Фиколл

Таблица 5. Приготовление градиентного раствора фиколла для MMGT

В случаях синхронизации клеток млекопитающих применяют сепарацию и индукцию В первом случае проводят дифференциальное центрифугирование в градиентах бычьего сывороточного альбумина, сахарозы или фиколла (синтетический высокомолекулярный сополимер сахарозы и эпихлоргидрина [c.153]

Приготовление ступенчатого градиента фиколла. Тщательно промойте необходимое количество центрифужных пробирок для ротора 8Ш41 абсолютным спиртом, высушите в перевернутом положении в ламинарном боксе. Приготовьте градиент фиколла, используя уравновешенные исходные растворы (рис. 2). [c.18]

Стабилизация разделяемых компонентов при работе в периодическом режиме достигается при помощи градиента некоего вещества (сахарозы, фиколла и др.), которое соприкасается с электролитом, находящимся в электродных сосудах (рис. 3.8). Градиент плотности формируют над слоем концентрированного раствора вещества, используемого для создания градиента. Этот слой выполняет роль своего рода прокладки. Охлаждение осуществляется и снаружи (водяная рубашка), и изнутри (охлаждающий цилиндр) циркулирующей водой, температура которой составляет 4°С. Таким образом, поперечное сечение колонки имеет форму кольца, охлаждаемого с обеих сторон. По окончании электрофореза фракции отбирают, выпуская содержимое колонки через отверстие в ее нижней части или высасывая его при помощи насоса через капиллярную трубку в центре охлаждающего цилиндра [87]. [c.117]

Центрифугируйте при 20000 об/мин (50 000 ) при комнат ной температуре в роторе 5 41 10 мин при максимальном ускорении и торможении. Эта процедура осаждает миниклетки и отделяет их от фиколла. [c.19]

Соберите и объедините фракции градиента фиколла, содержащие мини-клетки. [c.20]

Метаболически активные ядра могут быть получены также путем градиентного центрифугирования в растворах сахарозы, декстрана [156] или фиколля (высокомолекулярный полимер сахарозы) [157]. [c.137]

При центрифугировании клеток (Boone et al., 1968) через прерывистый (10—20%) градиент фиколла в МСИ, модифицированной для этой цели (удалены кальций и бикарбонат и концентрация фосфата увеличена в 10 раз), в зональном центрифужном роторе А=1Х в течение 1 ч при 1000 об/мин при 20°С удается получить четкое разделение различных типов клеток (клетки HeLa и тимоциты кролика). [c.150]

Для выделения различных мембранных структур из гомогената, имеющих разные величины коэффициента седиментации, применяют зональное центрифугирование в градиенте плотности определенных веществ. Исследуемый раствор наносят на предварительно приготовленный в центрифужной пробирке градиент плотности и центрифугируют. Градиент создается путем последовательного наслоения растворов градиентной среды уменьшающейся концентрации (плотности) в центрифужной пробирке. Субклеточные структуры разделяются на отдельные зоны в соответствии с их относительной плотностью. Для создания градиента плотности необходимо подбирать вещества в чистом состоянии, не взаимодействующие с компонентами суспензии и реагентами исследуемого раствора. Чаще всего для этого используют сахарозу, однако ее растворы с высокой концентарцией имеют большую вязкость, вследствие чего происходит дегидратация органелл или их лизис. Кроме того, серьезным недостатком этого метода является проницаемость многих органелл для сахарозы, что вызывает их осмотическое разрушение и изменение эффективной плотности. Поэтому в настоящее время для создания градиента плотности предпочитают применять другие среды фиколл, перколл и др. (табл. 16). [c.218]

Среда для ИЭФ в градиенте плотности. Для стабилизации зон при ИЭФ чаще всего используют градиент плотности сахарозы, но применяют также и другие вещества, такие, как 1,2-пропапд иол (этиленгликоль [9]), глицерин, маннит, сорбит, декстран и фиколл. Глицерин имеет некоторые преимущества перед сахарозой в области pH выше 10, где она частично диссоциирует и искажает определяемые во фракциях величины pH [I344J. Обычно работают с линейными градиентами плотности, однако для повышения их емкости иногда создают и нелинейные градиенты [1259]. [c.143]

Тимуснезависи-мые-2 (Т1-2) антигены полисахарид пневмококков, полимеризо-ванный флагеллин сальмонелла, по-ливинилпирол-лидон, фиколл, конъюгированный с гаптеном [c.244]

BFP 100Х=2% (в/об) бычьего сывороточного альбумина, фиколла и поливинилпирролидона. [c.127]

Соберите обработанные колцемидом и цитохалазином клетки и осадите их центрифугированием (1500 5 мин при комнатной температуре). Ресуспендируйте в 3 мл 10%-ного фиколла (табл. 5) и мягко наслоите на градиент. Заполните центрифужные пробирки раствором без фиколла. [c.18]

Центрифугируйте при 3000 об/мин 15 мин. Солевой раствор остается над фиколлом. Мутная взвесь на границе раздела (иитерфаза) состоит из лимфоцитов. [c.65]

Методика выделения ДНК из лимфоцитов существенно близка используемой для культивируемых клеток, если лимфоциты свободны от примеси эритроцитов. Эритроциты могут быть или лизированы (табл. 3 (Б)), или удалены с помощью центрифугирования в градиенте фиколла или перколла. Эти методы описаны в табл. 3 (В). [c.68]

Справочник биохимии (1991) -- [ c.400 , c.471 ]

Биологические мембраны Структурная организация, функции, модификация физико-химическими агентами (2000) -- [ c.219 ]

Методы исследований в иммунологии (1981) -- [ c.232 , c.233 , c.258 , c.259 , c.269 , c.271 , c.312 ]

Электрофорез и ультрацентрифугирование (1981) -- [ c.208 ]

Структура и функции мембран (1988) -- [ c.167 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология