Прямая реакция гемагглютинации

Рис. 7.1. Паиель для микротитрования, используемая для постановки реакции прямой гемагглютинации. Ряды луиок размечены для исследуемых

Рис. 7.2. Постановка реакций прямой гемагглютинации и прямого гемолиза, демонстрирующих эффект предварительной обработки сыворотки 2-мер-каптоэтаиолом (2МЭ). Сыворотки, тестируемые в рядах В и С, D и Е, получены после первичной иммунизации (преобладают IgM). Комплемент добавляли в лунки рядов D и Е для демонстрации литической активности IgM и ее изменения после добавления 2-МЭ (ряд Е). Сыворотки, тестируемые в рядах F и G, получены в ходе вторичного иммунного ответа (преобладают IgG), Поэтому 2-МЭ оказывает меиьший эффект на агглютинацию (ряд G). В лунках 06, 07 и 08 наблюдается агглютинация без лизиса.

Прямая реакция гемагглютинации [c.241]

Прямое окрашивание клеток также служит одним из лучших контролей специфичности антисыворотки. Нередко антисыворотки, достаточно специфичные в иммунодиффузии или в реакции гемагглютинации, еще содержат примесные антитела, выявляемые в реакции непрямой иммунофлуоресцеиции или другим, более чувствительным методом. [c.172]

Гуморальный иммунный ответ экспериментальных животных на эритроцитарный антиген изучали в реакции прямой гемагглютинации [102]. Постановку реакции осуществляли в соответствии с методическими рекомендациями [103]. За титр антител, выраженный в log , принимали конечное разведение сыворотки, при котором наблюдалась видимая агглютинация тест-антигена (1% ЭБ). [c.227]

Прямая реакция гемагглютинации — это простой, чувствительный метод титрования антител к поверхностным антигенам эритроцитов. Он. предусматривает приготовление последовательных разведений антител (объем проб 50или 100мкл) Б лунках панели. для микротитрования с U-образны м дном с [c.241]

Высокая степень иммунологической специфичности молекул групповых веществ обусловлена генетическим контролем их биосинтеза. Все имеющиеся данные свидетельствуют о том, что специфичность групповых веществ определяется последовательностью сахаров на нередуцирующих концах углеводных цепей. Таким образом, групповые вещества крови — великолепный объект не только для изучения взаимосвязи между структурой углевода и иммунологической специфичностью, но и для выяснения путей, по которым идет образование этих структур под влиянием генов. Иммунологические свойства групповых веществ и их зависимость от структуры изучаются с помощью специальных методов, таких, как торможение реакции гемагглютинации и преципитации простыми сахарами и торможение активности ферментов, участвующих в деградации групповых веществ. Эти методы позволили получить данные относительно природы сахаров, играющих главную роль в специфичности, за несколько лет до их прямого выделения, а также помогли найти подходы к задаче получения фрагментов с различной серологической специфичностью. С помощью непрямых методов было убедительно показано, что a-N-ацетил-в-галактозаминоильный и сс-в-галактозильный остатки определяют соответственно А- и В-специфичности, а а-ь-фукозиль-ные остатки — Н- и Ье -специфичности. Эти данные были подтверждены при установлении строения активных фрагментов, выделенных из продуктов частичного кислотного гидролиза групповых веществ. Выяснение строения многих активных и неактивных фрагментов позволило предположить строение участков углеводных цепей, ответственных за серологическую специфичность А-, В-, Н- и Ье -веществ. [c.212]

Эритроциты можно сенсибилизировать антителами, как описано в разд. 3.3.2. Используя для связывания с эритроцитами три концентрации антител, обычно мюжно с nepiboro раза определить дозу, дающую крайне чувствительный антиглобулиновый тест,. без какой-либо тенденции к спонтанной агглютинации. Однако в то М случае, если эритроциты, нагруженные антиг ло булинами в оптимальной концентрации, все же проявляют склонность ж образованию (конгломератов в безбелковом буфере, можно рекомендовать проводить тест с использованием буфера, содержащего. 2% инактивированной нагреванием сыворотки. плода коровы (СПК). Постановка реакции аналогична таковой в случае прямой гемагглютинации, однако в связи с ее высокой чувствительностью для определения конечной точки титрования воз можно придется титровать антиглобулины в разведениях, превышающих 24-луночные серии, либо же начинать титрование с разведения 1 1000. Для достижения максимальной чувст вительности можно использовать 0,5%-ную суспензию сенсибилизированных клеток. [c.254]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология