Аминоэтилцистеин

Трипсин 21 расщепляет пептидные связи, в образовании которых участвуют карбоксильные группы лизина и аргинина. К гидролизу трипсином устойчивы связи лизина и аргинина с пролином (лиз—про и арг—про). Замедление гидролиза этим ферментом наблюдается тогда, когда остатки лизина и аргинина находятся рядом со свободными а-амино- и а-карбоксильными группами, а также в участках полипептидной цепи с повышенным содержанием основных аминокислот (связи ЛИЗ—лиз, арг—арг, лиз—арг и арг—лиз расщепляются только частично). Селективность расщепления трипсином можно повысить путем блокирования e-NH2-rpynn лизина (например, ангидридами янтарной, малеиновой или цитраконовой кислот) или же гуанидиновых группировок аргинина (дикетоновыми реагентами, такими как диацетил, циклогександион, фенилглиоксаль и др.). Гидролизу трипсином могут подвергаться связи, образованные и остатками цистеина, после превращения его в аминоэтилцистеин обработкой белка этиленимином. [c.140]

Специфичность обеих экэопептидаз различна. Карбоксипептидазой А, впервые использованной Ленсом в 1949 г. для определения С-концевых остатков в инсулине, отщепляются все аминокислоты, кроме Lys, Arg, Pro-и His. Карбоксипептидаза В отщепляет Lys, Arg, Orn и S-аминоэтилцистеин. Оба фермента взаимно дополняют друг друга и, как правило, применяются в комбинации. [c.368]

Метод применим также для пептидов, содержащих остатки аминоэтилцистеина и аргинина. Последние предварительно превращаются в остатки орнитина с помощью гидразинолиза. [c.65]

Аналогорезистентные прототрофные продуценты лизина. Их получают, используя в качестве селективного метода аналог лизина — аминоэтилцистеин (АЭЦ), который совместно с треонином ингибирует рост коринебактерий. Устойчивые к АЭЦ и треонину мутанты имеют генетически измененную АК, которая становится нечувствительной к согласованному ингибированию лизином и треонином. Такие мутанты накапливают до 15 г/л лизина. [c.26]

Специфичность. При изучении специфичности фермента было показано, что гидролиз проходит по N-концевой пептидной связи остатков лизина и аминоэтилцистеина (Лес) типа -X-Lys-и -Х-Аес-, даже если Х = Рго. Расщепление связи -Pro-Lys наблюдали при обработке инсулина и других субстратов [16, 36]. Было также показано, что пептидные связи, содержащие вблизи остатков лизина кислотные остатки, устойчивы к действию фермента. В некоторых случаях наблюдается гидролиз С-концевой пептидной связи аргинина -Arg-X. Степень гидролиза по этой связи возрастает, если X = Leu или Пе, хотя не все фрагменты этого типа подвергаются гидролизу. [c.154]

Получение изотиоцианатного стекла. Для синтеза изо-тиоцианатаминопропильного носителя (ИТЦ-АПС), к которому можно присоединять пептиды, содержащие остатки лизина и аминоэтилцистеина, аминогруппы аминопропильного стекла активируют п-фенилендиизотиоцианатом (ДИТЦ) (рис. 12.2) [43, 61]. [c.385]

Пептиды, содержащие остатки лизина, расположенные как внутри цепи, так и на С-конце полипептида, а также пептиды, содержащие аминоэтилцистеин, могут быть эффективно присоединены своими свободными аминогруппами к смолам из основе полистирола или к аминопропильным стеклам (АПС или р-АПС) при помощи ДИТЦ (рис. 12 3). Разновидностью ДИТЦ-метода является использование бифункционального реагента — лактона N- ( -изотиоцианатобензоил)-оь-гомосерин для присоединения лизилсодержащих пептидов к носителя.м на основе стекла, содержащим аминогруппы. Сообщается о высоких выходах присоединения [21]. [c.386]

Ограничения. Метод применим только к пептидам, имеющим остатки лизина или аминоэтилцистеина. Пептиды, имеющие эти аминокислоты внутри цепи, можно анализировать только до указанных остатков, являющихся точками присоединения. Метод нельзя рекомендовать для аргипилсодержащих пептидов. [c.389]

Первоначально методика включала нагревание белка с гидразином при 100 °С в течение 10 ч [1]. При этих условиях цистин и цистеин (но не цистеиновая кислота, 5-карбоксиметил-цистеин или S-аминоэтилцистеин) полностью разрушаются [11] Arg разрушается и частично превращается в Огп и гуанидин [65]. Многие другие остатки частично разрушаются из-за высокой температуры реакции [11, 12]. Сообщалось, что добавление кислого катализатора (сульфат гидразина) к безводному гидразину позволяет проводить реакцию в гораздо более мягких условиях (60—80 °С) [46] при этом повышается выход С-концевых аминокислот. Для улучшения выхода использовали Н+-форму ионообменной смолы амберлит G-50 [12]. Показано, что скорости отщепления различных С-концевых аминокислот, а так- [c.493]

С целью расширения области применения фермент.ш разработано несколь-жо приемов. Например, превращение остатков цистенна в S-аминоэтилцистеино-iBbie остатки прн действии этилеиимина делает возможным расщепление трипсином связей этих остатков по карбонильным группам. [c.180]

Боковая цепь S-аминоэтилцистеина схожа с боковой цепью лизина единственное различие заключается в том, что в молекуле S-аминоэтилци-стеина вместо метиленовой группы стоит атом серы. [c.225]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология