Иммунологические свойства ДНК

В иммуноферментном анализе используются поли- и моноклональные антитела как по отдельности, так и вместе. Относительная легкость получения поликлональных антител из антисывороток иммунизированных животных в ряде случаев дает возможность пренебречь их гетерогенностью. Однако разработка метода получения моноклональных антител — продуктов гибридных клеток — дала им огромные преимущества в иммунохимическом анализе в связи с уникальными свойствами, выгодно отличающими их от антисывороток. Использование моноклональных антител в иммуноферментном анализе дает возможность работать с практически неограниченным источником антител, однородных по молекулярным и иммунологическим свойствам. С их появлением открылись новые возможности для структурного изучения антигенов. Это связано с тем, что моноклональные антитела, продуцируемые гибридомами, связываются со специфическим участком на поверхности белковой молекулы — антигенной детерминантой и могут быть использованы в качестве селективных зондов на определенные структурные участки. [c.306]

В принципе возможен систематический анализ любой системы иммуноглобулин — лиганд. Исследование моделей связывания может проводиться систематическим образом, поскольку у млекопитающих, например кроликов или коз, синтез антител может индуцироваться по отношению к любой специально подобранной молекуле (с низкой или высокой молекулярной массой). Используя аффинную хроматографию, получаемые антитела затем очищаются. Как правило, эта процедура приводит к вырожденному иммунному ответу, т. е. к синтезу нескольких видов антител несколькими клонами так называемых клеток плазмы (542]. Эти антитела отличаются константами сродства к лиганду, что проявляется также в химических, спектральных и иммунологических свойствах центров связывания. Последующие анализы аминокислотной последовательности показали, что различия вызваны аминокислотными заменами в гипер-вариабельных областях доменов /ь и Ун [622]. На первый взгляд кажется, что вырожденный ответ должен усложнить пространственную организацию центров связывания. В действительности, однако, в этом случае возможно объединить и взаимно контролировать данные по нескольким центрам связывания, что заметно увеличивает вероятность нахождения правильных моделей. [c.245]

Препаративные ультрацентрифуги предназначены для выделения из растворов отдельных фракций. Конечно, эти фракции могут быть однородны только по одному показателю — по скорости седиментации, а по другим свойствам могут значительно отличаться. Например, гамма-глобулины человека (один из видов белков крови, широко известный в медицине как лечебное средство) при центрифугировании обычно разделяется на две фракции с константами седиментации 75 и 19S. Белки, образующие эти фракции, заметно различаются между собой и по ряду других свойств (иммунологическим свойствам, электрофоретической подвижности и т. п.). [c.148]

Основное преимущество этого метода заключается в том, что, исследуя очень малые количества белка, можно охарактеризовать его иммунологические свойства и размер молекул. [c.153]

Индивидуальность полученных препаратов гликопротеинов контролируется чаще всего аналитическим ультрацентрифугированием (см., например, ), электрофорезом с подвижной границей или на носителях, хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе. Как и в случае полисахаридов, критерием однородности выделенного гликопротеина может служить неизменность его мономерного состава (моносахаридов и аминокислот) и физико-химических свойств при применении нескольких способов очистки. Для определения нативности выделенных веществ особое значение имеет контроль их биологической активности, в первую очередь иммунологических свойств. [c.567]

Методические рекомендации по экспериментальному изучению иммунологических свойств химических факторов окружающей среды. М., 1989. 47 с. [c.1099]

Белки в патологии. Так называемый белок Бенс-Джонса не является однородным, а представляет, повидимому. группу белков. обладающих однозначными физическими свойствами, но различающихся по химическому составу и иммунологическим свойствам. [c.148]

Различие между белками этих двух штаммов состоит в том, что у подорожникового штамма белок содержит метионин и гистидин, отсутствующие в белке нормального штамма. Вирусы эти различаются по своим иммунологическим свойствам. Оказалось, что гибридный вирус вызывает заболевание, характерное для подорожникового штамма, по по иммунологическим свойствам напоминает обычный штамм. Потомство же гибридного вируса содержит метионин и гистидин, подобно белку подорожникового штамма, из которого первоначально была получена нуклеиновая кислота вируса, и в отличие от белка гибрида, использованного в качестве инокулума. Эти результаты доказывают, что генетические особенности вируса определяются его РНК, но не его белком. [c.154]

Таким образом, результаты этих опытов показывают, что конформация молекулы, обусловливающая ее ферментативную активность, полностью определяется последовательностью аминокислот в полипептидной цепи. Для того чтобы остатки цистеина соединились правильно, пе нужно никакого специального фермента. Образование специфических дисульфидных связей требуется, по-видимому, лишь для стабилизации активной конформации, а не для ее возникновения. В результате восстановления и последующего окисления рибонуклеазы образуется продукт, имеющий ту же ферментативную активность, ультрафиолетовый спектр, характеристическую вязкость, дисперсию оптического вращения и те же иммунологические свойства, что и нативный фермент. Пептидные карты, получаемые после ферментативного расщепления этих двух веществ, также идентичны. Если 6l.i расположение дисульфидных связей в нативной и реконструированной рибонуклеазе было различным, пептиды, содержащие такие связи, не могли бы попасть, на одинаковые места карты. [c.279]

Использование в медицинской практике различных противоопухолевых препаратов значительно расширило возможность лечения как системных злокачественных новообразований, так и ряда солидных опухолей. Однако существенным недостатком некоторых противоопухолевых препаратов является сравнительно малая избирательность действия на опухолевые и нормальные клетки и общее токсическое влияние на ряд жизненно важных систем организма. Эти особенности противоопухолевых препаратов могут вызывать резкое ослабление иммунологических свойств организма, что приводит к смертельным исходам в результате инфекционных заболеваний. Кроме того, даже при условии уничтожения или подавления жизнедеятельности всех опухолевых клеток в организме противоопухолевые препараты иногда не в состоянии устранить возможность рецидивов. [c.335]

В настоящее время около половины идентифицированных ферментов находятся в клетках и тканях в виде множественньгх молекулярньгх форм, имеющих единую субстратную специфичность, но отличающихся по физико-хими-ческим или иммунологическим свойствам. Генетическая основа молекулярной гетерогенности обусловлена наличием нескольких генов, каждый из которых кодирует одну субъединицу фермента или одну его молекулярную форму. Кроме того, различные молекулярные формы одного и того же фермента могут кодироваться в одном генном локусе, имеющем множественные аллели. Генетически детерминированные молекулярные формы называются изоэнзимами. Посттрансляционные модификации ферментов, обусловленные локальным протеолизом, ковалентными модификациями, белок-белковыми взаимодействиями и т. д., являются причиной образования множественных молекулярных форм, не являющихся истинными изоэнзимами, но играющими существенную роль в метаболических процессах. Наиболее часто встречаются так называемые конформеры — молекулярные формы, имеющие одинаковую первичную структуру, но отличающиеся по своей конформации. Это возможно в том случае, если эти конформации достаточно устойчивы, т. е. соответствуют уровню свободной энергии, близкой к минимальной. Только такие конформационные варианты белков, которые воспроизводимо фиксируются посредством электрофоретических, хроматографических или иных методов, могут рассматриваться как конформеры. [c.83]

Поскольку антитела являются белками специфической структуры, обладающими иммунологическими свойствами, то тем самым ограничивается круг изотопов, которые могут быть введены в них в терапевтической дозе. Методы биосинтеза для этой цели непригодны из-за низкой удельной активности получаемых препаратов белка. Химическими методами в белок могут быть введены Н, 5, Р, I и, по-видимому, А . [c.513]

Комплексы сывороточных белков с другими веществами белковой природы могут быть также выделены с помощью гель-хроматографии, как это было уже показано на примере комплекса гемоглобин — гаптоглобин (фиг. 16) [49]. Еще проще количественно определить емкость гемоглобина (способность гемоглобина к комплексообразованию) на сефадексе G-100 [50]. Фракция макроглобулинов (выделение на сефадексе G-200), очевидно, содержит белок, связывающий трипсин [51, 52]. Активность при этом сохраняется лишь частично [51, 52]. Комплексы антиген — антитело часто выделяли на пористых гелях, а затем после разложения на составные части исследовали более подробно (см. литературу, приложение IX). В предыдущем разделе на примере инсулина были рассмотрены возможности изучения растворимых иммунокомплексов. Иммунологические методы в сочетании с гель-фильтрацией играют важную роль в исследовании строения Y-глобулинов. Среди работ на эту тему (см. литературу, приложение X) имеются блестящие исследования, посвященные восстановительному расщеплению и выделению L- и Н-цепей, их рекомбинации, ограниченному действию папаина и, наконец, иммунологическим свойствам интактного белка и его фрагментов. [c.218]

Белковые препараты очень чувствительны ко всякого рода воздействиям, химическим и радиационным. Иммунологические свойства особенно специфичны в этом смысле. Поэтому одной из задач создания препарата радиоактивных антител является сохранение их иммунологической специфичности, что потребует разработки определенных мер защиты. [c.514]

Наконец, при денатурации происходит утрата белками биологической активности. Воздействие денатурирующих агентов приводит к инактивации ферментов, гормонов и вирусов. Эта потеря специфических биологических свойств считается важным критерием денатурации. Однако имеется и ряд исключений. Например, активность инсулина сохраняется при денатурации мочевиной, в растворах которой сохраняют свою активность также трипсин, папаин и пепсин рибонуклеаза и лизоцим обладают тепловой устойчивостью, и их активность слабо изменяется при кипячении в разбавленной кислоте. Наряду с потерей ферментативной активности наблюдается и изменение иммунологических свойств. Как известно, иммунологическая активность белков характеризуется двумя показателями — антигенностью, т. е. способностью возбуждать образование антител, и специфичностью. Исследование этих показателей привело к выводу, что при денатурации ряда белков происходит понижение антигенности, но сохраняется иммунологическая специфичность. [c.191]

Продукты термоокислительной деструкции ПВС при 170°С содержат непредельные углеводороды, альдегиды, органические кислоты и окись углерода. Совместное действие этих продуктов вызывает у животных раздражение слизистых оболочек глаз и дыхательных путей, а при длительном вдыхании приводит к повышению возбудимости нервной системы, снижению иммунологических свойств, бронхиту, хронической интерстициальной пневмонии и дистрофическим изменениям в печени [23, с. 136 . [c.517]

Гликосфинголипиды — это сложные липиды, липофильная часть молекулы которых — церамид, соединена р-гликозидной связью с полярным углеводным остатком [264]. Они встречаются в составе наружных мембран клетки, а также в крови и чрезвычайно важны в явлениях межклеточной адгезии, обладают иммунологическими свойствами, а также играют важную роль в таких явлениях, как злокачественный рост клеток. [c.341]

НЫХ основаниях обнаружил, однако, что кровь не просто положительна или отрицательна в отношении многочисленных и иногда, казалось бы, маловажных специфических антител ( иммунных веществ), но что у положительной по этому признаку крови имеются градации концентрации. Если принять во внимание эти факты, то становится очевидным, что каждая проба крови отличается ио своим иммунологическим свойствам. Так как к группам крови привлекается в настоящее время много внимания и этому вопросу посвящено большое число обзоров и монографий [4—7], то нет необходимости детально обсуждать здесь эту проблему. Исследования последних лет показали, что группы крови могут иметь значение, о котором ранее не подозревали. Прежде всего было установлено, что у больных раком желудка кровь типа А встречается чаще [8]. Затем было найдено, что имеется известная корреляция между типом О крови и частотой язвы желудка. После изучения архивов 12 английских госпиталей — в общей сложности ЗОИ историй болезни больных, страдающих язвой, — авторы сформулировали следующий вывод Полученные результаты с замечательной четкостью показывают, что среди больных, страдающих язвой, необычайно высок процент лиц, имеющих кровь группы О, и соответственно меньше больных с кровью, принадлежащей к трем остальным группам [9]. [c.69]

Электродиализ находит себе широкое применение как препаративный метод для удаления электролитов из различных суспензий, коллоидных растворов и т. д. Большое применение имеет электродиализ лечебных сывороток. При получении иммунных сывороток было выяснено, что основные иммунологические свойства лечебных сывороток связаны с определенной фракцией белков крови, а именно с глобулинами. Остальные компоненты, такие как форменные элементы крови, фибрин, альбумин, являются балластом и для лучшего иммунологического действия должны удаляться из крови. Для этого используют то обстоятельство, что в нолунасыщенном растворе сернокислого аммония выделяется глобулин, а остальные компоненты плазмы крови остаются в растворе. После осаждения глобулина сернокислым аммонием последний обычно удалялся диализом, и этот процесс представлял собой весьма громоздкую по аппаратуре и длительную но времени операцию. А. В. Маркович первый ввел электродиализ в широкую практику очистки сывороток и разработал технологию его промышленного использования. В настоящее время этот метод в Советском Союзе является общепринятым для бактериологических институтов. [c.182]

В 1905 г. Бекхольд, наслоив козью сыворотку на смешанную с желатиной кроличью антисыворотку к белкам козы, наблюдал в геле образование двух полос преципитации. Иммунологическая природа этого коллоидно-химического явления была раскрыта лишь спустя несколько десятилетий. На основе реакции преципитации в геле был разработан ряд новых методов исследования, которые не только позволили охарактеризовать иммунологические свойства белков, но и открыли новые перспективы их углубленного анализа. [c.18]

Для выяснения полного строения гликопротеина нужно решить три основные задачи 1) установить сбщий тип построения гликопротеина (архитектонику гликопротеина) 2) установить природу связи между пептидными и полисахаридными цепями 3) установить мономерную последовательность в пептидных и полисахаридных цепях. Решение каждой из этих проблем требует особых подходов, хотя, естественно, эти проблемы неотделимы и часто решаются одновременно. Для изучения связи биологической функции гликопротеина с его строением особенно важно выяснение структуры тех фрагментов биополимера, которые ответственны за его специфичность. Эти группировки являются чаще всего олигосахаридными цепями. Для гликопротеинов, обладающих иммунологическими свойствами, они носят обычно название иммунологических или антигенных детерминантов. [c.568]

Иммунологические свойства ДНК еще не изучены. Однако вполне возможно, что они имеют большое значение при таких заболеваниях, как эритематозпая волчанка [116, 117]. Образование антител, способных реагировать с денатурированной теплом ДНК, может быть вызвано путем иммунизации антигенами, приготовленными из белков, соединенных с пуринами и пиримиди-нами [113—115]. [c.316]

Алкилирующие средства независимо от их химического происхождения отличаются тем, что благодаря содержанию в них реакционноспособных функциональных групп значительно нарушают процесс деления клеток. Известный представитель этого класса веществ в 1946 г. зарекомендовал себя в качестве химиотерапевтического средства, хотя до тех пор представлял интерес лишь как боевое о авляющее вещество. Речь идет об азотистом иприте, который в последующие годы дал начало большому числу синтетических цитостатических средств. С начала 50-х годов начался синтез производных азотистого иприта, содержащих фосфорил. В то время как ранее синтезированные ациклические соединения не обладали цитостатическим действием, создание циклофосфамидов позволило к концу 50-х годов совершить большой прыжок . Эти вещества активируются только в организме, прежде всего в печени и при поступлении кислорода. Они обладают широким спектром применения и оказывают некоторое действие даже на прогрессирующей стадии развития раковых опухолей. Но, к сожалению, новейшие соединения этого типа все еще сильно нарушают иммунологические свойства организма. [c.335]

Даже в пределах одного спектрального класса фикобилипротеиды различных видов могут отличаться друг от друга характером кривых, описывающих зависимость диссоциации и реагрегации от pH, а также аминокислотным составом и иммунологическими свойствами. Однако сравнительные исследования в этой области весьма немногочисленны. Обзор данных по аминокислотному составу фикоцианов дан в [97]. [c.456]

В разных главах этой книги уделено соответствующее внимание вопросу иммунологических реакций насекомых против различных возбудителей. Здесь следует отметить прежде всего, что давние опыты Метальникова, Пейо и других исследователей, изучавших иммунитет насекомых, проведены на ошибочной основе. В них применялось заражение насекомых микроорганизмами (главным образом бактериями) путем инъекции возбудителя, в то время как нормальным путем проникновения инфекции в насекомых является поглощение возбудителя с пищей. Сопоставляя заражение насекомых путем введения в них возбудителей инъекцией и с кормом, можно легко убедиться в том, что результаты будут совершенно различны. Поэтому результаты прежних опытов следует считать лишь теоретически полезными данными, которые могут получить практическое применение только в тех случаях, когда возбудитель болезни переносится от больной особи в здоровую путем укола яйцекладом перепончатокрылых паразитов. Анализ многих исследований показал, что изучение иммунологических свойств насекомых проводилось практически лишь применительно к бактериям, а вопросы иммунитета насекомых по отношению ко всем остальным группам возбудителей болезней остаются неизученными. Сложность этой проблемы усугубляется тем, что трудно хорошо представить, как хозяин реагирует не только на возбудителя в целом, но на отдельные стадии его развития от споры через схи-зонты и гамонты и до новой споры, от провируса через формирую-идиеся вирусные частицы и вновь к вирусным полиэдрам. [c.33]

Иммунологические свойства ДНК — мало исследованные биологические свойства ДНК, имеющие, вероятно, существенное значение при развитии некоторых заболева- [c.53]

Методы, собранные в этих двух книгах, весьма разнообразны и охватывают почти все стороны исследований этой важнейшей грунны соединений. Здесь можно найти методы выделения и анализа отдельных компонентов нуклеиновых кислот (пуриновых и пиримидиновых оснований, нуклеозидов и нуклеотидов), методы выделения, разделения и анализа олигонуклеотидов, изолирования отдельных клеточных органелл, выделения и фракционирования нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), а также изолирования их суммарной фракции для различного рода исследований, способы идентификации нуклеиновых кислот, методу. модификации их молекул, методы изучения их синтеза как in vivo, так и in vitro, методы изучения нуклеиновых кислот в связи с процессом биосинтеза белка и, наконец, методы изучения биологических свойств нуклеи1говых кислот, в том числе их иммунологических свойств. [c.5]

В чистом виде получены паратгормоны человека и свиньи, определена аминокислотная последовательность в их молекулах (полностью в свином паратгормоне и в первых 37 остатках в паратгормоне человека, выделенном из паратиреоидных аденом). С помощью радиоиммунологнческого метода обнаружено, что все паратгормоны из бычьих, свиных паращитовидных желез и желез человека по св<жм иммунологическим свойствам достаточно близки, но не идентичны. [c.283]

Испытания на способность нейтрализовать антитела, связывающие бычий инсулин, показали, что это соединение обладает иммунологическими свойствами, подобными свойствам природного бычьего инсулина. Напротив, А-тресковый-В-бычий инсулин проявляет свойства, аналогичные свойствам природного трескового инсулина. Эти данные свидетельствуют о том, что иммунологические свойства инсулина определяются главным образом структурой цепи А. Берсон и Ялоу [218] (ср. [1482]) нашли, что свиной инсулин индуцирует образование антител в организме человека. Свиной инсулин отличается от инсулина человека природой С-концевого остатка цепи В. Оказалось, что после отщепления этого остатка или даже восьми С-концевых остатков цепи В образуется модифицированный инсулин, все еще сохраняющий способность реагировать с антителами организма человека, образовавшимися при действии свиного инсулина. Эти исследователи указывали также на различие трехмерных структур инсулина человека и свиньи как на одну из причин, определяющих природу антигенных свойств гормона. [c.475]

Вакцины - препараты микробного происхождения, содержащие либо вирусы, либо бактерии, суспензированные в физиологическом растворе, масле (липовакцины) или в других средах. Такие препараты, как правило, обрабатываются для снижения их токсичности при сохранении иммунологических свойств вакцин. [c.253]

Каждый из четырех перечисленных классов липопротеидов не является гомогенным, а содержит в свою очередь фракции с различными хроматографическими, электрофоретическими и иммунологическими свойствами. Так, р-липопротеид состоит из двух фракций, отличающихся по составу аполипопротеидов. Пре-р-липопротеиды включают два типа частиц, отличающихся размерами, плотностью, а также составом и свойствами апопротеидов. [c.371]

Раствор можно и лиофилизовать, но при этом возможна некоторая денатурация, поэтому лучше хранить раствор на холоду с консервантом, например мертиолатом , при разбавлении 1 5000. Замораживание, как и лиофилизация, по-видимому, вызывает некоторую денатурацию. Раствор сохраняет свои иммунологические свойства длительное время, но токсичность при хранении уменьшается. [c.333]

С помощью электрофореза на крахмальном геле было показано, что 15 из известных 16 генетических вариантов трансферрина человека (см. ниже) разлагаются под действием нейраминидазы на четыре дополнительных медленно движущихся компонента, которые образуются ступенчато. Присутствие и относительная интенсивность окрашивания этих компонентов зависят от концентрации фермента (рис. 1 [25, 56]). Опыты по электрофорезу очищенного трансферрина в крахмальном блоке показывают (рис. 2), что происходит постепенное отщепление сиаловой кислоты от молекулы трансферрина. Каждый из четырех остатков сиаловой кислоты в молекуле трансферрина обусловливает определенное повышение электрофоретической подвижности цельной молекулы белка. По мере гидролиза кетозидных связей ферментом увеличивается количество отщепленной сиаловой кислоты. Этот процесс происходит до тех пор, пока все четыре остатка не будут удалены. После этого дальнейшее увеличение электрофоретической подвижности уже не обнаруживается. Полоса 4 (рис. 1) представляет собой необработанный трансферрин, в молекуле которого содержится полный комплект из четырех остатков сиаловой кислоты. Полосу О дают молекулы, из которых полностью удалены остатки сиаловой кислоты, полосы 1—3 — молекулы, содержащие соответственно от 1 до 3 остатков сиаловой кислоты. Обработка ферментом не влияет на способность трансферрина связывать железо, на его иммунологические свойства, а также на поведение при ультрацентрифугировании. Огупенчатое расщепление трансферрина, сходное с наблюдающимся при расщеплении нейраминидазой, обнаружил Поулик [57, 58] при обработке трансферрина дифтерийным токсином. Блюмберг и Уоррен [59] сообщили, что после обработки нейраминидазой одна полоса, соответствующая трансферрину, разделяется на две полосы равной интенсивности. Это явление наблюдается в том случае, если из молекулы трансферрина удаляется около 90% сиаловой кислоты. [c.123]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология