Оператор фага X

В качестве примера рассмотрим три системы регулируемой экспрессии рекомбинантных генов в клетках Е. соН, которые получили широкое распространение. В одном случае для контроля экспрессии клонированных генов используют хорошо изученную систему регуляторных элементов лактозного оперона [123], в другом - систему промотор-репрессор-оператор фага [124], в третьем - промоторы и РНК-полимеразы бактериофагов [125]. Принцип регуляции экспрессии рекомбинантных генов в первых двух случаях один и тот же. В векторные молекулы вводятся регуля- [c.108]

В составе комплекса репрессора с оператором фага 434 два N-концевых домена связываются с одним операторным участком, который в данном случае имеет длину 14 пар оснований. Узнающая спираль каждого из доменов встраивается в большой желобок, а предшествующий участок а-спирали располагается поперек него. В целом структуры N-концевых доменов репрессора 434 и X на удивление сходны. Так, а-спиральные участки 2 и 3 репрессоров X и 434, образующие универсальный [c.119]

Два оператора фага лямбда содержат рад участков связывания репрессора [c.122]

Блокируя эти операторы, репрессор предотвращает синтез ферментов, необходимых для исключения ДНК фага Л, из бактериальной хромосомы, а также для репликации и транскрипции остальных генов. [c.260]

Если фаг индуцирован и размножается, появляется другой белковый регулятор, именуемый RO, выключающий ген Х-ре-прессора. И Х-репрессор, и RO при своем действии связываются с одним и тем же участком Х-ДНК, называемым правым оператором (Он). Происходит переключение Он на действие первого или второго гена, что показано схематически на рис. 8.22. Молекулярный механизм переключения сводится к движению РНК-полимеразы вправо или влево вдоль ДНК фага. [c.300]

Симметричная структура операторов и субъединичное строение репрессоров позволили предположить, что с каждым из симметричных участков оператора взаимодействует одиа из субъединиц соответствующего репрессора. Исследование доступности для различных химических реагентов участков оператора в комплексе с репрессором и в свободном состоянии показало, что основное взаимодействие происходит только с одной стороны двойной спирали ДНК и осуществляется через группы оснований, выходящих в большую бороздку. Эти представления в совокупности с данными рентгеноструктурного анализа ДНК-связывающего N-концевого домена с1-репрессора фага и сго-белка, которые удалось получить в кристаллическом состоянии, легли в основу построения моделей комплексов репрессоров с операторами. [c.399]

Было высказано предположение [2178], что d -кластеры являются указателями начала транскрипции (промоторные участки оперонов) с ними связывается РНК-полимераза, содержащая о-белок. Однако детальное исследование топографии ДНК фага % [724] показало, что положение d -кластеров не совпадает с положением промоторов, операторов или участков [c.22]

Следовательно, в основе обычного механизма репрессии лежит связывание репрессора с оператором, перекрывающего, по крайней мере частично, последовательность, которая должна узнаваться РНК-полимеразой. Перекрывание не всегда происходит в одной и той же области промотора. Например, у фага лямбда оператор лежит в области, расположенной слева от промотора (гл. 16). Однако общий принцип сводится к тому, что связывание репрессора с оператором мещает РНК-полимеразе подойти к своему промотору, что препятствует инициированию транскрипции. [c.182]

Присутствие репрессора объясняет явление иммунитета. Если в лизогенную клетку проникает вторая молекула ДНК фага лямбда, белок-репрессор, синтезируемый геномом ранее интегрированного фага, будет немедленно связываться с операторами 0 и Ок нового генома. Это препятствует вступлению второго фага в литический цикл. [c.213]

Что касается литического цикла, то белок Сго подавляет (хотя и не полностью элиминирует) выражение ранних генов. Его неполный эффект объясняется тем обстоятельством, что сродство этого белка к операторам Ок 1 и Ок 2 примерно в восемь раз ниже сродства репрессора. Этот эффект Сго не проявляется до тех пор, пока функционирование ранних генов не становится более или менее излишним из-за присутствия рО. К этому времени начинается выражение поздних генов фага, и процесс сосредоточивается на образовании потомства фаговых частиц. [c.218]

Фаг 434 кодирует репрессор, специфичность которого отличается от специфичности репрессора фага Х он связывается с операторами фага 434, но не X, репрессор же фага X, напротив, не может узнавать операторы фага 434. Область иммунности, выявленная в экспериментах с гибридными фагами Х-434, включает ген с1 и, как мы теперь знаем, ген его, а также левые и правые операторы и промоторы. Тот факт, что гены сП и сП1 не входят в область иммунности, означает, что белки СП и III фага X способны включать ген с1 фага 434, и в свою очередь белки СП и СП1 фага 434 могут включать ген с1 X. [c.87]

Рис 4 6 Специфическое связывание Х-репрессора с ДНК фага X Этот эксперимент показывает, что Х-репрессор связывается с ДНК фага X, но не с ДНК Хтт Аналогичным образом репрессор фага 434 связывается с ДНК фага Хтгп , но не с ДНК фага X Поскольку эти две ДНК различаются только областью иммунности, репрессоры связываются с участками, расположенными именно в этих областях Как показали дополнительные эксперименты. ДНК, выделенная из фага Xvir, связывает Х-репрессор гораздо слабее, чем ДНК фага X дикого типа Это подтверждает, что репрессор связывается с операторами фага X, выявленными генетическими методами [c.92]

Идея его состояла в том, чтобы заменить аминокислотные остатки, расположенные на наружной стороне узнающей спирали репрессора 434, остатками, которые занимают аналогичные положения в другом репрессоре - фага Р22, инфицирующего Salmonella. При этом аминокислотные остатки на внутренней стороне спирали оставались прежними. Что считают наружной, а что внутренней сторонами узнающей спирали, разъяснено в гл. 2. Мы надеялись, что гибридная цепочка аминокислот образует а-спиральный участок, который займет нормальное положение относительно остальной части молекулы репрессора 434 и будет взаимодействовать с оператором фага Р22, но не фага 434. Обычные репрессоры фагов Р22 и 434 не обладают никаким сродством к чужим операторам ни in vitro, ни in vivo. Операторный участок Р22 имеет длину 22 пары оснований последовательность участка Or 1 фага Р22 представлена вместе с последовательностью оператора 434 на рис. 4.25. [c.120]

Удивительный результат этого эксперимента состоял в том, что новый белок связывался с операторами Р22, но не с операторами фага 434 как in vivo, так и in vitro. Поэтому клетки, содержавшие этот белок, были устойчивы к заражению фагами Р22, но не 434, а очищенный белок связывался с тремя участками 0 фага Р22 с таким же сродством и в том же порядке, как и репрессор фага Р22 дикого типа. Этот эксперименг доказывает, что все структурные элементы специфичности, по которым различаются два репрессора, сосредоточены только на наружной стороне узнающих спиралей. [c.122]

Ответ на вопрос о том, почему гены фага X могут в течение определенного времени не проявлять себя, был дан после того, как был обнаружен реирессорный белок [159, 161. Один короткий оперон про-фага % постоянно транскрибируется РНК-нолимеразой Е. соИ. Этот оперон содержит refibi l и rex. Как показано на рис. 15-22, считывание этих генов начинается с 1-иепей ДНК профага. Белок, кодируемый геном с1, играет роль репрессора. Репрессор представляет собой олигомер (чаще всего димер), мол. вес одной субъединицы в котором составляет 27 ООО. Этот белок связывается с двумя операторными участками ДНК профага. Один оператор (о ,) расположен слева, а дру- [c.259]

Для транскрипции многих генов и последующей трансляции их мРНК с образованием соответствующих белков необходимо участие промотора и оператора, которые указывают место, в котором РНК-полимераза связывается и начинает транскрипцию (разд. 29.27) в противном случае нельзя ожидать, что встроенный в реципиентную клетку чужеродный ген обязательно будет транскрибироваться и транслироваться. Чтобы обеспечить транскрипцию встроенного гена, часто приходится помещать этот ген в участок ДНК плазмиды или фага X, расположенный следом за промотор-оператор-ной областью. Например, ген можно встроить в участок ДНК Е. соИ, содержащий ia -onepoH, так, чтобы этот ген следовал за промотор-операторной областью этого оперона (разд. 29-27). Если поместить клетки Е. соИ, несущие такую рекомбинантную ДНК, в среду с лактозой, но без глюкозы, то встроенный ген будет транскрибироваться и транслироваться вместе с участком ДНК /ас-оперона, расположенным между оператором и встроенным геном. [c.987]

ДНК этого фага, помимо совокупности структурных генов, обеспечивающих осуществление интегральной функции репродукции, содержит в своем составе ген-регулятор и ген-оператор, обеспечивающие интегральную функцию репрессии (блокировки) генетической информации [5, 6]. Интегральная функция репродукции может осуществляться только при условии функциональной полноценности отдельных структурных генов. Если нарушается функциональная полноценность хотя бы одного структурного гена, то нарушается и вся интегральная функция репоодукции. [c.168]

Для выяснения этого вопроса Фрадкин избрал удобную биологическую модель — умеренный фаг Л,, геном которого, помимо совокупности структурных генов ( программирующее устройство ), содержит в своем составе ген-регулятор и ген-оператор ( управляющее устройство ). [c.189]

Так как в силу условий устойчивости ( > О [3]) матрицы операторов Са являются невыроаденными, уравнение (7) устанавливает взаимнооднозначное соответствие между изменениями составов фаз и при изменении состояния гетерогенной системы. Действительно, заданным изменения давления, температуры и состава одной из фаз будет соответствовать вполне определенюе (уравнением (7)) изменение состава другой, фагы. [c.49]

Область, включающая левый и правый операторы, ген с1, кодирующий репрессор, и ген его, кодирующий другой регуляторный белок, определяет иммунитет фага. Это значит, что любой фаг, обладающий такой областью, проявляет тот же тип иммунитета, так как эта область определяет репрессорный белок и сайты, на которые действует репрессор. Поэтому она получила название области иммунности. Если мы говорим, что лизогенизирую-щий фаг вызывает иммунитет к любому другому фагу того же типа, мы имеем в виду, что иммунитет проявляется к любому другому фагу, имеющему ту же область иммунности (безотносительно от различий в других областях). [c.213]

Переход ДНК фага лямбда из одного жизненного цикла в другой включает два типа событий. Во-первых, способ выражения генов регулируется, как описано в гл. 16. В период лизогении устанавливается и поддерживается репрессия операторов во время литического цикла репрессия отсутствует. Во-вторых, физическое состояние ДНК различно в лизогенном и литическом состояниях взаимопревращение этих состояний обеспечивается сайтопецифической рекомбинацией. [c.453]

В первых экспрессирующих плазмидах для запуска транскрипции использовали сильные метаболические irp- или /ас-промоторы (рис. 4.1), а рекомбинантный ген встраивали за участком промотор-оператор. Однако при использовании систем метаболической регуляции, контролирующих работу этих оперонов, было обнаружено, что экспрессия плазмидных генов была скорее конституитивной, чем контролируемой [6], и в результате при выращивании клеток плазмиды утрачивались. Экспрессия контролируется лучше при использовании плазмид с терморегулируемой системой транскрипции [4], содержащих такие промоторы, как Pr и Pl, полученные из фага Я. Контроль работы таких промоторов может осуществляться температурочувствительным продуктом гена Я-репрессора с /ssz, денатурирующим при температуре выше 37 °С. Плазмида, содержащая Рд-промотор фага Я, изображена на рис. 4.2. Другая особенность этого век- [c.96]

В переключении пути развития фага участвует область ДНК размером в S0 пар оснований, называемая правым операторо.м (Or) (рис, 41.6, А). Правый оператор фланкирован слева структурным геном репрессора фага лямбда, а справа — структурным геном другого регуляторного белка, называемого его. Единственным фаговым геном, экспрессирующимся при нахождении фаговой ДНК в составе хозяйской хромосомы, т.е. в состоянии профага, является ген репрессора. При литическом развитии ген репрессора не экспрессируется, но идет активная экспрессия гена сто, равно как и многих других фаговых генов. Таким образом, когда ген репрессора включен, ген его — включен, и наоборот, когда ген его включен, ген репрессора — выключен. Как мы увидим далее, эти два гена регулируют друг друга, что в конечном счете и определяет выбор между литическим и лизогенным путями развития фага X. [c.114]

В лизогенной бактерии, содержащей фаг X в состоянии профага, Х-репрессор связывается преимущественно с OrI, и при этом за счет кооперативных взаимодействий способствует связыванию другой димерной молекулы репрессора с участком Or2 (рис. 41.8). Из трех участков оператора наименьщим сродством к репрессору характеризуется участок Or3. Связывание репрессора с OrI приводит к двум основным эффектам. Во-первых, РНК-полимераза не может связаться с правонанравленным промотором, и, следовательно, сго-ген не экспрессируется. Во-вторых, как сказано выше, репрессорный димер, связавшись с 0 1, усиливает связывание другого ди- [c.115]

Смотреть страницы где упоминается термин Оператор фага X: [c.145] [c.145] [c.148] [c.410] [c.148] [c.399] [c.410] [c.169] [c.8] [c.488] [c.493] [c.493] [c.21] [c.211] [c.194] [c.115] [c.116] [c.116] [c.116] [c.170] [c.179] [c.180]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология