеси древесного угля с целитом с последующим элюированием водным этанолом [24, 251, однако полученные результаты не всегда воспроизводимы [26]. Другие авторы удаляли аминокислоты и низшие пептиды с помощью дауэкса-50 X 8 или зеокарба 225, трехмерная структура которых почти полностью исключает возможность сорбции гликопептидов [6, 25]. Хорошее отделение гликопептидов от аминокислот и других пептидов было достигнуто путем хроматографии продуктов протеолитического расщепления орозомукоида на колонке с бумажным порошком со гмесью к-пропанол — этанол — вода — уксусная кислота (5 15 5 0,75) в качестве растворителя [27]. Во многих случаях высокую степень очистки дает электрофорез на колонках типа описанных Поратом [28], в которых в качестве удерживающей фазы используется целлюлоза, подвергнутая этанолизу. Ли и Монтгомери [19] подвергали такую целлюлозу обработке борогидридом натрия, что приводило к более инертному материалу с низким электроэндоосмотическим фактором. [c.242]

Предложен быстрый способ выявления белка в геле при условии, что на одну полосу приходится более 5 мкг белка [1092]. Гели выдерживают 30 мин при 25 °С в 0,1%-ном растворе малахитового зеленого в смеси, состоящей из 25% этанола, 10% уксусной кислоты и 65% воды. Обесцвечивание производят с помощью поперечного электрофореза в водном растворе, содержащем 10% этанола и 10% уксусной кислоты. Для повышения интенсивности окраски полос прибегают к повторной обработке гелей 0,01%-ньгм раствором кумасси яркого синего, не приводящей к усилению окраски фона. [c.157]

НОЙ воды и остатки разрушенных клеток удаляют с помощью высокоскоростного центрифугирования. Описанная методика приготовления растворов гемоглобина для электрофореза довольно проста и позволяет получать гемолизаты, свободные от лейкоцитов и тромбоцитов. Однако массовые обследования требуют максимально простых и быстрых методов. Для этой цели была предложена упрощенная методика с использованием центрифугирования в смеси сахарозы и детергента [1158]. Она дает хорошие результаты, но не позволяет получать гемоглобин Н (П. Кингстон, личное сообщение, цитируемое Хунцманом [598]). Некоторые авторы используют образцы цельной крови для электрофореза гемоглобинов на ацетате целлюлозы. Лизис клеток осуществляют, включая лизирующий агент либо в образец крови, либо в буфер, которым пропитывают пленку ацетата целлюлозы [343, 437]. Образцы крови можно также высушивать на фильтровальной бумаге и помещать эти бумажные полоски на ацетат целлюлозы [532]. Шнейдер и др. [1143] применяли лизирующий реагент (содержавший в 1 л 2,5 г ЭДТА и 50 кг K N) для лизиса неотмытых эритроцитов. Гемоглобин, подвергаемый электрофорезу, может использоваться в виде оксигемоглобина, карбоксигемоглобина (полученного путем насыщения раствора оксигемоглобина оксидом углерода СО) или цианметгемоглобина (полученного из оксигемоглобина путем его обработки феррицианидом, а зате.ч цианидом) [1141]. Все сравниваемые образцы следует наносить в какой-либо одной форме. [c.321]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология