Распределительное равновесие, эксперименты

ДЛЯ экспериментов по распределительному равновесию были составлены выражения, куда вошли концентрации растворенного в жидко фазе вещества ша и его суммарная концентрация в [c.197]

Принимая во внимание, что суммарная концентрация доступных положений матрицы /пх должна быть рассчитана по экспериментальным данным, колоночная хроматография представляет собой простейший метод количественной аффинной хроматографии, поскольку найденное из эксперимента значение гпх затем будет использоваться в расчетах других экспериментов, выполненных на той же колонке с тем же растворенным веществом. Однако в некоторых примерах, особенно в случае биологических аффинных матриц, таких, как миофибриллы мышц [28], колоночный метод нельзя использовать из-за проблем, связанных со скоростью потока, поэтому в количественной аффинной хроматографии находят применение также эксперименты распределительного равновесия. [c.197]

Эксперименты по распределительному равновесию [c.200]

Вместо колоночной хроматографии можно провести серию экспериментов по распределительному равновесию, в которых [c.200]

К недостатку описанных выше распределительных экспериментов относится необходимость точного определения массы и, следовательно Уз [3], аффинной матрицы в каждой реакционной смеси. Хотя это требование не создает больших проблем при доступности матрицы в сухом виде, достоверность результатов нельзя гарантировать, если аликвота отбирается из концентрированной суспензии аффинной матрицы. Этой трудности иногда можно избежать, применяя рециркулирующую методику распределительного равновесия [18, 31], при которой жидкая фаза перемешиваемой суспензии аффинной матрицы и распределяющегося растворенного вещества анализируется спектрофотометрически при помощи проточной кюветы, помещенной в линию возвращения жидкой фазы в суспензию (рис. 2). Поэтому всю серию экспериментов по распределению можно провести с одной [c.201]

Результаты экспериментов по распределительному равновесию с системой сефадекс 0-100 — лизоцим — глюкоза [3] представлены на рис. 3, который относится к экспериментам с = = 4,44 мл и 1/о = 7,80 мл. В этих экспериментах гпз считалась равной так как полная концентрация фермента в жидкой фазе Ша несравнимо меньше (8,3 мкмоль/л), чем концентрация 8 глюкозы (0,17- 0,84 моль/л). Прежде всего из рис. 3,а виден линейный характер графика, построенного в обратных координатах, что указывает на правильность представления о лизоциме как о моновалентном растворенном веществе в данной системе этот вывод обоснован в том смысле, что глюкоза, подобно Ы-ацетилглюкозамину [3], конкурирует, вероятно, с полисахаридной матрицей за единственное активное положение молекулы фермента. Обработка графика (рис. 3,а) с помощью линейного peгpe иoJ нoгo анализа приводит к (1Н- [c.203]

Отношение v Vo можно определить взвешиванием полоски, сначала сухой, затем пропитанной водной фазой и высушенной до требуемой влажности и, наконец, полностью обработанной органическим растворителем. После этого можно рассчитать значение Яв из экспериментальных значений Нр, используя уравнение (10-68). Если концентрация свободного лиганда в водной фазе известна, то находят функцию Яв(о) и, следовательно, константы устойчивости. Таким методом были определены значения р для ряда кислотно-основных равновесий при использовании водных буферных растворов с известной концентрацией ионов водорода в качестве стационарной фазы [14, 79]. В принципе, распределительную хроматографию можно было бы применить и к другим типам систем при условии, что во время эксперимента можно поддерживать концентрацию свободного лиганда постоянной, т. е. Мв-СЛ1а, и что ни одна из форм Н А(/>0) лиганда не распределяется. Однако часто бывает трудно получить надежные значения Яр. Поэтому метод менее точен и в общем меньше применяется, чем метод экстракции растворителями, но он может быть полезным, если располагают лишь очень малыми количествами В. [c.286]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология