Бокс ламинарный

Ввиду опасности заражения при вдыхании клеток гриба исследования проводят в специализированных лабораториях с ламинарными боксами и другими мерами предосторожности. Материалом для исследования являются гной абсцессов, биоптаты пораженных тканей. [c.337]

Фильтрация. Фильтрация является механическим методом освобождения жидкостей и газов от микроорганизмов. С целью сохранения стерильности жидкостей флаконы и пробирки, а также пипетки, в которые помещают такие жидкости, закрывают ватными пробками. Для предотвращения заражения через воздух, например, в хирургических стационарах используют ватно-мар-левые повязки и специальную одежду. Фильтрование применяют для стерилизации воздуха, например, с целью создания условий строгой стерильности при работе в ламинарном боксе или в помещениях, где находятся ослабленные (иммунодефицитные) больные. Для удаления микробов из жидкостей обычно применяют мембранные фильтры с диаметром пор менее 0,2 мкм, однако многие фильтры не задерживают вирусы, микоплазмы и другие мельчайшие микроорганизмы. [c.430]

Фильтры местных систем тонкой очистки воздуха боксов делают двухслойными, аналогично фильтрующим элементам радиохимических боксов [266], снаряжая их лавсаном и тканью ФПП-15-6,0. Рекомендуется подавать очищенный воздух в камеры, химические шкафы и боксы в виде вертикального ламинарного потока через отверстия, равномерно размещенные по всей площади потолка, с немедленным отсосом воздуха снизу. При этом обеспечивается высокая стабильность поддержания чистоты атмосферы и быстрое восстановление ее кондиций при вынужденных перерывах в работе. Чистый бокс с ламинарным потоком готов к работе спустя 20—30 сек после включения вентиляционной установки [449]. Если при работе не выделяются вредные агрессивные пары (газы), то система пылеочистки строится по принципу рециркуляции. В противном случае бокс герметизируют, очищенный воздух подают с некоторым подпором и вместе с парами выбрасывают в канал вытяжной вентиляции. [c.324]

Низкоскоростная центрифуга, ламинарный бокс, термостат для культивирования в атмосфере СО2, термостат на 37 °С, пластиковые планшеты на 96 лунок для культивирования клеток, набор хирургических инструментов, многоканальная автоматическая пипетка и стерильные наконечники к ней, пластиковые круглодонные центрифужные пробирки, пластиковая посуда и пипетки, обычно используемые при работе с культурами клеток. [c.191]

Боксы с ламинарным током воздуха обеспечивают вхождение в бокс воздуха через фильтры НЕРА и прохождение тока воздуха над рабочей поверхностью перед выходом его из бокса позади исследователя. Ток воздуха является ламинарным и может быть вертикальным (от потолка к полу) или, что чаще, горизонтальным. Частицы вещества и аэрозоли, образующиеся в боксе, удаляются током воздуха в течение нескольких секунд. [c.114]

Ламинарный бокс с вертикальной или горизонтальной подачей стерильного воздуха. Стерильность обеспечивается наличием фильтров, задерживающих частицы крупнее 0,3 мкм. [c.96]

Если возможно, слегка приоткрывают крышку чашки и подсушивают нанесенные штрихи в стерильном ламинарном боксе в течение 10 мин. Закрывают крыш>ку, а затем помещают чашку В термостат в перевернутом положении (крышкой вниз) и инкубируют в тех же условиях температуры и време--ни, как указано в разд. 1.3.2. [c.40]

Подсушивают чашки в потоке стерильного воздуха в ламинарном боксе ). [c.65]

Помещают 15—100 срезанных кусочков ткани (в зависимости от размера) в суспензию агробактерий и инкубируют в течение 2—5 в стерильном ламинарном боксе. [c.112]

Помещают сегменты гипокотиля (20 сегментов на чашку) на чашки, приготовленные, как указано на стадии 1, и оставляют в ламинарном боксе примерно на 2ч ). [c.137]

Дают листьям подсохнуть в потоке воздуха ламинарного бокса. Переносят листья (нижним эпидермисом вверх) на стерильную белую кафельную плитку и тонким пинцетом удаляют нижний эпидермис ). [c.146]

Примечание соблюдайте стерильность. Работайте в ламинарном боксе, за исключением экстракции клеток для оценки временной экспрессии через 48 ч. [c.218]

Переносят протопласты, ресуспендированные в жидкой культуральной среде, в пластиковую чашку Петри диаметром 5 см, расположенную на столике микроскопа (в ламинарном боксе). Оставляют на 5 мин, чтобы протопласты осели. [c.229]

Опасность микробного заражения культур в значительной мере снижена благодаря использованию антибиотиков и ламинарных боксов. Однако следует по мере возможности избегать культивирования клеток с антибиотиками, поскольку проблема хронического латентного заражения все еще остается острой. [c.24]

В ламинарном боксе две чашки Петри, пастеровские пип етки, пипетки. [c.125]

Оставляют клетки селезенки в универсальном контейнере на ночь при комнатной температуре в ламинарном боксе для стерильных работ. Преимущество этой процедуры заключается в том, что она позволяет экспериментатору на следующий день проверить спленоциты под микроскопом и убедиться, что они не загрязнены. Вероятно, это подавляет и рост фоновых клеток селезенки в лунках, где проводят клонирование. [c.142]

Внутри ламинарного бокса на пробковую панель кладут мажное полотенце. [c.69]

Во флакон добавляют используемый для приготовления суспензии раствор из расчета 1 мл на мозг одного новорожденного мышонка или 1,5 мл на мозг сосунка. Работу проводят п ламинарном боксе, экспериментатор должен пользоваться перчатками. [c.72]

И. Полупрозрачный супернатант, представляющий собо 20%-ную суспензию вирусного антигена из мозга мышат, от бирают, делят на порции и хранят при —70 °С. Работу веду в ламинарном боксе. [c.72]

Замороженного мышонка помещают в ламинарный бокс ют ему полностью оттаять, [c.73]

Техника безопасности. Ввиду того что возбудители туберкулеза обладают высокой контагиозностью (инфицирующая доза составляет менее 10 клеток) и устойчивостью к действию факторов внещ-ней среды, при работе с материалом, содержащим микобактерии, и чистыми культурами существует опасность лабораторного заражения и распространения возбудителя. Поэтому необходимо выполнять исследование с особой предосторожностью. Пробирки и другую посуду тщательно укупоривают. Все манипуляции, при которых может образоваться аэрозоль, содержащий туберкулезные бактерии (открывание емкостей с материалом и культурами, прожигание бактериологических петель, пипетирование, центрифугирование жидкостей и др.), надо проводить по возможности в ламинарном боксе (при отрицательном давлении), использовать спецодежду и средства защиты органов дыхания (например, респиратор). Поверхности в лаборатории обрабатывают дезинфицирующим раствором и ультрафиолетом. Предпочтительно использовать одноразовые инструменты, петли прокаливать в специаль- [c.207]

Например, для обеззараживания воздуха в помещениях или отдельных зонах используются фильтрование воздуха в схеме приточно-вытяжной вентиляции, бактерицидные УФ-лампы (наи-больщей стерилизующей способностыр обладают лучи с длинами волн 254-257 нм). Могут быть использованы специальные асептические боксы с ламинарным потоком стерильного воздуха, отделенные от остальных помещений специальными шлюзами. [c.304]

В боксах класса II (рис. 24.4) используются ламинарные потоки воздуха, в них имеются передние окна для доступа к рабочему пространству и для внесения и удаления необходимых предметов. Предотвращение распространения инфекционного материала из воздушного пространства бокса достигается завесой воздуха, образуемой из неотфильтрованного воздуха, поступающего из комнаты в бокс, а также из воздуха, идущего через верхнюю решетку и проходящего через ВЭВ-фильтр. Эта завеса предохраняет также от поступления загрязнений из комнатного воздуха в рабочее пространство бокса. Воздух затягивается через решетку у переднего края рабочей поверхности в находящийся внизу приточный вентилятор, проходит через ВЭВ-фильтр, подается к верхней решетке и через нее поступает в бокс. Часть воздуха используется для поддержания воздушной завесы, а оставшаяся часть проходит вниз и вытягивается через решетку, расположенную у заднего края рабочей поверхности. Отфильтрованный воздух, поступающий через верхнюю решетку, опускается вниз однородным потоком, что сводит к минимуму возникновение завихрений. Этот воздух обеспечивает и поддерживает чистую атмосферу рабочего пространства. Часть воздуха, вытягиваемого через переднюю и заднюю решетки рабочей поверхности, которая равна притоку комнатного воздуха в бокс, также фильтруется и удаляется из бокса. [c.213]

Протрите шерсть этанолом, в ламинарном боксе возьмите селезенку с помощью стерильных инструментов и поместите ее в стерильную чашку Петри диаметром 90 мм с 3—4 мл среды DMEM, содержащей 10% СЭК. [c.190]

Другой тип боксов с ламинарным током воздуха требуется при работе с клеточными культурами, зараженными болезнетворными вирусами. Б этих случаях образующиеся в боксе аэрозоли могут обладать биологической опасностью, а выходящий из бокса воздух не должен попадать в атмосферу раньше, чем он будет стерилизован пропусканием через вироцидные фильтры. [c.114]

Использование систем с ламинарным током воздуха делает невозможным перенос бактерий от исследователя в культуру, и в принципе такие системы с ламинарным током воздуха обеспечивают идеальную защиту как культур, так и самих исследователей. Однако уже сам факт, что в поток воздуха попадают руки, нарушает ламинарность и создает завихрения. Па этой причине боксы с ламинарным током воздуха следует использовать как дополнение к стандартной асептической технике. Боксы с ламинарным током воздуха особенно рекомендуются те1л йсследоватёлям, которые желают работать с клетками, но не имеют соответствующего помещения. Боксы могут быть использованы в общей лаборатории без риска загрязнения при условии соблюдения правил асептической техники. При использовании бокса исследователь избегает необходимости работать в маленькой комнате, в которой может быть слишком жарко и душно при отсутствии мощной вентиляционной системы, а кроме того, голова исследователя оказывается отделена от культур пластиковой крышкой бокса, что дополнительно снижает вероятность загрязнения. [c.114]

Приготовление ступенчатого градиента фиколла. Тщательно промойте необходимое количество центрифужных пробирок для ротора 8Ш41 абсолютным спиртом, высушите в перевернутом положении в ламинарном боксе. Приготовьте градиент фиколла, используя уравновешенные исходные растворы (рис. 2). [c.18]

Микроскоп для микроинъекций можно использовать любой инвертированный микроскоп с высоким увеличением хорошего качества (например, Ы1коп ТМВ ЬеНг 01 ауег1) с большим рабочим расстоянием конденсора, фазово-контрастной оптикой и оборудованный эпифлуоресцентной и/или дифференциальной интерференционной оптикой. Микроскоп должен быть прочно зафиксирован, и всю систему необходимо поместить на противовибрационный стол в ламинарном боксе. Для наблюдения за протопластами требуется объектив X 10, а для визуализации ядер и самих инъекций— объектив Х40. [c.226]

Работы со всеми первичными культурами и линиями клеток, для которых не показано специфическими методами отсутствие примесных биологически вредных агентов, следует проводить в ламинарном боксе П класса (BS5726 NIH Spe . 03-112). Эта предосторожность защитит персонал, работающий с культурами клеток, и лабораторию от инфекции и загрязнений. Более того, есть рекомендации о соблюдении подобных предосторожностей при работе с линиями опухолевых клеток человека из-за присутствия в клетках онкогенов и показанной недавно возможности трансфекции, по крайней мере в системе клеточные культур., [c.110]

Необходимо хорошее оборудование для работы с культурами, в том числе СОг-термостат (содержание СОг в воздухе — 5%)- Желательно иметь ламинарный бокс для осуществления манипуляций в стерильных условиях. Следует отметить, что знание основ асептики и некоторый опыт в работе с клеточными культурами важны для успешного проведения работ. Для визуального наблк>дения за культурами необходим инвертированный микроскоп (например, Olympus СК модель снабжена широкой ровной подста вкой, объективом ХЮ и бинокулярной насадкой WF 15Х). Кроме контейнеров с жидким азотом для хранения плазмацитом и гибридом, для получения моноклональных антител необходимо не так уж много специального оборудования. Позднее будут рассмотрены возможные варианты процедур скрининга, которые, по-видимому, следует усовершенствовать и более широко внедрять в практику. Для иммунизации необходимо иметь инбредные линии мышей (обычно BALB/ ) или крыс (Lou). Если предполагается выращивать гибридомы в виде асцитных опухолей, то понадобится довольно большое количество животных. [c.117]

Четыре шпр ица на 10. мл (каждый заполнен 10 мл H-RPMI — 2% СПК и снабжен иглой № 26). Оставляют в закрытом стерильном боксе в ламинарном шкафу. [c.124]

Забивают мышь путем дислокации шейных позвонков и обмывают тушку 70%-ным этанолом. Удаляют избыток спирта с помощью фильтровальной бумаги. Помещают мышь на анатомический столик, предварительно обработанный 70%-ным этанолом, и стерильными инструментами производят продольный разрез брюшка, чтобы обнажить оелезен ку. Извлекают селезенку с помощью стерильных ножниц и пинцета, помещают ее в небольшое количество среды в маленькой, стерильной чашке Петри и переносят в ламинарный бокс. [c.125]

Удаляют ка псулу и строму селезенки из чашки Петри к переносят суспензию клеток пастеровской пипеткой в пробирку на 30 мл, оставляя маленькие кусочки ткани селезенки, которые могли осесть на дне чашки. Пробирку оставляют в штативе в ламинарном боксе. Повторяют процедуру с другой селезенкой. [c.125]

По окончании центрифугирования вынимают пробирки из центрифуги и осторожно сливают супернатант в стакан для отходов в стерильном ламинарном боксе. Слегка встряхивают пробирки, чтобы диспергировать осадок. Добавляют по 10 мл холодной среды КРМ1-1640 в каждую пробирку с клетками селезенки и переносят содержимое каждой пробирки в одну из пробирок, содержащих клетки плазмацитомы. Осаждают клетки центрифугированием при 400 в течение 7 мин, а в это время переносят чистую водяную баню на 37 °С в стерильный ламинарный бокс. Полностью удаляют супернатант пастеровской пипеткой. К осадку клеток добавляют 5 кашель щелочной среды КРМ1-1640. Пробирки слегка встряхивают, чтобы диспергировать клетки. [c.126]

Процедура гибридизации занимает 35 мин. Устанавливают секундомер на 35 мин. Последовательность операций описана в табл. 3.1. Все этапы, описанные для пробирки Л Ь 1, повторяют с пробиркой № 2. (Начало работы приходится на момент вр бмени 29.00 в таблице для пробирки № 1). Когда закончено центрифугирование пробирки № 1, ее переносят в ламинарный бокс и центрифугируют приборку № 2, которая к этому времени должна быть готова. [c.126]

Помещают пробирку № 1 в баню на 37 °С, периодически вынимая, встряхивая и вращая в горизонтальном положении. Вынимают шприц с ПЭГ нз термостата и помещают его в-ламинарный бокс. Переносят среду НРМЫ640 (20 мл) в баню. [c.127]

Помещают пробирку № 1 в штатив в ламинарном боксе ю снимают крышку. Помещают пробирку № 2 в баню на 37 °С. Пастеровскую пипетку, снабженную резиновой грушей, опускают в пробирку, содержащую 20 мл теплой среды-НРМ1-1640, находящуюся в бане. [c.127]

Два. Шприца на 10 мл с иглами № 23 (в каждом содер- жит я по 10 мл среды НР М1-1б40). Хранят в закрытой стерильной упаковке в ламинарном боксе. [c.129]

Помещают, Е(ынув из термостата, наполненный, ПЭГ шп риц в ламинарный бокс. Выни мают контейнер из термостата на 37 °С и слегка /встряхивают для перемешивания и распределения осадка клеток по коническому дну контейнера. [c.130]

Пробные тесты показали, что суспендирование клеток в щелочной среде НРМ1-1640 (или среде Дюльбекко) представляет собой решающий этап для стадии слияния. По некоторым причинам слияние лучше происходит в ш,елочной среде и при этом благодаря кратковременности инкубации клетки не повреждаются. Распределение клеток по стенкам пробирки при ее вращении тоже повышает эффективность слияния, по-видимому, потому, что это гарантирует равномерное перемешивание и тесный контакт клеток. Не возникает необходимости в использовании бани на 37 °С в ламинарном боксе, но клетки следует держать при температуре около 37 °С. [c.133]

Получив вирусный антиген, необходимо уничтожить путем йкигания все трупы животных, бумажные полотенца, перчатки инструменты одноразового пользования. Остальные инстру-Нйнты и клетки для животных стерилизуют, а ламинарный бокс тщательно дезинфицируют. [c.73]

Каплям дают высохнуть при комнатной температуре, ос тавляя стекло в ламинарном боксе, затем погружают его н 10 мин в охлажденный до 4°С ацетон. Стекло используют не посредственно или хранят при —70 °С. [c.76]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология