Дансильный метод

Другими вариантами ступенчатой деградации являются комбинация метода Эдмана с дансильным методом [108 — 110], микроопределение на фильтровальной бумаге, тонкослойная хроматография на полиамидных слоих и конденсации с пентафторфенилизотиоцианатом. В противополож-носты-фенилизотиоцианату фторпроизводное допускает применение при газохроматографическом определении тиогидантоинов детектора с электронным захватом [111]. [c.370]

Дансильный метод, который разработали Грей и Хартли в 1963 г. [24], во многих отношениях сходен с динитрофторбензольным методом. Основной реагент в дансильном методе — диметиламино-нафтилсульфохлорид. Дансильная группировка присоединяется к тем же группам пептида, что и ДНФБ, но благодаря интенсивной флуоресценции дансильные производные могут быть обнаружены в очень малых количествах (до 10 мкмолей вещества). [c.39]

Долгое время единственным методом идентификации ДНС-ами-нокислот являлся метод микротонкослойной хроматографии. Были предложены разнообразные системы для разделения ДНС-амино-кислот с помощью одномерной и двумерной хроматографии на тонких слоях целлюлозы, силикагеля (рис. 6) и полиамида. Однако сейчас более перспективным методом идентификации ДНС-амино-кислот становится высокоэффективная обратнофаэовая жидкостная хроматография с использованием флуоресцентного детектора, позволившая повысить чувствительность дансильного метода до уровня 10 пмолей (рис. 7. 8). [c.38]

Дансильный метод — один из самых высокочувствительных, как для идентификации ДНС-аминокислот используется юкоэффективная жидкостная хроматография (см. 15.1) )луоресцентным детектированием. [c.351]

Деградацию по Эдману можно комбинировать с дансильным методом. При этом после отщепления концевого остатка определяют N-конец оставшегося пептида и воспроизводят последовательность, основываясь на данных.N-концевого анализа. [c.283]

После удаления N-кoнцeвoй аминокислоты пептида, анализируемого по методу Эдмана, N-кoнeц оставшейся полипептидной цепи можно определить дансильным методом. На следующем этапе отщепляют новую концевую аминокислоту и снова определяют N-конец остатка. Благодаря очень высокой чувствительности дан-сильного метода при наличии 0,1 мкмоля пептида можно с достаточной достоверностью идентифицировать 10—15 аминокислот. [c.284]

Дансильный метод основан на получении производных N-koh цевой а-аминокислоты при обработке дансилхлоридом и после дующем отщеплении при гидролизе н. хлороводородной кис лотой (105 °С, 12—16 ч). ДНС-амннокислоты обладают интен сивной флуоресценцией, позволяющей обнаруживать их в ни чтожно малых количествах. [c.350]

Хартли IHartley] Брайен (р. 1926). английский биохимик. Окончил университет в Лидсе (1947), с 1981 г.— директор Центре биотехнологии Лондонского уннверснтета. Известен работами по химии пептидов и белков, разработал (совместно с В. Греем) дансильный метод определения N-концевых амино-кислотиь х остатков. [c.38]

Современная методика использования стекол PG описана в работе [32]. Белок присоединяют за N-концевую аминокислоту к носителю, частично расщепляют бромоциаиом. Смесь пептидов смывают со стекла и анализируют их структуру дансильным методом с двойной радиоактивной меткой. Можно использовать и другие методы расщепления белка. [c.383]

Ни один метод картирования не дает абсолютно воспроизводимых результатов, и дансильный метод не составляет исключения. Хотя в повторных опытах с дансилированными триптическими гидролизатами общая картина повторяется, детальное сопоставление возможно только при параллельном анализе изучаемых белков. Необходимым контролем служит хроматография смеси различных дансилированных триптических гидролизатов, с помощью которой можно выявлять хроматографические аномалии и идентифицировать химически различные пептиды. [c.93]

Дансильный метод часто используется в сочетании с деградацией по Эдмаиу. После отщепления каждого аминокислотного остатка пробу с пептидом (аликвотную часть) подвергают действию дансилхлорида для выяснения (обычно с помощью тонкослойной хроматографии) природы следующего остатка. [c.175]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология