Липопротеиды, окрашивание

Различные методики окрашивания фиксированных нагреванием электрофореграмм позволяют не только выявить, но и количественно измерить различные белковые фракции. Кроме методик окрашивания белка, существуют также способы окрашивания липидных и углеводных компонентов липопротеидов и гликопротеидов. [c.54]

ОКРАШИВАНИЕ ЛИПОПРОТЕИДОВ ЖИРОВЫМ КРАСНЫМ (121 [c.57]

Методика. Фиксированные нагреванием электрофореграммы на 18 ч погружают в окрашивающий раствор, нагретый до температуры 30° С, затем для удаления этанола в течение 2 мин промывают проточной водопроводной водой и высушивают при комнатной температуре. Окрашивание при температуре ниже 30° С приводит к выпадению красителя в осадок. Липопротеиды окрашиваются в красный цвет на розовом фоне. [c.57]

ОКРАШИВАНИЕ ЛИПОПРОТЕИДОВ СУДАНОМ ЧЕРНЫМ [c.76]

Кроме описанного фиксатора, при окрашивании липопротеидов можно применять также фиксирующий раствор следующего состава [291 смесь 500 мл этанола, 20 мл 10%-ного раствора СаСЬ и 20 мл уксусной кислоты, объем которой доводят до 1000 мл дистиллированной водой. Агаровые пластинки помещают в этот фиксатор на 6 ч. [c.77]

Б. Окраш.ивание полос преципитации. Окрашивание агаровых пластинок не только делает полосы преципитации более заметными, но и повышает точность анализа за счет дополнения его специфическими цветными реакциями. Специальные методы окрашивания позволяют, кроме того, более подробно изучать белки и липопротеиды. [c.135]

Окрашивание липопротеидов Суданом черным. Основной раствор красителя 500 мг судана черного ВВ растворяют в 500 мл метанола. До использования основной раствор красителя следует не менее недели выдержать в темном месте. [c.136]

Методы специфического окрашивания полос преципитации. Ранее описанные методы окрашивания белков и липопротеидов вполне пригодны для окрашивания полос преципитации при иммуноэлектрофорезе. Ниже приведено несколько методов специфического окрашивания, которые позволяют идентифицировать определенные белковые фракции. [c.145]

С помощью специфического окрашивания на бумаге установлено, что в а- и р-глобулиновых фракциях содержатся линонро-теиды и гликопротеиды с помощью радиоактивно меченных железа, меди и некоторых других металлов установлено, что последние связаны в крови преимущественно с белками этих фракций. Все это указывает на рол а- и -глобулинов как агентов, транспортирующих жиры, углеводы, металлы и т. д. К наиболее исследованным гликопротеидам крови относятся трансферрин — белок, переносящий железо, гаптоглобин — белок, способный специфически связываться с гемоглобином, и целый ряд других, для которых разработаны специальные методы анализа. Большое число исследований посвящено также и липопротеидам. [c.101]

Для количественного определения положение зон можно установить до окрашивания по поглощению в ультрафиолетовой части спектра, а затем вырезать соответствующие участки бумаги для элюирования. Опубликовано много отличных прописей для прямой фотометрии полос бумаги, особенно в применении к рутинным клиническим и диагностическим исследованиям. Для окрашивания липопротеидов применяют красители судан черный, масляный красный О и масляный синий N. Их используют в виде насыщенных растворов в 60%-ном (по объему) этаноле. Время окрашивания равно 4—12 час. Гликопротеиды легко можно обнаружить при помощи кипящего раствора дефениламина в уксусной кислоте [11]. [c.251]

Из-за сложности манипулирования с мягкими гелями большинство исследователей предпочитает окрашивать липопротеиды перед электрофорезом (предварительное окрашивание). С этой целью краситель включают в стартовый гель или смешивают с образцом и перед электрофорезом центрифугируют [1066, 1445]. Недостаток методов предварительного окрашивания состоит в том, что они не позволяют достаточно надежно определять хиломикроны. Стартовый гель может окрашиваться избытком красителя, не связанного с липопротеидами, в результате чего создается ложное впечатление присутствия на электрофореграмме хиломикронов [373, 1445]. Чтобы облегчить визуальное обнаружение хиломикронов, Наито и др. [899] рекомендуют использовать для предварительного окрашивания разбавленный раствор суданового черного в этиленгликоле и одновременно снижать концентрацию рибофлавина в стартовом и концентрирующем гелях. Маскет и др. [830] предотвратили появление ложных зон хиломикронов, применив раствор суда-нового черного В в водном растворе диэтиленгликоля. Для поддержания красителя в растворенном состоянии они добавляли небольшое количество твина 20. Новый подход к предваритель- [c.358]

Электрофорез используется для разделения молекул, несущих суммарный заряд. Низковольтный электрофорез на бумаге нашел широкое применение для разделения аминокислот, пептидов, белков, нуклеотидов, нуклеиновых кислот и заряженных производных углеводов. Однако при низковольтном электрофорезе на бумаге имеет место значительная диффузия малых молекул, поэтому для их разделения применяют, как правило, высоковольтный электрофорез, при котором время разделения сводится до минимума и вследствие этого уменьшается диффузия. Вместо бумаги в качестве носителя зачастую используют ацетат целлюлозы, высокая чистота которого обусловливает уменьшение адсорбции образца, а следовательно, и лучшее разделение его компонентов. Одним из преимуществ ацетата целлюлозы является также его слабое фоновое окрашивание, что облегчает выявление соединений после рааделе-ния. Электрофорез на ацетате целлюлозы нашел широкое применение в клинике для разделения белков сыворотки крови (включая гликопротеиды и липопротеиды) и гемоглобинов он применяется также при иммуноэлектрофорезе. Высоковольтный электрофорез, как бумажный, так и тонкослойный, используется для разделения аминокислот, концентрация которых в плазме крови и моче при различных нарушениях обмена может быть довольно высокой. Особенно велика ценность тонкослойного электрофореза при разделении малых молекул, таких, как аминокислоты и нуклеотиды, поскольку [c.136]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология