Бактериофаг нитевидный

Рис. 4.8. Различные формы бактериофагов (А-Г) и геометрические формы головок фагов (Д, Е). А. Нитевидная форма (колифаг fd). Б. Головка (гексагональный контур) с отростком и сократимым чехлом (например, колифаги Т2, Т4 и Тб). В. Головка с длинным, гибким несократимым отростком (например, колифаги Т1 и Т5). Г. Головка с коротким отростком (например, колифаги ТЗ и Т7, фаг сальмонеллы Р22). Д. Октаэдр. Е. Икосаэдр. (Bradley D. Е., Ba teriol. Rev., 31 [1967], 230.)

При специфической трансдукции фрагмент бактериальной ДНК связан ковалентно с фаговой хромосомой и реплицируется в ее составе. Это позволяет мультиплицировать трансдуцируемые бактериальные гены и манипулировать ими в лабораторных условиях. Явление специфической трансдукции было открыто при работе с умеренным бактериофагом X, развивающимся в клетках Е. соИ К-12 (Morse et al., 1956). Этот фаг является представителем большого семейства лямбдоидных фагов. Он сыграл исключрггельную роль в развитии молекулярной генетики и генетической инженерии. Столь же значительна роль нитевидных фагов семейства М13. Их ДНК широко используется в качестве векторов. Поэтому для понимания многих аспектов генно-инженерных работ необходимо знать основные элементы их генетики и биологии развития. По трем причинам более детально описан фаг Х. Во-первых, это классический объект, послуживший моделью при изучении регуляции экспрессии генов вообще и временного профаммирования развития фагов в частности. Во-вторых, в 60-е годы он явился объектом, на котором была заложена база генетической инженерии — представление о векторе и возможности клонирования и экспрессии в нем чужеродных генов. В третьих, в 70-е годы [c.103]

Сравнительно недавно была детально изучена структура белковой оболочки нитевидного бактериофага Pfl [38, 39]. Мол. вес белковых субъединиц этого бактериофага (дополнение 4-В) равен - 5000. Они имеют форму а-спиралей длиной 7 нм, образующих в составе бактериофага структуру типа левой спирали с шагом 1,5 нм, на один виток которой приходится 4,4 субъединицы (рис. 4-8). Белковые палочки расгю- [c.274]

Нитевидные бактериофаги не вызывают лизиса бактериальных клеток во время инфекции, но постоянно выходят из них через пору диаметром 8 нм во внешней мембране клетки. Размер поры обеспечивает прохождение одной фаговой частицы. Во время переноса через внутреннюю бактериальную мембрану одноцепочечная геномная ДНК покрывается белками оболочки, которые локализованы во внутренней мембране. При этом их N-концы экспонированы в периплазматическое пространство, а С-концы контактируют с цитоплазмой. Белки g8p и g3p первоначально синтезируются в виде предшественников, содержащих N-концевую сигнальную последовательность, которая удаляется после их внедрения в мембрану. [c.335]

Бактериофаги. При конструировании клонотек нуклеотидных последовательностей для фагового дисплея чаще всего используют хромосомы нитевидных колифагов М13, fl и fd, а также фагмиды, полученные на их основе. Эти фаги заражают мужские клетки Е. oli через половые ворсинки (F-пили), которые содержат белковые рецепторы, обеспечивающие их сорбцию. Хромосома фагов представляет собой одноцепочечную, кольцевую, ковалентно замкнутую ДНК, которая заключена внутри цилиндрической белковой оболочки, обеспечивающей выживание вирусов в экстремальных условиях при значениях pH 2,5-11 и темпе- [c.334]

Из примеров, суммированных в табл. 28.1, видно, насколько велико несоответствие между длиной нуклеиновой кислоты и размером ее вместилища. Бактериофаги и вирусы эукариот независимо от того, являются ли они длинными и тонкими (нитевидными) или имеют почти сферическую (икосаэдрическую) форму, содержат большое количество нуклеиновой кислоты (одноцепочечной или двухцепочечной ДНК или РНК), которая заполняет всю вмещающую ее оболочку. [c.344]

Метод фагового дисплея, разработанный Т.П. Смитом в 1985 г., представляет собой простую и эффективную систему отбора белков и пептидов с требуемыми свойствами, экспрессированных на поверхности частиц нитевидных бактериофагов [88]. Возможность эффективного использования фагового дисплея [c.333]

Кроме обсуждавшихся выше нитевидных бактериофагов в фаговом дисплее могут быть использованы и другие колифаги, в том числе X и Т4 [94, 95]. Но из-за более низкой эффективности экспрессии гибридных белков оболочки на поверхности капсидов этих фагов, а также трудностей, связанных с получением репрезентативных клонотек нуклеотидных последовательностей на основе их хромосом, такие системы пока не находят широкого распространения. [c.336]

Небольшие одноцепочечные нитевидные фаги типа Р , к которым относятся бактериофаги А, fd, М13 и некоторые другие, были известны достаточно давно и их биология хорошо изучена. Весьма важным свойством этих фагов явилось то, что они не вызывали лизиса бакте- [c.213]

Одноцепочечная кольцевая ДНК — тип структурной организации ДНК. Например, у мелких сферических фагов (ФХ174) й у нитевидных бактериофагов (I2). Одноцепочечную структуру таких ДНК подтверждают следующие наблюдения. Нагре-BaHHe растворов этих ДНК не сопровождается переходом спираль—клубок. В отличие от двухцепочечной ДНК эта ДНК реагирует с формальдегидом, поскольку аминогруппы ее оснований оказываются свободными. Молярные соотношения оснований в ней не соответствуют известным правилам Чаргаффа для двухцепочечной ДНК—в частности, не выполняется молярная эквивалентность А и Т й Г и Ц, лежащая в основе образования двойной спирали. То,.что такая одноцепочечная ДНК замкнута в кольцо, подтверждается тем, что она практически не чувствительна к экзонуклеазам, а поэтому не содержит З -гидроксильного конца. [c.64]

При создании комбинаторных библиотек вместо фага X можно использовать нитевидные бактериофаги М13 или fd (рис. 10.14). В этих случаях соответствующий фрагмент антитела синтезируется как часть химерного белка, локализованного на поверхности фаговой частицы. Скрининг комбинаторной библиотеки фрагментов антител можно провести при помощи ферментного иммуносорбентного анализа (ELISA). Суть метода состоит в следующем образцы (аликвоты) из библиотеки помещают в ячейки планшеты, содержащие антиген-мишень. Ячейки промывают, чтобы удалить несвязанные фаговые частицы. В каждую ячейку вносят конъюгат, состоящий из антитела, связывающегося с белком фаговой оболочки, и фермента. Ячейки промывают для удаления несвязанного конъюгата и добавляют в каждую из них хромогенный субстрат, который расщепляется ферментом, связанным с фагом, и окраши- [c.219]

Важную группу векторов, широко используемых прн установлении первичной структуры ДНК, составляют нитевидные бактериофаги, такие, как М13, fd и fl. Фаг М13 представляет собой одно-цепочечиую циклическую ДНК длиной около 6500 нуклеотидов. После инфицирования бактериальной клетки одноцепочечная ДНК фага превращается в двухцепочечную репликативную форму (RF), которая во всех отношениях подобна плазмиде. Кроме того, фаговая ДНК содержит короткий участок (500 нуклеотидов), названный межгенной последовательностью (МП), несущественный для ее жизнеспособности (рнс. 250). [c.432]

Микоплазмы представляют собой полиморфные микроорганизмы, прокариоты, отличающиеся от всех описанных выще бактерий отсутствием клеточной стенки и большим разнообразием форм в пределах не только одного вида, но и одного штамма встречаются одновременно шарообразные, эллипсовидные, дискообразные, чашевидные, булавовидные искривленные, нитевидные длинные до нескольких (2—5) мкм при толщине 150—200 нм (рис. 22). Тонкие нитевидные структуры могут образовывать формы ветвления. Наиболее крупные шарообразные формы достигают 10 мкм. А 1ельчайшие формы микоплазм получили название элементарных телец , размеры которых 125—220 нм, т. е. близки к размерам крупных вирусов. Для сравнения укажем, что палочкообразный вирус табачной мозаики имеет длину 350 нм [236], длина бактериофага молочнокислого стрептококка (Strepto o us la tis) 630—690 нм [241], Х-виру-са картофеля—1500—4290 нм. Вирус чумы рогатого скота 300—750 нм [241]. Из этого видно, что элементарные тельца микоплазм по размерам намного меньше перечисленных вирусов. Жизнеспособность элементарных телец микоплазм доказана. Поэтому и считается, что микоплазмы относятся к мельчайшим свободноживущим микроорганизмам. Микоплазмы не нуждаются в культивировании на живых клетках микроорганизмов подобно вирусам. Отсутствие клеточной оболочки делает их нечувствительными к пенициллину, подавляющему, как известно, синтез клеточных оболочек у бактерий. [c.65]

Бактериофаги, или вирусы бактерий, весьма разнообразны. Лучше всего изучены мелкие мужские бактериофаги Е. ali. Они представляют собой фаги, содержащие РНК R17, f2, MS2, Q6. Их геном включает всего 4—5 генов и упакован в белковую оболочку в форме многогранника. Такую же форму имеют частицы бактериофагов фХ 174, генетическим материалом которых служит одно-нитевая ДНК размером в 5375 нуклеотидов. Эти вирусы имеют всего 10 генов. Другие однонитевые (ДНК) фаги — fl, fd, М13 — имеют нитевидную форму. Крупные бактериофаги — Л, Т2, Т4 — содержат двунитевую ДНК, на которой располагается около 100 генов. Молекула ДНК фага X состоит из около 49 тыс. п. н., а ДНК так называемых Т-четных фагов (Т2, Т4) состоит из 182 тыс. п. н. Они имеют многогранную головку и хвостовой отросток, на конце которого находится аппарат адсорбции и впрыскивания ДНК в бактериальную клетку (рис. 9.10). [c.216]

Э. Виткин обратила внимание на связь нескольких явлений, для которых общей причиной служит облучение клеток ультрафиолетовым светом 1) индукция профага Я 2) повышение выживаемости облученного бактериофага Я при заражении им предварительно облученных клеток Е. oli по сравнению с выживаемостью в необлученных клетках — так называемая W-реактивация, открытая Дж. Уэйглом 3) блокирование клеточных делений у некоторых мутантов Е. соИ, в результате чего клетки приобретают нитевидную форму 4) повышение частоты рекомбинации 5) повышение частоты мутаций. [c.313]

Наиболее полно изучены крупные бактериофаги, имеющие форму сперматозоида. Они состоят из вытянутой икосаэдричес-кой головки размером 65—100 нм и хвостового отростка длиной более 100 нм (рис. 3.7). Внутри хвостового отростка имеется полый цилиндрический стержень, сообщающийся отверстием с головкой, снаружи — чехол, способный к сокращению наподобие мышцы. Хвостовой отросток заканчивается шестиугольной базальной пластинкой с короткими шипами, от которых отходят нитевидные структуры — фибриллы. [c.60]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология