Синтезы полидезоксирибонуклеотидов

Решение научной проблемы (например, такой, как создание твердофазного метода для быстрого автоматического синтеза полипептидов) часто имеет большие практические и научные последствия. Например, несколько видоизмененная твердофазная методика уже сейчас применяется для синтеза полидезоксирибонуклеотидов с заданной последовательностью оснований. Значение этого трудно переоценить. Такие синтезы не только способствуют познанию основных генетических механизмов они также показывают, что скоро станет возможным получение синтетических генов, которые можно будет использовать в качестве дополнения к естественному набору генов данного организма. И хотя сейчас это звучит как научная фантазия, научные применения и социальные последствия такого синтеза являются предметом серьезного обсуждения среди биохимиков. [c.405]

Химический синтез ДНК — система методических приемов, ведущих к химическому синтезу межнуклеотидных связей, типичных для природных нуклеиновых кислот. Методы химического синтеза ДНК разработаны Корана с сотрудниками. При помощи дициклогексилкарбодиимида или ароматического сульфанилхлорида они синтезировали фосфодиэфирные связи между предварительно защищенными нуклеозид-ными компонентами, в результате чего получили возможность осуществить ступенчатый синтез полидезоксирибонуклеотидов с заранее заданной последовательностью нуклеотидов. Опыты Ко.рана увенчались блестящим успехом — был синтезирован фрагмент двухцепочечной ДНК, построенный из 77 пар азотистых оснований и представлявший собой ген, кодировавший тРНК . Этот синтетический продукт пока что наибольший фрагмент ДНК с известной последовательностью нуклеотидов. [c.86]

Важное значение имел открытый Очоа и Гринберг-Манаго ферментативный метод синтеза полирибонуклеотидов из нуклеотида и аналогичный синтез полидезоксирибонуклеотидов из дезоксинуклеозид-5 -три-фосфатов, осуществленный Корнбергом. [c.681]

В настоящее время предложен также новый вариант блочного метода синтеза полидезоксирибонуклеотидов, содержащих 5 -фосфомоноэфирную группу. Основной принцип его состоит в том, что длина цени должна приблизительно удваиваться на каждой ступени конденсации, в которую вводят соответствующим образом защищенные олигонуклеотиды с 5 -фосфо-моноэфирной группой Сущность этого метода может быть продемонстрирована схематически на примере синтеза тетракозадезоксирибо-нуклеотида [c.403]

СИНТЕЗ ПОЛИДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕОТИДОВ ПУТЕМ ПОЛИМЕРИЗАЦИИ [c.404]

ПОЛИДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕОТИД-СИНТЕТАЗЫ, ферменты класса трансфераз, катализирующие образование фосфодиэфирной связи при синтезе ДНК [c.625]

В ходе Р. рост цеш1 осуществляется благодаря взаимод. дезоксирибонуклеозидтрифосфата с З -ОН концевым нуклеотидом уже построенной части ДНК при этом отщепляется ш1рофосфат и образуется фосфодиэфирная связь. Рост полинуклеотидной цепи (рис. 2) идет только с ее З -конца, т. е. в направлении 5 3 (см. Нуклеиновые кислоты). Фермент, катализирующий эту р-цшо,-ДНК-полиме-раза (см. Полидезоксирибонуклеотид-синтетазы)-пе способен начать матричный синтез на одноцепочечной ДНК, если нет хотя бы олигонуклеотидного биспирального участка (т. наз, затравочного ол ггонуклеотида) комплементарного матрице затравочным олигонуклеотидом во мн. случаях является не ДНК, а РНК. [c.252]

Большие успехи в синтезе олиго- и полидезоксирибонуклеотидов в сочетании со знанием генетического кода позволяют химически синтензировать гены для произвольного белка с известной первичной структурой. Эти гены могут быть использованы для синтеза этого белка бактериями или клеточными культурами после введения его в клетки методами генетической инженерии (см. 7.11). [c.174]

Олиго- и полидезоксирибонуклеотиды. В ряду олигодезоксири-бонуклеотидов ферментативные методы синтеза имеют весьма огра- [c.100]

Источник РНК, т. е. место, где происходит синтез РНК, еще не идентифицирован, но все имеющиеся данные показывают, что рибосомальная, матричная и транспортная РНК синтезируются с участием ДНК- Фермент РНК-полимераза, используя ДНК в качестве шаблона и четыре трифосфорибонуклеотида (АТФ, ГТФ, ЦТФ и УТФ) в качестве субстратов, ведет синтез полирибонуклеотидов, имеющих последовательность оснований, комплементарную последовательность шаблонной ДНК. Таким образом, генетическая информация передается по наследству в форме полидезоксирибонуклеотидов, а затем переписывается на полирибонуклеотиды, после чего переносится на полипептиды. [c.393]

Наряду с полирибонуклеотидами важно было изучить также модельные полидезоксирибонуклеотиды. Для них долгое время не удавался ферментативный синтез. Поэтому здесь первые успехи принесла органическая химия. Корана 1удалось, применяя создан-ный им метод конденсации мононуклеотидов, получить целый ряд олигонуклеотидов до степени полимеризации, равной 15. Для этого нуклеотиды приводились в соприкосновение со специальным реагентом, дициклогексилкарбодиимидом, ведущим конденсацию с отнятием воды [c.224]

Оказалось, что при использовании в качестве активирующего агента хлорангидридов ароматических сульфокислот выход тетрануклеотида повысился до 65—80%, гексануклеотида — до 38—57%, октануклеотида — до 24—38%. Достигнутые успехи позволили распространить данный метод на синтез более длинных полидезоксирибонуклеотидов со специфической тетрануклеотидной последовательностью (1-(ТрАрСрТ). Для этой цели используют защищенные тетрануклеотидные блоки. Например, синтез гексадекануклеотида осуществлен по схеме [c.402]

Синтез блочным методом полидезоксирибонуклеотидов, содержащих двадцать мононуклеотидных единиц, иллюстрирует возможности этого метода и является значительным достижением в области химического синтеза полинуклеотидов. [c.403]

Согласно одному из вариантов, полидезоксирибонуклеотиды с повторяющимися нуклеотидными последовательностями, полученные с помощью известных методов химического синтеза, используют как матрицу в системе ДНК-полимеразы В результате образуются двухцепочечные высокомолекулярные ДНК-подобные полимеры, содержащие те же самые повторяющиеся нуклеотидные последовательности, которые имелись в матричном полидезоксирибонуклеотиде. [c.449]

При синтезе полирибонуклеотидов с известными нуклеотидными последовательностями в системе РНК-полимеразы можно также непосредственно использовать в качестве матрицы короткоцепные полидезоксирибонуклеотиды, полученные химическими методами, без предварительной полимеризации их ДНК-полимеразой [c.449]

Учитывая, что ДНК-полимераза наращивает полидезоксирибонуклеотид только в одном направлении, изобразите на схеме вилки репликации по какой цепи пойдет непрерывный, а по какой — прерывистый синтез комплементарной цепи [c.144]

Последовательность нуклеотидов в кодонах удалось определить при помощи двух методов. Г. Корана с сотрудниками разработал метод химического синтеза ДНК-подобных полимеров с заданной последовательностью нуклеотидов. Применяя такие полидезоксирибонуклеотиды в качестве матрицы для синтеза РНК при помощи ДНК-зависимой РНК-полимеразы, можно было получить РНК с заранее известной последовательностью и использовать ее в бесклеточной системе белкового синтеза. [c.394]

На каждой из одноцепочечных цепей репликативной вилки происходит синтез новых цепей, но не одинаково. Различия связаны с тем, что матричные цепи расположены антипараллельно, а синтез новых цепей возможен только с их З -конца. Рассмотрим сначала синтез той цепи, которую называют лидирующей (см. рис. 4.5). Прежде всего, в месте расхождения цепей образуется затравка (праймер), которая представляет собой короткий (около 10 нуклеотидов) полирибонук-леотид (РНК, не полидезоксирибонуклеотид), комплементарный матричной цепи. Синтез затравки осуществляет фермент праймаза (ДНК-полимераза а). Затем З -конец затравки начинает расти уже за счет присоединения дезоксирибонуклео-тидных остатков при участии ДНК-полимеразы 6. Удлинение ведущей цепи происходит непрерывно по мере перемещения репликативного комплекса вдоль матричной цепи ДНК. [c.122]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология