Метионин нингидринная реакция

Предложено два микрометода (нингидриновый и нитропруссид-ный) количественного определения метионина, меченного Оба метода позволяют определять метионин с точностью 2—3%. По простоте приемов и сравнительной точности результатов определения метионина нитропруссидный метод предпочтительнее нингидринового. Реакции с нингидрином и нитропруссидом натрия могут быть использованы для испытания на подлинность метионина, меченного S . Методы внедрены в практику производственной лаборатории. [c.216]

Для анализа предложено превращать аминокислоты в соответствующие альдегиды (окисление нингидрином) или декарбо-ксилировать до аминов. Реакция окисления при.менена при определении аланина, 2-ами-номасляной к-ты, валина, лейцина, изолей-ципа, норлейцина, метионина и фенилаланина. [c.133]

Наиболее общим методом определения концентрации пептидов является колориметрия продуктов реакции с нингидрином [2]. Это один из наиболее чувствительных колориметрических методов. Для обнаружения аминокислот и пептидов разработаны как обычный, так и полностью автоматизированный варианты, причем нингидриновый реагент не вызывает коррозии и его можно подавать обычным микронасосом. Реакция идет по свободным аминогруппам, но в некоторых случаях хромофор образуется с низким выходом. Данные по окрашиванию дипептидов можно найти в работе [3]. У всех дипептидов, содержащих в качестве Ы-концевой аминокислоты аргинин, треонин, серин, глутаминовую кислоту, глицин, фенилаланин, метионин, лейцин и тирозин, интенсивность окраски составляет 1,6-10 у лейцина эта величина составляет 1,7-10 . У дипептидов с М-концевым лизином и аспарагиновой кислотой интенсивность окраски несколько выше (на 20 и 29% соответственно), а дипептиды с Ы-концевым гистидином и триптофаном проявляются несколько слабее (42 и 67% соответственно от средней интенсивности). Дипептиды с М-концевым пролином, валином и изолейцином окрашиваются очень слабо [2,7 6,4 и 8,5% от средней (1,6- 10 ) интенсивности]. [c.391]

Реакции с нингидрином и с нитропруссидом натрия могут быть использованы для установления подлинности метионина, меченного [c.216]

Дженкинсон и Тинслей [19] идентифицировали с помощью хроматографии на бумаге состав аминокислот, гидролизат которых был получен в ходе изучения аминокислот растительного происхождения, выделенных из компоста. Десять мл гидролизата, содержавшего приблизительно 1 мг связанного азота, запаривали досуха при пониженном давлении, растворяли в 5 мл воды и снова упаривали досуха. Остаток растворяли в 1,5 мл воды и центрифугировали. Осветвленную жидкость в количестве 0,04 мл наносили на бумагу Ватман № 1. Разделение проводили элюентом, предложенным Вольфом [20]. Хроматограмму проявляли, окуная лист в 0,2%-ный раствор нингидрина в ацетоне. Были идентифицированы следующие аминокислоты цистеиновая, аспарагиновая, глутаминовая, лизин, аргинин, глицин, гистидин, серии, аланин, тирозин, пролин, валин, треонин, изолейцин, лейцин и фенилаланин. Метионин не поддавался определению, поскольку его трудно было отделить от глицина в описанных системах растворителей. Метио-нин-5-оксид тоже не отделялся от валина. Хроматограммы опускали в 0,1%-ный раствор изатина в ацетоне для обнаружения про-лина и подтверждения отсутствия оксипролина. Детектирование и определение содержания пептида с остатком лизина в середине цепи проводили с помощью 2,4-динитрофторбензола [21]. Эта реакция протекает, поскольку е-аминогруппа, в отличие от а-амино-группы лизина, свободна и может вступать в реакцию. [c.306]

В работе Халленгера [9] описано получение /-2-амино-4-(ме-тилтио-С )-масляной кислоты по этому методу с изотопным выходом 48%. При проявлении бумажной хроматограммы 80%-ным фенолом или смесью бутиловый спирт — уксусная кислота — вода получаются два пятна, окрашиваемых нингидрином. Они соответствуют метионину и его сульфоокиси, которая получается в результате реакции окисления в процессе хроматографирования. Как d-, так и /-формы получаются из соответствующих оптически активных исходных веществ в 1 % -ном водном растворе [а]о +7,75° и —7,6°. Полученные вещества анализировались в виде пикратов. [c.211]

Было найдено, что точность определения метионина зависит главным образом от качества нингидрина и от точности взятия навесок метионина. Соли аммония мешают реакции. Для анализа метионина берется чистый пингидрин (температура плавления 239-240 С). [c.213]

Наносят на бумагу, как описано выше, капли растворов аланина, метионина, цистина, тирозина и лролина (двойное количество) высушивают бумагу п слегка опрыскивают водным раствором, содержащим 1 % пер.манганата калия и карбоната натрия. На розовом фоне сразу же появляются желтые пятна. Их очерчивают карандашом, и бумагу немедленно отбеливают сернистым ангидридом, помещая ее на короткое время под часовое стекло -над стаканом, в котором проходит реакция бисульфита патрия с соляно кислотой. После удаления избытка ЗОг бумагу опрыскивают раствором нингидрина с коллидином и высушивают. Перманганат окисляет атомы серы метионина и цистина, а также фенольную группу тирозина, но реакция восстановления ЗОг указывает на то, что исходные ами нокиелоты все же остаются. Природа желтого п 11 г м 6 Н та неизвестна. [c.170]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология