денатурация-ренатурация

Белки, ренатурация (отжиг) — процесс, обратный денатурации, состоит в повторном хаотическом свертывании хаотичной белковой молекулы (денатурированной) в нативную конформацию. Материальной основой для рена рацни является специфическая аминокислотная последовательность в молекуле белка, так как нативная его конформация возникает в результате взаимодействия аминокислотных остатков между собой и с растворителем. Ренатурация возможна только при обратимой денатурации. Ренатурация — процесс самопроизвольный. [c.15]

Гипохромизм важен не только сам по себе, как чрезвычайно интересное оптическое явление, но главным образом как феномен, дающий нам в руки простой и удобный метод, который можно использовать в химии нуклеиновых кислот для качественной и количественной оценки процессов ориентации — дезориентации (таких, как денатурация, ренатурация, обратимое образование гомополимерных комплексов или образование гибридных спиралей ДНК — РНК), а также для установления генетической связи между ДНК из различных организмов или из различных клеток одного и того же организма. Все, что требуется для проведения такой оценки,— это спектрофотометр или какой-нибудь другой прибор, с помощью которого можно измерять поглощение света в области 260 ммк. Первый максимум поглощения у всех исследованных видов ДНК располагается в интервале 256—265 ммк вблизи 230 ммк находится минимум, а второй максимум поглощения лежит в далекой ультрафиолетовой области, при 195 ммк. Для обычных двухцепочечных ДНК коэффициент поглощения в расчете на 1 моль фосфора колеблется в пределах 6100—6900, что составляет 18,0—19,0 на 1 мг ДНК (для РНК соответствующая величина близка к 23). [c.144]

Свертывание белковой цепи. Для познания принципов структурной организации белковых молекул чрезвычайный интерес представляет явление денатурации (ренатурации). Переход нативной конформации белка в развернутую неструктурированную форму и обратный переход флуктуирующего статистического клубка в исходную компактную трехмерную структуру есть не что иное, как процессы разрушения и формирования именно тех самых связей, которые и обусловливают структурную организацию белковой молекулы. Анализ работ, посвященных экспериментальным и теоретическим исследованиям денатурации белков, был начат в предшествующем томе [2. Ч. III]. Перед тем как продолжить эту тему, кратко напомним основные итоги уже проведенного обсуждения. [c.81]

Праймеры Р1 и Р2 — Денатурация Ренатурация [c.95]

По температуре денатурации — ренатурации можно оценить степень комплементарности нуклеиновых оснований в цепях ДНК. Для денатурации сегментов ДНК, характеризующихся высоким уровнем комплементарности. требуются соответственно большие затраты энергии. Расхождение цепей таких фрагментов ДНК происходит соответственно при более высокой температуре. Это физическое явление используется на практике для определения степени сродства (гомологии) различных нуклеиновых кислот и лежит в основе метода гибридизации (одного из главных в генной инженерии). [c.36]

Эффект умножения специфической последовательности ДНК достигается путем многократного повторения трех последовательных реакций денатурации, ренатурации (связывание праймеров) и синтеза ДНК. Смена типа реакции задается изменением температуры реакционной смеси 95 (0,5 мин) —55 (1,5 мин)— 70 °С (1 мин). Указанные температуры являются средними. Их конкретные величины определяются строением праймеров и свойствами используемой ДНК-полимеразы. [c.467]

Другим примером является инсулин, который не удается ренату- рировать, если его нативные дисульфидные связи были разрушены тиолами или если их структура менялась при ферментативных воздействиях [101]. Этот факт стимулировал поиски предшественни->ка, который был действительно обнаружен в форме проинсулина 442]. Проинсулин стабилен к действию фермента дисульфидизомеразы (рис. 4.3) в опытах по денатурации — ренатурации он самопроизвольно повторно свертывается [443]. Протеолитическое расщепление проинсулина in vivo приводит к инсулину, стабильность которо-го обеспечивается энтропийным вкладом его нативной системы связей "S—S (разд. 8.3). Лабильность структуры инсулина имеет, по-види- мо.му, физиологическое значение [444], поскольку скорость инактивации является фактором, контролирующим степень и продолжительность действия гормона. [c.183]

Разрушение и восстановление двуспиральных структур. Денатурация, ренатурация, и гибридизация. Д спиралььые структуры очень стабильны в физиологических условиях при значениях рН, близких к нейтральным, температурах около 30 — 40 и в присутствии 0,15 моля соли. Одиако увеличение или уменьшение pH, повышение температуры и добавление в среду некоторых веществ, таких, например, как мочевина, приводит к разрушению даух-цепочечной структуры, предельным случаем которого является Оена-турация, т. е. полное разделение отдельных нитей. [c.342]

Классические исследования, свидетельствующие о возможности восстановления физиологически активной конформации белковой молекулы, были проведены еще в первые десятилетия XX в. Л. Миха-элисом, М. Ансоном, А. Мирским, Г. Нейратом, Ф. Гауровицем, Л. Полингом и др. [154]. В 1945 г. Ансон постулировал обратимость реакции денатурации—ренатурации белков [155]. [c.408]

Если антитела обладают высокой аффинностью к данному гаптену, то для их выделения используют комплекс сефарозы с другим, перекрестно-реагирующим гаптеном, обладающим меньшей аффинностью к данным антителам, и его же используют для элюции антител с сорбента. Избыток гаптена удаляют диализом, а гаптен, связанный с антителами, можно удалить денатурацией в 6М гуанидин-НС1 при температуре 4°С. Белок затем ренатури-руют диализом против растворов с убывающими концентрациями гуанидина-H l, а потом проводят диализ против ЗФР. Выход антител при денатурации — ренатурации в случае антител к диги-токсину колеблется в пределах от 73 до 94% ( urd et al., 1971). [c.71]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология