Пипсилхлорид

Метод ацилирования белков, широко применявшийся в начале столетия, сейчас потерял свое значение, так как большинство ацильных производных гидролизуются аналогично пептидной связи. Исключение составляет остаток п-иодбензолсульфокислоты (пипсил), который связывается с аминогруппой прочнее, чем динитрофенильный остаток.. Обычно применяют пипсилхлорид, содержащий иод [c.511]

Преимущества я-иодбензолсульфо- Ч-хлорида (пипсилхлорида) как радиореагента стали видны уже из первых сообщений о его применении в определении аминокислот [79—82]. При использовании пяти—десятикратного избытка этого реагента первичные и вторичные алифатические амины количественно превращаются в соответствующие сульфамиды. При этом эмульгированную смесь реагента, образца и МагСОз или 1МаНС0з кратковременно нагревают при температуре 90—100 °С. Избыток сульфохлорида легко гидролизуется до сульфокислоты, которую в свою очередь легко выделить из продуктов реакции, используя ионообменную смолу, или путем экстракции. [c.308]

В простейшем варианте метода анализа аминогрупп с применением пипсилхлорида производное-носитель не добавляют, а с обработанной пробой количественно проводят ряд операций для удаления из нее избытка реагента [80]. Порцию анализируемого раствора, из которого удалена сульфокислота, подвергают хроматографическому разделению и измеряют радиоактивность каждого из разделенных производных. Для калибровки проводят аналогичный анализ известного количества соответствующего производного, приготовленного с применением того же количества радиореагента, что и в основном анализе. Содержание амина в анализируемой [c.308]

Высокая чувствительность метода обратного изотопного разбавления с радиореагентом, а также селективность, которую обеспечивает применение индикаторного изотопа, позволяют определять микроколичества смесей первичных и вторичных аминов. Эти методы широко применяли в определениях различных аминокислот в биологических образцах [85—88]. В работе [86], в частности, описано использование этих методов для оценки содержания одиннадцати таких соединений в 1 мг белка. Метод с пипсилхлоридом применялся для анализа гистамина, причем в этом анализе проводилось четыре цикла перекристаллизации соответствующего производного с целью его очистки до получения постоянного значения удельной радиоактивности. После проведения этого анализа было предложено [89] применять данный метод для определения любого амина, который дает кристаллический замещенный д-иод-бензолсульфамид. Этим же методом оценивались микрограммные количества 2,4-диоксипиримидина и его 5-метильного производного [90]. Для разделения пипсильных производных в дополнение к бумажной хроматографии применялись жидкофазная колоночная хроматография [91] и тонкослойная хроматография [92]. Хроматографию на бумаге применяли также для оценки радиохимической чистоты реагента [93]. [c.310]

Известен и другой вариант определения аминокислот методом изотопного разбавления [217, 218]. К анализируемой смеси аминокислот прибавляется пипсилхлорид (п-иодфенилсульфонилхло-рид), меченный иодом-131. При соответствующих условиях аминокислоты количественно (98—100%) превращаются в меченые монопипсиламинокислоты (сульфонамиды), которые затем выделяются из смеси. В качестве носителя используется неактивный сульфонамид определяемой аминокислоты, причем в анализируемую смесь прибавляется большой избыток носителя. Очистка сульфонамидного производного, ставшего активным в результате изотопного разбавления, производится экстракцией и перекристаллизацией. [c.116]

И ангидрид [128—130], и хлорангидрид [130—133] использовались для определения кортикостероидов и эстрогенов путем этерификации одной или большего числа их гидроксильных групп. Если в наличии имеется определяемое соединение, меченное изотопами или Н, то, используя различный характер радиоактивности изотопов и (или и Ч (или 2 1), и можно разработать методы, в которых превращение в производные не обязательно должно быть количественным. Метод количественного определения полумикроколичеств эстрадиола с использованием меченного тритием субстрата, пипсилхлорида, меченного изотопом 5 (радиореагент), и пипсильного производного, меченного изотопом Ч (второй индикатор), —был описан в работе [134]. Однако меченые стероиды сравнительно редко применяют совместно с пипсил-хлоридом и пипсаном. [c.81]

Принцип метода состоит в том, что в аминокислоту количественно вводят группу, содержащую радиоактивные атомы затем, чтобы облегчить выделение, добавляют большое определенное количество такого же немеченого производного аминокислоты. После очистки определяют содержание Ь изотопа в смеси и сравнивают его с теоретическим количеством у изотопа для этой аминокислоты. Отношение b/у дает число молей определяемой аминокислоты. Для этой цели применяют п-иодфенил-сульфохлорид (пипсилхлорид), меченный J131 или S35. Эти производные достаточно стойки в условиях гидролиза и поэтому пригодны также для определения N-концевых аминокислот. Метод считается весьма точным, что, повидимому, подтверждается немногими появившимися в литературе данными. [c.219]

Если исходить из молекулярного веса 6000, то для объяснения результатов, полученных Аденфрендом и Великом, пришлось бы скорее предположить, что половина молекул не способна реагировать с пипсилхлоридом, нежели принять более вероятное допущение, что этот реагент не может проникнуть в интрамолекулярные промежутки, чтобы прореагировать со всеми концевыми группами. В результате исследований, проведенных Хар-фенистом и Крейгом [77е] на частично замещенном (динитро-фенилпроизводное) инсулине быка, методом противоточного распределения установлено минимальное значение молекулярного веса около 6000. Очевидно, что для окончательного решения этой проблемы нужно продолжить исследования и применить совершенно новые методы. [c.233]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология