Изолированная ДНК вектора

Как видно в уравнении (II, 7) имеется, в отличие от уравнений непрерывности, добавочный член 0, выражающий возникновение энтропии внутри области. Все уравнение читается так скорость роста энтропии в данном объеме равна разности между скоростью возникновения энтропии в данной области и скоростью оттока энтропии из области. Разумеется, если векторы потока энергии и массы равны нулю на граничной поверхности, т. е. система изолирована, скорость роста энтропии в системе равна просто интегралу J Qdv и обусловлена необратимыми процессами внутри системы. Следует обратить внимание [16], что величина 0 обращается в нуль, если становятся равными нулю градиенты химического потенциала и температуры. Именно эти градиенты обусловливают развитие процессов, связанных с ростом энтропии. [c.23]

Практически все описанные выше методы основаны на способности эукариотических клеток интегрировать инъецированную ДНК в случайные сайты генома. Однако нередко оказывается более удобным. а иногда и необходимым введение новой генетической информации в определенные хромосомные сайты. До недавнего времени это удавалось осуществить лишь у дрожжей (разд. 5.6.в). Теперь благодаря конструированию специфических векторов. которые рекомбинируют с гомологичными последовательностями хромосом млекопитающих, здесь был достигнут значительный прогресс. Используя эти методы в сочетании с технологиями, позволяющими изолировать нужные клетки и вводить их в ранние мышиные эмбрионы, можно получать животных, несущих специфические мутации в определенных генах, или элиминировать мутации из дефектных генов. [c.368]

Каждая из хромофорных систем (А и Б) имеет свои закономерности перехода в возбужденное состояние. Для серий соединений П1 и IV наличие сильной электроноакцепторной нитрогруппы и простой связи или электронодонорного кислородного мостика приводит к значительному разделению зарядов для обеих хромофорных систем, выражающееся в четком разделении р - и р"-полос поглощения, т. е. наибольшей квазиавтономии (табл. 3). Для остальных серий соединений (V—XI, табл. 3) квазиавтонокия хромофорных систем уменьшается. Известно, что серии соединений III и IV обладают значительной ако-планарностью структур. Поэтому в этих соединениях казалось бы не должно быть единого вектора возбуждения и, следовательно, мостик должен изолировать электронную плотность нитрофенилена от влияния заместителя другого бензольного кольца. Однако этого не наблюдается при выяснении проводимости мостиковых звеньев корреляцией значений р - и р"-полос поглощения хромофорных систем (А и Б) [c.129]

Предельный диффузионный поток на шар I запишем в виде /=/о+/ь где /о — предельный диффузионный поток на шар в покоящейся жидкости, а /i — изменение предельного диффузионного потока, вызванное действием внешнего ускорения g. Так как (6.73) пропорционально OS0, то суммарный диффузионный поток на весь шар не меняется. В этом случае для получения линейного отклика по g шар следует разделить тонкой изолирующей прослойкой вдоль плоскости, проходящей через центр шара и перпендикулярно вектору gf. Изменение предельного диффузионного потока на верхнюю часть шара определяется выражением [c.252]

Для получения Fv-фрагментов антител с помощью бактериофага вначале кДНК для Vh- и VL-областей, синтезированную с использованием В-клеточной мРНК, амплифицируют методом полимеразной цепной реакции. Затем эти гены соединяют линкером, получая ген для Fv-фрагмента. Такой ген трансфицируют в бактерии (Е. со//), используя фазмидный вектор, содержащий лидерную последовательность и фрагмент гена, кодирующего белок оболочки фага М13. Далее, бактерии инфицируют фагом М13. Фаг реплицируется и экспрессирует на одном из своих полюсов Fv. Фаги нужной специфичности изолируют при помощи пэн-нинга на покрытых антигеном подложках и амплифицируют. Антигенспецифичные фаги можно использовать для инфицирования штаммов бактерий, обеспечивающих выделение Fv-белка в культуральную среду. [c.538]

TAR-клонирование способно сушественно ускорить выполнение программы Геном человека . Напомним, что анализ геномов начинается с создания банков генов отдельных хромосом, выделение которых является очень трудоемкой задачей. Оказалось, что с помощью TAR-векторов можно селективно клонировать ДНК человека из суммарной ДНК межвидовых гибридов соматических клеток (см. гл. 5). содержащих одну человеческую хромосому. Эта процедура позволяет обогащать человеческую ДНК в 3000 раз. Более того, на примере гена BR A2, мутации в котором с высокой вероятностью приводят к появлению рака молочной железы, была продемонстрирована эффективность TAR-клонирования и для выделения специфических последовательностей из геномной ДНК человека (Larionov et al., 1997) С этой целью был сконструирован кольцевой TAR вектор, который при линеаризации содержал на одном конце промотор гена BR A2, а на другом — его дистальную часть. Стандартные операции кольцевого TAR-клонирования позволили за неделю работы впервые изолировать этот ген из геномной ДНК. [c.361]

В настоящее время продолжает сохраняться значительная неопределенность в отношении учета возможных негативных последствий переноса генетического материала в организм пациента, а также оценки эффективности генной терапии. Поэтому международно признанным является, например, запрет на проведение испытаний методов генной терапии на половых клетках человека. Этим предотвращается передача потенциально неблагоприятных генетических изменений потомкам и их распространение в последующих поколениях. Следует, однако, учесть, что половые клетки не изолированы в организме, так что в принципе сохраняется вероятность воздействия на них векторов генетического материала и при генотерапии соматических клеток. [c.263]

Плазмидные векторы. Трансфицированные клетки высевают на агар таким образом, чтобы они были полностью изолированы одна от другой и каждая могла дать начало отдельной колонии. Обычно векторы содержат по крайней мере один селективный маркер, по которому проводится отбор трансфицированных клеток. Нри этом нетранс-фицированные клетки не могут образовывать колонии В используемой среде. [c.292]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология