Определение аминокислот по Ван Слайк

Взаимодействие с азотистой кислотой. При подобном взаимодействии а-аминокислоты с выделением азота превращаются в а-окси-карбоновые кислоты. На этой реакции основан метод количественного определения аминокислот по Ван-Слайку. [c.503]

Задача 37.15. Реакция первичных алифатических аминов с азотистой кислотой приводит к количественному выделению азота в виде газа, что является основой метода определения аминного азота по Ван-Слайку. Какой объем азота (при нормальных условиях) выделится при обработке 0,001 моля следующих аминокислот а) лейцина б) лизина в) проли-на [c.1045]

В первичных алифатических аминах, а также аминокислотах, полипептидах и белках, имеющих первичные аминогруппы, определение последних проводят по методу Ван-Слайка (используется реакция с азотистой кислотой). [c.253]

Анализ. Обычно анализ а-А. основан на взаимод. с нин-гидрином, в результате к-рого А. расщепляется до альдегида, СО2 и NH3, а NH3 образует с нингидрином фиолетовый краситель. Для количеств, определения измеряют объем выделившегося Oj или, чаще, фотометрируют образующийся краситель. Последний метод используется в автоматич. хроматографах, позволяющих разделять на сульфокатионитах и количественно анализировать сложные смеси аминокислот и пептидов. Еще более чувствителен флуоресцентный анализ продуктов реакции А. с о-фта-левым диальдегидом. Быстро развивается лигандообменный хроматографический анализ А. и пептидов на си-ликагельных сорбентах в присутствии ионов меди. Бумажная и тонкослойная хроматография чаще используются для качественного анализа. Измерение объема N3, выделяющегося при дезаминировании А. азотистой к-той, а также титрование А. щелочью в избытке формалина (методы Ван Слайка и Сёренсена) сохранили лишь историческое значение. [c.138]

Метод Ван Слайка нашел широкое применение для определения аминного азота в аминокислотах и белках [40], однако его можно использовать для анализа многих первичных аминов. [c.462]

Реакции аминогруппы. При взаимодействии с азотистой кислотой -аминокислоты, подобно алифатическим аминам (см. 6 2), подвергаются дезаминированию. Измерение объема выделившегося в этой реакции азота лежит в основе количественного определения аминокислот (метод Ван-Слайка). [c.410]

Эта реакция была использована Ван-Слайком для разработки метода количественного определения аминокислот. Измерив объем выделившегося азота, в определенных стандартных условиях и разделив найденное количество азота на два (исходя из того, что аминокислотам принадлежит лишь половина выделившегося азота), можно определить количество аминного азота, имевшегося в растворе. [c.239]

Общие сведения. Измерение количества выделяющегося или поглощающегося во время реакции газа принято для определения нескольких органических функций. Наиболее известным методом, основанным на измерении газа, можно считать определение ами-но-группы в а-аминокислотах по методу Ван-Слайка, а определение ненасыщенных соединений каталитическим гидрированием является лучшим примером метода, основанного на измерении поглощенного газа. Эти методы объединяют под общим названием газометрических. Количество выделяющегося газа определяют, помещая пробу в соответствующую аппаратуру и обрабатывая ее избытком реагента, а затем измеряют либо объем образовавшегося газа при постоянном давлении, либо давление газа при постоянном объеме. Последний способ обычно называют манометрическим. Количество поглощающегося газа (обычно водорода) измеряется аналогично в соответствующей аппаратуре. Обычно при выполнении газометрической методики измеряют начальный объем газа в бюретке при известном давлении, затем добавляют образец и измеряют объем или давление после реакции. Следовательно, все газометрические методы проводятся в замкнутой системе, рассчитанной таким образом, чтобы в результате реакции образовалось или поглотилось измеримое количество газообразного вещества. [c.61]

Эта реакция легла в основу нитритного метода Ван-Слайка для определения аминокислот выделяющийся азот может быть определен газометрическим [118, 119] или манометрическим методом [120]. [c.33]

Существующие химические методы определения азота в аминокислотах (по Кьельдалю, Ван-Слайку и др.) [1] продолжительны, трудоемки, недостаточно специфичны и точны. В настоящее время приобрели большое значение как визуальные, так и инструментальные (потенциометрические, кондуктометрические, спектрофотометрические и др.) методы определения аминокислот по аминогруппе в неводных средах, главным образом в ледяной уксусной кислоте и в ее смесях с другими органическими растворителями [2—6]. [c.102]

Ван-Слайк разработал также манометрический метод определения а-аминоазота в малых количествах а-аминокислот . Соответствующий прибор позволяет определять малые количества азота (от 0,00148 до 0,890 мг) с большой точностью при меньшей затрате времени, чем на газообъемное определение. Этот же прибор может быть использован для проведения других реакций, сопровождающихся выделением газа, при любых температурах (водяная рубашка). [c.711]

Эта реакция лежит в основе количественного определения аминокислот по Ван-Слайку, при котором в специальных приборах определяется объем выделившегося азота. [c.377]

На этой реакции основано количественное газометрическое определение аминокислот с помощью метода Ван-Слайка. [c.142]

Если количество лизина в белке определить отдельно, то число концевых ос-аминогрупп может быть найдено путем вычитания соответствующего числа е-аминогрупп из общего числа аминогрупп, определенных по методу Ван-Слайка. Подобного рода определения, проведенные с лактоглобулином и инсулином [5], цитохромом с [6] и другими белками, показали, что в этих белках имеется значительный избыток й-аминогрупп. Данные, полученные таким косвенным методом, не являются, однако, совершенно точными, так как такие аминокислоты, как глицин или цистеин, при обработке азотистой кислотой по методу Ван-Слайка дают больше азота, чем это теоретически следует. [c.123]

Определение аминокислот в их смеси. Из химических методов особое значение имеет метод определения первичных аминогрупп путем превращения их азота в газообразное состояние (метод Ван-Слайка) и нингидриновый метод. Так определяется суммарное количество аминокислот. Для отдельных групп аминокислот разработаны специфические методы. Так, для определения оксиаминокислот используют окисление их йодной кислотой по реакции [c.42]

Алифатические диазосоединения. Ранее была рассмотрена (стр. 173) реакция первичных алифатических аминов с азотистой кислотой, приводящая к образованию спиртов и олефиновых углеводородов. Эта реакция имеет особое значение для аминокислот, так как по объему выделившегося азота можно определить количество аминогрупп. Метод Ван-Слайка для определения аминогрупп в аминокислотах, пептидах и белках основан на этой реакции. [c.474]

При определении аминокислот с помощью формольного титрования используется реакция аминокислот с формальдегидом, приводящая к увеличению кажущейся кислотности [171, 176]. Одним из самых старых методов определения степени гидролиза является газометрический метод Ван-Слайка, основанный на определении азота, выделяющегося нри взаимодействии аминокислоты с азотистой кислотой [171, 184]. В литературе описаны [171] различные модификации этого метода и оцениваются другие возможньге методы определения аминокислот, включая титриметрические, газометрические, спектрофотометрические и т. д. Использовалось также ферментативное декарбоксилирование специфических аминокислот при определении молекулярного веса полипептида и степени его гидролиза [16]. [c.401]

Свободные аминокислоты как первичные амины реагируют с HNOj с отщеплением азота. При этом аминогруппа замещается гидроксилом и изменения конфигурации у хирального атома углерода не происходит. Измерение количества выделяющегося азота служит для количественного определения аминокислот по ван Слайку (1910 г.) [c.68]

ВАН СЛАЙКА МЕТОД определения первичных алиф. аминов и а-аминокислот. Основан на взаимод. аминогрупп с HNO2 в среде ледяной СНзСООН с выделением N2, объем к-рог.о измеряют. Разработан Д. Ван Слайком н 1909. ВАРИАМИНОВЫЙ ГОЛУБОЙ (4-амино-4 -метоксиди-фениламин), темно-синие крист. t j, 102 С расгв. в сп., [c.94]

В химии аминокислот используется много других аналитических способов. Определение азота по Къелъдалю дает содержание всего азота в белке или белковом гидролизате. При. этом определении органическое соединение разлагается путем, нагревания со смесью концентрированной серной кислоты и катализаторов, таких, как двуокись селена. Образующиеся аммонийные соли превращаются в аммиак, который отгоняют и титруют. Общее содержание азота заметно меняется в зависимости от характера аминокислот в белке. Количество азота, присутствующего в виде первичных аминогрупп, определяется по методу Ван-Слайка. Неизвестное вещество обрабатывают азотистой кислотой и измеряют объем выделяющегося азота. [c.539]

Количественное определение а-аминокислот возможно титрованием по Сёренсену или же взаимодействием с азотистой кислотой по Ван-Слайку. Различные а-аминокислоты могут быть разделены методами бумажной, тонкослойной хроматографии, колоночной хроматографии на ионообменных смолах, гель-фильтрации или ионофореза. [c.503]

Работая над настоящей книгой, автор стремился при изложении в ней новых методов по возможности не увеличивать объем книги. Во избежание увеличения объема книги были опущены такие широко известные и редко используемые специальные методы как определение азота аминокислот по Ван-Слайку, исследование дыхания манометрическим способом (по Баркрофту и Варбургу), а также некоторые другие методы, описанные в первом издании (см. Петров К- П. Практикум по биохимии пищевого растительного сырья. М., Пищевая промышленность , 1965). [c.3]

В то время как сг-аминогруппы аминокислот и концевые л-аминогруппы пептидов очень быстро реагируют с азотистой кислотой, Е-аминогруппы лизина реагируют очень медленно. Прн действии азотистой кислоты медленно разлагается с образованием азота также аммиак, который при гидролизе соляной кислотой отщепляется от амидных групп аспарагина и глутамина [18]. Объем образовавшегося азота можно измерить либо при атмосферном давлении, либо манометрически — при пониженном давлении [20]. Метод Ван-Слайка дает прекрасные результаты с большинством аминокислот и пептидов. Необходимо, однако, принимать в расчет, что сама азотистая кислота под действием сильно восстанавливающих веществ (например, цистеина) разлагается с образованием азота [21]. При определении азота глицина и его пептидов также получаются данные, превышающие теоретически вычисленные величины [22, 23]. [c.26]

Молекулярная масса. Для П. со степенью полимеризации 150—200 и меньше мол. масса м. б. определена анализом концевых групп. Этот метод применим лишь при отсутствии циклич. пептидов и низкомолекулярных примесей, содержащих функциональные группы, аналогичные концевым группам линейного П. Концевые аминогруппы м. б. определены титрованием хлорной к-той (в неводной среде в присутствии кристаллич. фиолетового) или методом потенциометрич. титрования. Определение концевых аминогрупп по Ван-Слайку (измерением объема азота, выделяющегося при обработке пептида азотистой к-той) возможно даже в случае нерастворимых в воде полимеров. Иногда П. обрабатывают 2,4-динитрофторбензолом и определяют количество модифицированных концевых групп спектрофотометрически. Концевые карбоксильные группы м. б. оттитрованы метилатом натрия в органич. растворителе-в присутствии тимолового синего. С-Концевая аминокислота П., полученного полимеризацией карбоксиан-гидридов а-аминокислот (см. ниже), может нести специфич. эфирную или амидную группировку катализатора полимеризации, которая м. б. подвергнута количественному анализу. [c.14]

Через колонку, содержащую 6 г анионообменной окиси алюминия, было профильтровано 10 мл полученного раствора аминокислот. Фильтрат собирался в мерную колбу объемом 25 мл. Затем колонку промывали водой и фильтрат промывания собирали в ту же мерную колбу. Промывание колонки было закончено, когда общий объем собранного фильтрата (Fj) был доведен до 25 мл. Для определения аминного азота по Ван-Слайку было взято 4 мл фильтрата F . Аминокислоты, задержанные анионообменной окисью алюминия, вытеснялись 0,5 н. раствором NaOH. Фильтрат, получавшийся при этом вытеснении (El), собирали в отдельную колбу. Другая порция фильтрата Fl объемом 20 мл была пропущена через колонку, содержащую 100 мл катионообменной окиси алюминия. Колонка была затем промыта 100 мл воды. При этом первичный фильтрат и фильтрат промывания также собирали в один приемник. Так был получен фильтрат F2, содержащий нейтральные аминокислоты и гистидин. [c.119]

Эта реакция положена в основу волюмометрического определения содержания азота и количества аминогрупп в аминокислотах метод Ван-Слайка). Каждый моль л/ / оаминокислоты выделяет один моль азота, который, как известно, занимает объём 22,4 л. Замерив объём выделившегося в реакции азота и сопоставив этот объём с навеской аминокислоты, высчитывают процентное содержание азота в веществе и через него -число аминогрупп. [c.48]

Была также показана возможность синтеза пиримидил-Ы-а-амино-кислот на основе конденсации р-дикарбонильных соединений и их аналогов с а-амино-со-гуанидоалифатическими кислотами. В частности, было установлено, что аргинин способен вступать с малоновым эфиром в конденсацию, приводящую к получению соответствующей пиримидиламинокислоты. В этом случае возможно образование как пиримидил-Ы-а-аминокислоты, так и N-пиримидил-а-аминокислоты [33]. Однако в пределах чувствительности методов хроматографии и электрофореза, в реакционных смесях обнаруживается лишь одно вещество, способное поглощать УФ-лучи и одновременно проявляться нингидрином. Определение аминного азота по Ван-Слайку показало, что в полученном веществе имеются две свободные аминогруппы. Это однозначно указывает на структуру пиримидил-Ы-а-аминокислоты и позволяет исключить из рассмотрения изомерную ей структуру [33]. Аналогичные результаты были получены при конденсациях аргинина с ацетоуксусньш, формил-уксусным и циануксусным эфирами [34, 35]. [c.339]

Алкалоид неизвестной структуры имеет эмпирическую формулу СаН КО. При ацетилировании вещество образует моноацетат и при определении концевых метильных групп дает 0,7 моля уксуспой кислоты. Иодоформная реакция алкалоида положительна. При окислении алкалоида в контролируемых условиях образуется С Н КО — нейтральное вещество, которое пе дает уксусной кислоты при определении концевых метильных групп. В результате кислотного гидролиза .HJ NO образуется аминокислота С,.И,зКЧ)2, но дававшая азота при определении методом Ван-Слайка.Изобразите вышеуномянутые превращения, написав соответствующие структуры. [c.556]