белков головки фага

Детально изучен процесс сборки отростка фага. Шесть копий каждого из трех белков собираются в одной последовательности, образуя втулку , обладающую гексагональной симметрией (рис. 4-26). Параллельно семь других белков соединяются друг с другом, образуя структуру, напоминающую по форме клин. Затем шесть таких клиньев собираются вокруг втулки , образуя шестиугольную базальную пластинку. Только после этого к поверхности базальной пластинки присоединяются-еще два белка, которые активируют ее, в результате чего начинается сборка стержня отростка. По завершении этого процесса начинается сборка чехла отростка из структурных единиц и только после того, как трубчатая структура достигает требуемой длины, к ее вершине присоединяется белок головки. Затем над отростком формируется головка и далее начинают присоединяться нити отростка, сборка которых осуществляется отдельно. [c.329]

Гексагональные головки фагов состоят из защитной белковой оболочки, внутри которой заключена ДНК, находящаяся в комплексе с полиаминами. ДНК фага Т2 представляет собой единую молекулу с молекулярным весом 130-10 . Длина ее равна 60 мк. Если ДНК и белок пометить соответственно с помощью и 5 и быстро перенести фаговые частицы, находившиеся ранее в солевом растворе, в дистиллированную воду, то в результате осмотического шока метки разделятся, причем 535 останется в белковых оболочках фага, не содержащих ДНК. [c.367]

Сложность структуры Т-четных бактериофагов позволяет заранее предсказать существование в них нескольких, если не многих, структурных белков. На долю основного морфологического компонента фага, его головки, приходится более 85% всего белка фага. Сейчас полагают, что белок головки состоит из субъединиц с молекулярным весом 42 ООО, с N-концевым аланином и С-кон-цевым глицином 183, 114, 279]. [c.91]

За 15 лет, прошедших с тех пор, как впервые удалось выделить мутантные фаги ruh, было идентифицировано много других мутантов Т-четных фагов. С помощью этого набора мутантов оказалось возможным настолько повысить разрешающую способность генетического анализа, что в конце концов удалось заполнить разрыв между химией ДНК и структурой гена (гл. XIII). Тем не менее стало ясно, что все эти мутации затрагивают только относительно малую часть всего генома фага. Причина этого совершенно очевидна большинство генов фага, несомненно, кодируют белки, осуществляющие жизненно важные функции, так что мутации по этим генам неизбежно должны быть летальными. Несмотря на очевидность этого обстоятельства, долгое время никому не приходило в голову применить к Т-четным фагам остроумный метод, разработанный Горовицем и Лейпольдом для нолучения мутантов по жизненно важным генам Е. oli. Этот метод состоит в отборе чувствительных к температуре мутантов (см. гл. V). Наконец, в 1960 г. Эдгар и Эпштейн выделили /s-мутанты фага Т4, которые совершенно не образуют стерильных пятен при 42 °С, но образуют их при 25 °С. В то же время штамм дикого типа T4/s образует стерильные пятна при обеих температурах одинаково хорошо. Изучение физиологии размножения /х-мутантов при повышенной, запрещающей температуре показало, что у разных мутантов блокированы разные стадии развития фага. Так, у /s-мутантов одного класса при запрещающей температуре репликация фаговой ДНК не может начаться вследствие того, что при 42 °С у них не могут функционировать те или иные ранние ферменты, участвующие в метаболизме нуклеотидов — предшественников ДНК у /s-мутантов другого класса при запрещающей температуре синтез ДНК начинается, блокируются же более поздние стадии. Возникают, например, мутации в гене, кодирующем фаговый лизоцим. Бактерии, зараженные такими мутантами, не лизируют при 42 °С, хотя и содержат инфекционные частицы потомства фага. Были также найдены мутации во многих генах, кодирующих структурные компоненты фага в бактериях, зараженных любым из таких мутантов, при 42 °С не происходит сборки целых частиц зрелого фага. В этом случае лизаты содержат различные типы недостроенных компонентов фага. Если мутация затрагивает ген, кодирующий белок головки фага, лизат, полученный при высокой температуре, содержит целые фаговые отростки, но не содержит головок. Когда мутация затрагивает ген, кодирующий фибриллы отростка, у почти завершенных фаговых частиц имеется головка и присоединенный к ней отросток, но отсутствуют фибриллы, необходимые для присоединения к клетке-хозяину. [c.283]

Если эффективность близка к желаемому уровню, но все же недостаточно высока, ее можно увеличить в 3 раза, добавив к упаковочной смеси грубый препарат Я,-терминазы. Терми-наза представляет собой фаговый белок, который расщепляет лигированную ДНК в сое-сайте после упаковки ее в головке фага. Как правило, именно терминаза является фактором,. [c.109]

Одним из наиболее изученных колифагов является фаг Т2. Его частицы напоминают по форме головастиков с несколько удлиненной гексагональной головкой и отростком длиной около 100 ммк на конце отростка имеются нити, создаюгцие некоторое утолщение (фиг. 51). Проксимальный белок отростка, расположенный между этими нитями и головкой, обладает сократительными [c.157]

Некоторые авторы считают, что мутации, ведущие к изменению клеточных рецепторов, оказывают меньшее влияние на жизнеспособность бактерий, чем мутации, изменяющие рецепторный аппарат фага, на его жизнеспособность. Из этого делается вывод, что имеется определенная асимметрия возможностей эволюции для фага и бактерий. Вместе с тем положение сложнее, поскольку некоторые фаги в ходе эволюции приобрели (приобретают ) способность обходить ограничения, накладываемые этой асимметрией. Например, у разных представителей семьи Т-четиых фагов Е. соИ при изучении консервативности последовательности нуклеотидов в генах, эквивалентных по функции гену 37 фага Т4 (определяет последовательность аминокислот в белке хвостовых фибрилл и специфичность адсорбции) обнаружили следующее. Хотя эти белки и определяют морфологическую структуру (хвостовое волокно), их консервативность существенно ниже, чем консервативность белков головки. В то же время рецепторы для разных Т-четных фагов очень разнообразны и представлены не только разными белками-компонентами клеточной мембраны, но и небелковыми веществами. Например, рецептором фага Т2 является белок Отр F, фага КЗ — белок Отр А, фага Тб — белок Tsx, а рецептором фага 4 — липополисахарид. [c.201]

Посколысу хромосомы содержат белок и ДНК, возник вопрос, какое из этих веш еств участвует в передаче наследственных признаков. В 40-50-е годы XX в. появилось много экспериментальных указаний на то, что передача наследственной информации осуществляется молекулами ДНК. Одним из наглядных доказательств этого послужило изучение размножения бактериофагов — вирусов, паразитирующих на бактериях. Бактериофаг Т4, размножающийся в клетках кишечной палочки, состоит из ДНК и белковой оболочки с довольно сложной морфологией (рис. 4.2). Фаг имеет головку икосаэдрической формы, в которой тесно упакована одна молекула ДНК, и полый цилиндрический хвост, от конца которого отходят шесть тонких нитей. Хвост имеет двойные стенки и представляет собой как бы трубку, вставленную в трубку большего диаметра. [c.118]

Приготовление экстрактов для осуществления упаковки 1П vitro ДНК фага X. Используют два щтамма Е. oli, каждый из которых лизогенен в отнощении определенного мутантного щтамма фага X. Один из мутантов не способен синтезировать белок А, другой-белок Е. Оба этих белка необходимы для упаковки ДНК фага X. А -и Е"-экстракты смешивают и добавляют конкатемерную ДНК фага X, которая связывается с терминазой прежде, чем происходит разрезание в os-сайтах, и упаковывается в фаговые головки. [c.243]

Вначале рассмотрим выражение генов фага Л нри литическом пути. Цель развития - образование многочисленного потомства - достигается путем последовательной транскрипции вирусных генов. Вначале образуются белки, необходимые для репликации и рекомбинации ДНК, затем белки головки и отростка вирусной частицы и белки, необходимые для лизиса клетки-хозяина. Чрезвычайно важное значение имеет строгая очередность этих событий преждевременное разрушение клетки-хозяина для вируса, конечно, невыгодно. Выражение генов при литическом развитии происходит в три стадии предраннюю, раннюю и позднюю (рис. 28.18). На предранней стадии начинается синтез РНК с двух промоторов - ж Р . Один из образующихся при этом транскриптов служит матрицей для синтеза белка N, которому принадлежит важнейшая регуляторная роль. В отсутствие белка N предранние транскрипты заканчиваются на одном из двух участков терминации. Белок N препятствует терминированию транскрипции в этих участках и обеспечивает та- [c.121]

КИМ образом дальнейшее выражение генов фага X. Белок N включает раннюю стадию. В это время синтезируются белки, необходимые для репликации ДНК фага и рекомбинации. Кроме того, наранней стадии транскрибируется ген Q. Белок Q - еще один важный регуляторный элемент выражения генов фага X. Он необходим для перехода в позднюю стадию. На поздней стадии транскрибируются гены, необходимые для образования головки и отростка фага и для лизиса клетки-хозяина. Белок Q, подобно белку N, подавляет терминацию транскрипции. Короче говоря, последовательная регуляция литического развития осуществляется двумя белками - положительными регуляторами, кодируемыми генами N и Q. Их действие заключается в том, что они позволяют РНК-полимеразе продолжать транскрипцию, проскочив несколько участков терминации. [c.122]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология