Низкоскоростные равновесные методы

НИЗКОСКОРОСТНЫЕ РАВНОВЕСНЫЕ МЕТОДЫ [c.112]

В следующих разделах описана в общих чертах теория каждого метода центрифугирования, а также следующие аппараты 1) низкоскоростная ультрацентрифуга, применяемая для определения кривых распределения коллоидных частиц, 2) высокоскоростная ультрацентрифуга с масляной иди воздушной турбиной для определения констант седиментации органических макромолекул, 3) равновесная ультрацентрифуга, применяемая для соединений с молекулярным весом порядка нескольких тысяч, и 4) препаративная воздушная центрифуга для выделения и очистки таких высокомолекулярных веществ, как вирусы. Для каждого аппарата описана методика проведения измерений, а также специальные области применения и примеры проведенных исследований. [c.463]

Равновесное центрифугирование — чрезвычайно эффективный метод, но проведение измерений занимает очень много времени. Даже при небольшой высоте столба жидкости для установления равновесного распределения вещества с мол. массой 5(Х) (XX) требуется день или два, а для вещества с мол. массой 50 (XX) — несколько часов. Многие исследователи предпочитают пользоваться результатами анализа низкоскоростных седиментационных измерений, не дожидаясь установления равновесия. Такого рода данные представлены на рис. 11.18 в промежуточные моменты времени. В 1947 г. Арчибальд, который много лет занимался поисками решений уравнения Ламма, заметил, что в области мениска и у дна ячейки уравнение потока имеет тривиальное решение для любого момента времени в течение всего седиментационного опыта. У мениска и на дне ячейки У2 должен быть равен нулю, потому что через эти поверхности не может происходить переноса вещества. Данный эффект не представляет интереса при больших скоростях ротора, так как в этом случае у мениска вообще не оказывается вещества, а на дне образуется плотный осадок. При малых скоростях, однако, приравняв нулю выражение для 2 [уравнение (11.4)], имеем [c.259]

Среди первых результатов, полученных при помощи ультрацентрифугирования, можно назвать определение молекулярной массы гемоцианина Helix pomatia, равной 4 930 000 [12]. Величина эта была получена с помощью низкоскоростного равновесного центрифугирования со скоростью 11 ООО об/мин (5400 g). А ведь значения молекулярной массы этого белка, полученные прежними методами, составляли всего лишь величину порядка 200 ООО, и это еще считалось очень большой величиной Центрифугу с редукторным приводом использовали также Сведберг и Фарес в 1926 г. для определения молекулярной массы карбоксигемоглобина [13]. Полученное ими значение составило 67 870, что хорошо согласовывалось с величиной 66 700, установленной Аде-ром [6, 7] методом осмотического давления для 10 различных гемоглобинов. Определение молекулярной массы гемоглобина, основанное на данных о содержании железа, давало минимальную величину 16 700. [c.23]

Л. Вид интерферограммы при использовании ячейки для искусственного образования границы. Количество полос, пересекаемых в направлении от растворителя к раствору, пропорционально концентрации раствора. В- Седиментациониая диаграмма, равновесного эксперимента с тонким слоем и при большой скорости вращения. Растворенное вещество полностью отошло от мениска. Каждая из набора параллельно смещенных полос в области Х — представ.пяет собой кривую смещения полосы (пропорционально концентрации) в зависимости от расстояния до оси вращения. Плато на кривой смещения в районе X отвечает нулевой концентрации растворенного вещества. Подобные седиментограммы характерны для высокоскоростного метода Ифантиса. В. Вид интерференционных полос в случае низкоскоростного равновесного эксперимента. Как и в случае В, кривые в области Х — У изображают смешение полос (пропорциональное концентрации) в радиальном направлении. Однако в отличие от случая Б концентрация в области мениска не равна нулю. В этом случае требуется дополнительное вычисление или эксперимент, чтобы определить положение, соответствующее нулевой концентрации. Буквами БЯ обозначены полосы, полученные от балансировочной ячейки (гл. П1). Слой растворителя несколько перекрывает слой раствора как слева, так и справа. Для образования четкой границы (мениска) около дна ячейки в случаях и В использован слой фторуглеродного масла [c.103]

А. Центрифугирование с искусственной границей снимок сделан в конце опыта. Б. Метод Ифантиса. В. Низкоскоростное равновесное центрифугирование. [c.105]

Ответ. Если вы имеете опыт обращения с ячейкой для искусственного образования границы, то низкоскоростной равновесный эксперимент по методу Черлвуда [c.233]

Этот метод, описанный Ла Баром [12], состоит в том, что в конце равновесного ультрацентрифугирования при малой скорости (без отрыва от мениска) на короткое время скорость вращения увеличивают, что приводит к уходу вещества из области мениска. Определение начала отсчета концентрации для концентрационной кривой на диаграмме Рэлея (в действительности кривой изменения коэффициента преломления) для низкоскоростных методов является проблемой, поскольку в этом случае на интерферограмме отсутствует область с нулевой концентрацией. Ла Бар показал, что вертикальное смещение вниз полос в области мениска за счет кратковременного вращения при большой скорости может дать недостающую информацию либо непосредственно, либо после расчета. На первый взгляд может показаться, что мы не получаем ничего нового по сравнению с методом Ифантиса (снижением концентрации вещества у мениска до нуля) [9], однако подход Ла Бара оправдан тем, что метод Ифантиса не позволяет использовать данные, относящиеся к области дна ячейки, где интерференционные полосы проходят очень круто, тогда как по Ла Бару для вычисления величины М , можно использовать интерферограмму, соответствующую любой точке раствора. Для систем, в которых происходит ассоциация частиц, этот метод также более приемлем. Высокоскоростная часть опыта кратковременна, так что эффект увеличения крутизны полос около дна ячейки несуществен до тех пор, пока это не мешает измерению их смещения. [c.114]