Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Стерильные пятна

Рис. 14. Вирус коровьей оспы, титрованный на кролике (а) стерильные пятна, вызванные размножением бактериофага (б) местные поражения (вирус табачной мозаики) (в) кристаллический вирус кустистой карликовости помидор (г) и электронная микрофотография табачной мозаики (й). Рис. 14. <a href="/info/97992">Вирус коровьей оспы</a>, титрованный на кролике (а) <a href="/info/103841">стерильные пятна</a>, вызванные <a href="/info/1304815">размножением бактериофага</a> (б) <a href="/info/1903485">местные поражения</a> (<a href="/info/387602">вирус табачной мозаики</a>) (в) кристаллический <a href="/info/714697">вирус кустистой карликовости помидор</a> (г) и <a href="/info/73091">электронная микрофотография</a> табачной мозаики (й).

    Рассмотрим теперь, какова же природа пятнообразующих единиц в опыте с одиночным циклом размножения, представленном на фиг. 130. Совершенно очевидно, что стерильные пятна, которые образуются, когда зараженную культуру высевают на чашки во время латентного периода, происходят не от отдельных свободных фаговых частиц эти пятна развиваются из заряженных фагом бактерий, внутри которых уже может находиться довольно многочисленное потомство фага. Тем не менее если поместить на чашку с агаром любую такую зараженную фагом бактерию до окончания латентного периода, то из нее разовьется только одно пятно. Дело в том, что в плотной агаризованной среде около сотни частиц [c.260]

Рис. 4.1. Выявление вирусов по местным некрозам, зонам лизиса или стерильным пятнам. А. Местные некрозы, вызванные вирусом табачной мозаики на листе табака. Б. Зоны лизиса, возникшие в культуре ткани под действием вируса полиомиелита. В, Стерильные пятна, или бляшки , на бактериальном газоне — результат заражения бактериофагом. Рис. 4.1. <a href="/info/1310420">Выявление вирусов</a> по местным некрозам, зонам лизиса или <a href="/info/103841">стерильным пятнам</a>. А. Местные некрозы, вызванные <a href="/info/387602">вирусом табачной мозаики</a> на листе табака. Б. Зоны лизиса, возникшие в <a href="/info/509792">культуре ткани</a> под <a href="/info/355838">действием вируса</a> полиомиелита. В, <a href="/info/103841">Стерильные пятна</a>, или бляшки , на бактериальном газоне — <a href="/info/1748366">результат заражения</a> бактериофагом.
    В то время когда проводилось картирование г//-области, мало что было известно о функциях белков, детерминируемых этими двумя ци-стронами. Сейчас же мы знаем, что как белок гПА, так и белок гПВ включаются в мембраны бактериальных клеток, инфицированных фагом [132, 133]. Там они облегчают лизис зараженных клеток, в результате чего стерильные пятна, образуемые г//-мутантами, бывают больше по размеру, а их края — более четкими, чем в случае стандартных бляшек. [c.251]

    Рис, 64. На сплошной бактериальной культуре видны участки, в которых бактерий нет (стерильные пятна, или бляшки)— сюда попали частицы лизирующего фага. [c.154]

    В ОДНОМ посеве фаговой суспензии. По этой методике фаги высевают на газон, образованный смесью бактерий Tto и Tto ", взятых в соотношении примерно 1 1. Все Л-мутанты фага образуют обычные стерильные пятна, поскольку они одинаково хорошо заражают и (в результате своего размножения) лизируют клетки обоих индикаторных штаммов, составляющих газон. Фаги же дикого типа /г" " образуют мутные стерильные пятна, так как из двух бактериальных штаммов эти фаги способны лизировать только бактерии штамма Tto . В области каждого стерильного пятна, растущего на штамме Tto , все бактерии штамма Tto устойчивого к фагу Т2/г+, останутся целыми. В результате образуется не прозрачное стерильное пятно, а мутное (фиг. 141). [c.282]


    Для проведения экспериментов по инактивации вирусов облучением необходимо получить количественную оценку активности вируса. Поскольку вирусы нельзя разводить на искусственной среде, определение их активности связано с заражением соответствующих восприимчивых организмов, и потому методы определения различны для растительных вирусов животных вирусов и бактериофагов. В случае бактериофагов количественная оценка наиболее точна. Для оценки используется следующий метод. На пластинку твердой питательной среды, подходящей для роста данных бактерий, наносится капля суспензии, содержащая несколько миллионов этих организмов, и определенного размера капля суспензии фага. С помощью стеклянного шпателя жидкость равномерно распределяется по поверхности питательной среды. После инкубации густо засеянной бактериями пластинки на ее поверхности образуется сплошная бактериальная пленка со светлыми участками в местах размножения отдельных частиц фага, которые вызывают лизис бактерий в непосредственной от них близости. Эти светлые участки, или стерильные пятна , хорошо различимые невооруженным глазом, показаны на рис. 14, б. Количество стерильных пятен пропорционально концентрации фага (если она не избыточна, что приводит к слиянию отдельных стерильных пятен) и немногим меньше числа частиц фага, нанесенных на пластинку (Эллис и Дельбрюк, 1938, полагают, что отношение равно 1 2). [c.87]

    Заключается этот метод в следующем густую суспензию растущих бактерий заражают соответствующим количеством фага, инкубируют несколько минут, чтобы дать большинству фаговых частиц возможность адсорбироваться на бактериальных клетках, и разводят питательной средой в Ю —10 раз. Разведенную культуру продолжают инкубировать время от времени из нее отбирают пробы, высевают их на чашки с чувствительными индикаторными бактериями и подсчитывают образующиеся стерильные пятна, чтобы определить число инфекционных единиц в культуре. Описание и результаты типичного опыта такого рода представлены на фиг. 130. [c.259]

    Только после завершения латентного периода и выхода фага из клет ки-хозяина в окружающую среду каждая из фаговых частиц способна образовать на поверхности агара особый инфекционный центр. Термин инфекционный центр применяется для обозначения единицы, которая образует одно стерильное пятно. Следовательно, инфекционный центр может представлять собой либо отдельную свободную фаговую частицу, либо зараженную фагом клетку. [c.261]

    Изучение генетики бактериальных вирусов могло бы начаться в 1936 г., когда Ф. М. Бернет опубликовал статью, в которой сообщалось, что фаги могут давать мутантов, стерильные пятна которых отличаются [c.278]

    Ф и г. 140. Морфология нормального стерильного пятна дикого типа Т2г<-и вариантного стерильного пятна Т2г (быстро лизирующий мутант). [c.278]

    На этой чаш ке видны также крапчатые стерильные пятна, характерная морфология которых обусловлена одновременным ростом фагов 12г и Т2г в одном и том же инфекционном центре [c.278]

    Хотя признак г сыграл фундаментальную роль в развитии генетики фагов, его истинная физиологическая природа до сих пор не вполне понятна. Известно, однако, что мутный ореол стерильного пятна дикого [c.279]

    Если чашку с агаром, засеянную примерно 10 Tto -мутантами Е. соН, заразить несколькими сотнями частиц фага Т2 дикого типа, то стерильных пятен не образуется, поскольку эти фаги не могут развиться на культуре штамма Tto . Если же на чашку со штаммом Tto вместо нескольких сотен посеять несколько миллионов частиц Т2, то, как правило, мы все же обнаружим несколько стерильных пятен. Фаги одного из этих редких пятен, образовавшихся на газоне бактерий, можно собрать и очистить. При пересеве этих фагов на чашки, засеянные либо штаммом Tto либо штаммом Tto , обнаруживается, что число стерильных пятен в обоих случаях примерно одинаково. Таким образом, отобранное стерильное пятно содержало [c.280]

    Культуру экспоненциально растущих бактерий облучают оптимальной дозой ультрафиолета, которая приводит к индукции вегетативного размножения фага больше чем в 90% клеток. Облученную культуру продолжают инкубировать и определяют ее мутность (в произвольных единицах на графике отложено в виде темных кружков) и титр инфекционных центров, или отношение числа частиц, образующих стерильные пятна, к числу облученных бактерий (на графике — светлые кружки). По оси абсцисс отложено время с момента облучения культуры. [c.336]

    Инфицирование клетки Е. соИ бактериофагом происходит следующим путем фаг впрыскивает свою ДНК через клеточную стенку в цитоплазму. Приблизительно через 20 мин после этого клетка лопается, и из нее выходит около 100 полностью готовых копий исходной вирусной частицы. Такая высокая скорость размножения позволяет проводить в пробирке в течение 20 мин генетические эксперименты, для которых потребовалось бы все население земного шара, если бы эти опыты проводились на людях. Главные принципы, лежащие в основе этого метода, были ясно изложены Бензером [130], который впервые составил карту тонкого строения гена. Частицы бактериофагов, подобно бактериям, можно посеять в чашке с агаром. Отличие заключается лишь в том, что агар должен содержать однородную суспензию бактерий, чувствительных к вирусу. В какой бы участок чашки ни попали вирусные частицы, они заражают какую-либо бактерию. Вокоре инфекция распространяется на соседние бактерии и в результате образуется стерильное пятно (рис. 15-20). Число основных вирусных частиц, содержащихся в суспензии, можно легко определить, сосчитав число стерильных пятен, образовавшихся в результате посева. [c.248]


    Изучение частот рекомбинаций между различными штаммами фагов вскоре показало, что некоторые сайты мутаций тесно сцеплены друг с другом. Рекомбинация между такими сайтами происходит редко. Другие же сайты сцеплены слабо друг с другом, и рекомбинации между ними происходят часто. Эта ситуация напоминает обнаруженную на много лет раньше ситуацию с генами плодовой мушки (дрозофилы)кукурузы и других высших организмов. Главная идея, на которой основано картирование хромосом любого организма, состоит в предположении, что частота реком- РИС. 15-20. Стерильные пятна, образованные бак- [c.249]

    Для внутривидового типирования (с целью определения источника инфекции и путей передачи) проводят пробу с сальмо-неллезными фагами выделенную культуру засевают газоном на питательный агар в чашке Петри, куда затем наносят по 1 капле типовых фагов, подсушивают и инкубируют при 37 °С 18 — 20 ч. Наличие лизиса культуры ( стерильного пятна в газоне роста) позволяет определить принадлежность выделенного штамма к определенному фаговару. Совпадение фаговаров у штаммов данного вида свидетельствует об общности их происхождения. [c.147]

    Методика та же, что и приведенная в подписи к фиг. 130, за исключением того, что здесь через разные промежутки времени после заражения из ППРФ отбирали пробы, разводили их в 20 раз лизи-рующей средой, содержащей 4-1 0 частиц фага Т6 на 1 мл и О, 01 М раствор K N, и оставляли в этой реде не меньше чем на 30 мин после этого брали пробы и наносили их на агар, засеянный штаммом Е. соИ, устойчивым к фагу Тб (Т =х ), на котором может образовывать стерильные пятна только фаг Т4 (но не Тб). / — кривая внутриклеточного размножения // — опыт с одиночным циклом размножении. [c.261]

    Чувствительность к диагностическим фагам выявляют путем нанесения на чашку с культурой холерных фагов С и Эль-Тор, цельных и в 10-кратных разведениях. Фаг С активен только в отношении классического холерного вибриона, а фаг Эль-Тор — в отношении биовара Эль-Тор. Наличие лизиса в виде одного стерильного пятна или группы мелких пятен на месте нанесения фага расценивают как положительный результат. [c.170]

    После инкубации в термостате из содержимого каждой колбы дополнительно делают разведения обычным мясо-пептонным бульоном. Разбавление должно быть таким, чтобы при высеве 1 мл из колбы № 3 (контроль титра фага) на чашках появлялось несколько десятков негативных колоний фага (стерильные пятна). В этой колбе, как отмечено выще, индикаторный фаг с учетом предварительного его разведения содержит в 1 мл несколько тысяч корпускул. Чтобы получить в конечном разведении несколько десятков корпус- кул фага в 1 мл, необходимо содержимое этой колбы развести еще в 100 раз (т. е. внести микропипеткой 0,1 мл содержимого в 9,9 мл бульона). Аналогичные разведения делают с содержимым остальных. [c.161]

    У бактериофагов особенно легко выявляются такие мутанты, которые связаны с приобретением или утратой способности поражать некоторые типы бактерий. Если, например, бактериальную культуру, расположенную на агаровой пластинке, покрыть суспензией фаговых частиц, которые, вообще говоря, не способны поражать данный бактериальный штамм, то с большей частью агаровой пластинки ничего не произойдет. Однако в некоторых местах можно будет обнаружить круглые светлые дыркл (стерильные пятна или бляшки), которые образовались вследствие того, что бактерии под действием фага подверглись лизису. Лизис в свою очередь был вызван тем, что произошла спонтанная мутация, в результате которой определенная фаговая частица и все ее потомки стали вирулентными. Этот новый штамм можно выделить, если взять фагов из того места, где обнаружено пятно. [c.257]

    Если эту очищенную РНК ввести в культуру клеток Es heri hia oli Q13 Hfr на поверхности агара, то на нем образуются уже известные нам стерильные пятна это означает, что фаговая РНК заражает бактерии (предварительно пришлось удалить прочные оболочки бактериальных клеток — в противном случае голая РНК не смогла бы проникнуть внутрь ведь целые фаговые частицы содержат специальный фермент, который растворяет оболочку). [c.396]

    К лизогении Тем, что стерильные пятна, образуемые при высеве умереппых фагов на чашках Петри, оказываются мутными не все бактерии в просветленной зоне подверглись лизису, часть из бактерий при заражении фагом перешли в лпзогепное состояние. [c.383]

    Область хромосомы с прямо относится к способности бактериофага X образовать профаг. На генетической карте изображены положения несколькнх характерных мутантов фага с утраченной или уменьшенной способностью к лизогенизации. Таковы мутант с ( lear — светлый) и мутант со (от слова кокарда), дающий светлые стерильные пятна, но с небольшим мутным кружком в центре. В области с находятся цистроны, управляющие синтезом ряда бел- [c.383]

    Уже в самых первых своих опытах с фагом Д Эррель наблюдал на плотном газоне бактериального роста на поверхности питательного агара стерильные пятна- , или бляшки. Он установил, что такие стерильные пятна представляют собой участки, где бактерии были разрушены колониями бактериофага, развившимися из родительских фаговых частиц, присутствовавших в бактериальном инокулуме. Д Эррель понял, что образование таких легко распознаваемых стерильных пятен может служить для определения числа инфекционных единиц, содержащихся в суспензиях фага. Поэтому он разработал след ющий метод подсчета стерильных пятен, который широко используется и сейчас на поверхность твердого слоя питательного агара в чашке Петри наносят примерно 10 клеток бактерии-хозяина и суспензию фага в соответствующем разведении, которую необходимо протитровать, и чашку инкубируют. [c.254]

    Каждое стерильное пятно порождается одной фаговой частицей, а не совместным действием двух или нескольких частиц (что теоретически вполне можно было бы допустить). Это подтверждается тем, что число стерильных пятен, образующихся на любой чашке, прямо пропорционально объему суспензии данного бактериофага, смешанной с суспензией бактерий. На фиг. 125 приведены результаты опыта, в котором одинаковые опъемы одного и того же фаголизата с постепенно возрастающей концентра- [c.254]

    Ф и г. 124. В чашке Петри иа газоне бактерий Е. oli видиы стерильные пятна, образованные фагом Т2. [c.254]

    Один из первых таких мутантов был обнаружен Херши, который заметил, что на каждые 10 или 10 стерильных пятен, образуемых фагом Т2 на чашках с агаром, засеянных клетками Е. oli, приходится одно пятно, довольно четко отличающееся от обычных стерильных пятен, у которых небольшой прозрачный центр окружен мутным ореолом. Эти редкие (вариантные) стерильные пятна имеют крупный прозрачный центр и четкие края (фиг. 140). Когда Херши отобрал материал из этого необычного стерильного пятна, выделил и повторно посеял содержащиеся в нем фаговые частицы, он обнаружил, что все они образуют вариантные стерильные пятна с той же морфологией, что и у исходного пятна. Иными словами, фаги исходного вариантного стерильного пятна размножаются в чистоте. Таким образом, появление вариантного стерильного пятна означает, что в культуре присутствует мутант фага Т2, который в процессе роста стерильного пятна дает начало мутантной линии. Этот мутантный фаг обладает наследственно закрепленной способностью образовывать стерильные пятна, которые по внешнему виду отличаются от стерильных пятен нормального фага, или, как его иначе называют, фага дикого типа. [c.279]

    Херши назвал вышеописанный мутант быстро лизирующим мутантом или г-мутантом (от английского rapid — быстрый) и в соответствии с номенклатурой классической генетики обозначил символом дикий тип, т. е. нормальный, не быстро лизирующий фаг Т2, образующий обычные стерильные пятна. Поскольку в дальнейшем те, кто занимались изучением фагов, следовали примеру Херши, знак плюс над символом какого-либо мутантного признака означает теперь в генетике фагов, как и в классической генетике, что мы имеем дело с диким типом, который не обладает рассматриваемым признаком. Важно, однако, помнить, что в генетике бактерий, которая начала развиваться примерно в то же время и даже при участии тех же исследователей, была принята другая система обозначений. В генетике бактерий для обозначения гена, контролирующего какой-либо признак, и для обозначения соответствующего фенотипа используются разные символы. Знак плюс над символом фенотипа означает, что рассматриваемая особь обладает данным признаком. Например, как мы видели в гл. V, символ La + означает, что данный штамм бактерии способен сбраживать лактозу. Для штамма, лишенного этой способности, используется символ La . К сожалению, в дальнейшем нам придется пользоваться обеими системами. Поэтому мы призываем читателя быть внимательным и не забывать, это знак плюс имеет диаметрально противоположное значение в зависимости от того, к чьим генетическим признакам он относится — бактерии или фага. и- [c.279]

Фиг. 141. Стерильные пятна, образованные смесью фага днкого типа Т2Л+ и его мутанта Т2/г на чашке, засеянной смешанными индикаторами Tto - - Tto . Фиг. 141. <a href="/info/103841">Стерильные пятна</a>, <a href="/info/1424803">образованные смесью</a> фага днкого типа Т2Л+ и его мутанта Т2/г на чашке, засеянной смешанными индикаторами Tto - - Tto .
    Можно выделять фаги не только с одним мутантным признаком. С помощью двух последовательных этапов можно отобрать множественные мутанты, несущие в своем геноме несколько мутантных признаков, отличающих их от дикого типа. Например, можно, исходя из фагаТ2 дикого типа, отобрать сначала /г-мутант, высевая фаг в высокой концентрации на культуру штамма Tto , а затем выделить из популяции мутантов с измененным спектром литического действия фаговую частицу, дающую стерильное пятно типа г. Такой фаг обладает генотипом Т2/гг и [c.282]

    За 15 лет, прошедших с тех пор, как впервые удалось выделить мутантные фаги ruh, было идентифицировано много других мутантов Т-четных фагов. С помощью этого набора мутантов оказалось возможным настолько повысить разрешающую способность генетического анализа, что в конце концов удалось заполнить разрыв между химией ДНК и структурой гена (гл. XIII). Тем не менее стало ясно, что все эти мутации затрагивают только относительно малую часть всего генома фага. Причина этого совершенно очевидна большинство генов фага, несомненно, кодируют белки, осуществляющие жизненно важные функции, так что мутации по этим генам неизбежно должны быть летальными. Несмотря на очевидность этого обстоятельства, долгое время никому не приходило в голову применить к Т-четным фагам остроумный метод, разработанный Горовицем и Лейпольдом для нолучения мутантов по жизненно важным генам Е. oli. Этот метод состоит в отборе чувствительных к температуре мутантов (см. гл. V). Наконец, в 1960 г. Эдгар и Эпштейн выделили /s-мутанты фага Т4, которые совершенно не образуют стерильных пятен при 42 °С, но образуют их при 25 °С. В то же время штамм дикого типа T4/s образует стерильные пятна при обеих температурах одинаково хорошо. Изучение физиологии размножения /х-мутантов при повышенной, запрещающей температуре показало, что у разных мутантов блокированы разные стадии развития фага. Так, у /s-мутантов одного класса при запрещающей температуре репликация фаговой ДНК не может начаться вследствие того, что при 42 °С у них не могут функционировать те или иные ранние ферменты, участвующие в метаболизме нуклеотидов — предшественников ДНК у /s-мутантов другого класса при запрещающей температуре синтез ДНК начинается, блокируются же более поздние стадии. Возникают, например, мутации в гене, кодирующем фаговый лизоцим. Бактерии, зараженные такими мутантами, не лизируют при 42 °С, хотя и содержат инфекционные частицы потомства фага. Были также найдены мутации во многих генах, кодирующих структурные компоненты фага в бактериях, зараженных любым из таких мутантов, при 42 °С не происходит сборки целых частиц зрелого фага. В этом случае лизаты содержат различные типы недостроенных компонентов фага. Если мутация затрагивает ген, кодирующий белок головки фага, лизат, полученный при высокой температуре, содержит целые фаговые отростки, но не содержит головок. Когда мутация затрагивает ген, кодирующий фибриллы отростка, у почти завершенных фаговых частиц имеется головка и присоединенный к ней отросток, но отсутствуют фибриллы, необходимые для присоединения к клетке-хозяину. [c.283]

    Кроме того, доля таких рекомбинантов дикого типа (г+) меньше доли как рекомбинантов hr, так и h r , возникающих в скрещивании h х г7. Это показывает, что г13 располагается к г7 ближе, чем h, и исключает возможности 2 и 3. В процессе обмена, приводящего к образованию дикого типа (а" ), образуется также и двойной мутант г13г7, но последний не так легко выявить, поскольку фенотипически он ничем не отличается от единичного г-мутанта, т. е. так же, как и он, образует стерильное пятно типа г. В скрещиваниях г7 х г7 и г13 X г13, разумеется, не образуется рекомбинантов г+, так как никакие рекомбинационные акты между двумя геномами с г-мутациями в точно соответствующих, аллельных участках ке могут привести к образованию фагового генома, который содержал бы только г -локусы. Это позволяет идентифицировать двойной мутант г13г7, так как он в противоположность единичным мутантам не дает рекомбинантов ни в скрещивании с г7, ни в скрещивании с г13. Аналогичные исследования по картированию семи других неаллельных / -мутантов (от г2 до г8) показали, что все они тесно сцеплены с г7. Эта группа мутаций образует класс г11, который будет подробно рассмотрен в следующей главе. [c.290]

    Бензер решил установить, не обусловлен ли фенотип гП-мутантов из его коллекции повреждениями более чем в одной функциональной единице. То обстоятельство, что два г11-мутанта при разнообразных экспериментальных условиях проявляют один и тот же фенотип, само по себе вовсе не гарантирует, что соответствующие мутационные изменения затрагивают одну и ту же функциональную единицу. Мы уже упоминали, например, что стерильные пятна типа г на обычных штаммах Е. соИ образуются при разных мутациях, удаленных друг от друга настолько сильно, что вряд ли они затрагивают одну и ту же функциональную единицу. И если разные гП-мутанты неспособны размножаться на непермиссивных штаммах К, то это не обязательно означает, что всем им свойствен один и тот же функциональный дефект генетического материала. Для выяснения принадлежности двух различных мутаций гП к одной и той же функциональной единице Бензер воспользовался так называемым цис-транс-те-стом, или тестом на комплементарность (фиг. 153), приспособив его для-работы с фагами. Этот тест был разработан ранее применительно к высшим организмам стой же целью, т. е. для изучения природы функциональной единицы. Комплементационный тест Бензера был основан на том, что на штамме К, зараженном одновременно гИ-мутантом и фагом дикого типа г, оба типа размножаются нормально. Это означает, что нормальный ген родительского фага дикого типа способен обеспечивать функцию, необходимую для размножения на штамме К не только фага дикого типа, но и дефектного гП-мутанта. На языке генетики можно сказать, что при смешанном заражении штамма К двумя фагами ген дикого типа г доминирует над мутантным аллелем гН. В тесте на комплементарность клетки штамма К заражают двумя гИ-мутантами (каждый из которых в одиночку не способен размножаться на штамме К), чтобы выяснить, смогут ли они при смешанном заражении помогать друг другу и образовывать инфекционное потомство. Если два мутанта способны к такому совместному размножению, то это означает, что две мутации этих мутантов локализованы в разных функциональных единицах фагового генома. Неспособность одного из мутантов размножаться на штамме К (иными словами, его фенотип гН) свидетельствует о том, что этот мутант неспособен осуществлять какую-то определенную функцию или вызывать синтез какого-то определенного белка, необходимого для размножения фага в зараженной клетке. Фенотип гП второго мутанта также свидетельствует о неспособности осуществлять какую-то необходимую функцию, но только другую, т. е. [c.310]

    От такого скрещивания двух фа гсв с фенотипом получаются рекомбинанты гИ, образующие характерные стерильные пятна типа г на пермис-сивном штамме . соН и неспособные размножаться на штамме К. Эти рекомбинанты представлены двумя типами один тип несет исходную мутацию F O, а другой — новую мутацию гП, супрессорную в отношении F O. (При скрещивании истинного ревертанта с фагом дикого типа Т4г+ такие рекомбинанты г образовываться, конечно, не должны.) Расположение супрессорных мутаций относительно мутации F O можно установить с помощью построения карт тонкой структуры гена. На фиг. 161 (ли- [c.329]

    Каждая из таких супрессорных мутаций является вместе с тем и мутацией гП, а поэтому можно изучить их реверсию к дикому типу г так же, как это делалось для мутации F O. Обнаружилось, что эти супрессорные мутанты, подобно мутантам F O, обычно не ревертируют к истинному дикому типу г. Вместо этого вновь образуются двойные супрессированные мутанты, способные размножаться на штамме К- Линии III я IV на фиг. 161 показывают расположение ряда мутаций г11, выделенных в качестве супрессора к двум супрессорам F 9 и F 7. Видно, что эти вторичные супрессорные мутации также происходят вблизи исходного мутантного участка F O в гене rllB. Точно таким же образом можно выделить и супрессоры к супрессорам супрессоров. Так было выделено в общей сложности около 80 независимых мутаций rll (включая мутацию F O), каждая из которых является супрессором некоторых других мутаций в том же наборе и располагается на сравнительно небольшом участке гена гПВ. Следует, однако, иметь в виду, что двойные мутанты, несущие мутацию и ее супрессор (и, следовательно, способные образовывать стерильные пятна па штамме К), образуют на обычном штамме Е. oli стерильные пятиа различных типов. Часть этих стерильных пятен почти или совершенно не отличается от пятен истинного дикого типа, тогда как мутантный характер других распознается легко и они довольно сильно напоминают стерильные пятна типа г. [c.330]


Смотреть страницы где упоминается термин Стерильные пятна: [c.142]    [c.488]    [c.154]    [c.367]    [c.373]    [c.386]    [c.238]    [c.255]    [c.260]    [c.280]    [c.305]    [c.305]    [c.332]   
Молекулярная генетика (1974) -- [ c.254 , c.255 , c.279 , c.281 , c.282 ]




ПОИСК







© 2025 chem21.info Реклама на сайте