Молекулярный вес определение методом гельфильтрации

Наряду с сефадексом для гельфильтрации успешно применяются другие материалы, такие как агар и синтетические гидрофильные полимеры, например, полиакриламидные гели — биогели, а также гидрофобные полимеры, набухающие в органических растворителях и используемые для фракционирования гидрофобных полимеров. Весьма удачным для белковой физико-химии оказалось использование агара. Пористость агарового геля зависит от концентрации агара. С уменьшением его концентрации в геле доступность внутренних частей зерен для макромолекул увеличивается. На низкоконцентрированных гелях (2,5—5%) имеется возможность разделять белки с молекулярным весом вплоть до миллионов [25]. Так, гемоцианины, тироглобулин, у-глобу-лин человека, сывороточный альбумин, а- и р-лактоглобулин обладают существенно различными скоростями перемещения на колонке из агара. Стандартизация метода гельфильтрации позволяет его использовать не только для фракционирования белков, но и для определения молекулярного веса в весьма простом хроматографическом эксперименте. Интересной областью приложения гельфильтрации на сефадексе явилось определение молекулярного веса мономерных форм белков, способных к ассоциации. Как известно, полная диссоциация подобных комплексов наблюдается при столь низких концентрациях растворов, когда использование [c.204]

Таким образом, у микроорганизмов описаны также эстеразы, молекулярные веса которых имеют величины, характерные для эстераз животного происхождения (Krish, 1971). Кроме того, не исключено, что при определении молекулярного веса методом гельфильтрации, как это было сделано в цитированных выше работах, может происходить диссоциация молекул фермента на активные субъединицы, как это было обнаружено при исследовании животных эстераз (Krish, 1971). [c.32]

Относительная молекулярная масса выделенного кининогена, определенная методом гельфильтрации через сефадекс G-200, равна 54000—56000 изоэлектрическая точка данного белка лежит в пределах pH 3,15—3,5 (Т. П. Егорова, Т. С. Пасхина, 1967). [c.180]

Определение молекулярного веса танин-ацилгидролазы, полученной при культивировании Asp. oryzae, при помощи метода гельфильтрации на сефадексах G-75, G-100 и G-200, показало, что он равен приблизительно 200 000 (libu hi etal., 1968). [c.192]

В последние годы для разделения белков с различными молекулярными весами широко применяется метод хроматографии на сефадексе (гельфильтрация). Сефадекс представляет собой мелкозернистый порошок, изготовленный из полисахарида декстрана, углеводные цепочки которого дополнительно соединены мостиками глицерина. В результате каждое зерно сефадекса представляет собой клубок из полисахаридных цепей, внутрь которого могут проходить вещества с определенным для каждого типа сефадекса молекулярным весом. При фильтровании раствора, содержащего смесь бел- [c.55]

Методов седиментации и светорассеяния не представляется возможным. Идея нового метода основана на том экспериментальном факте, что подвижность переднего фронта зоны а-химотриисино-гена при гельфильтрации на сефадексе G-100 по методу фронтальной хроматографии оказалась линейно зависящей от среднего молекулярного веса ассоциированного комплекса. Экстраполяция этой линейной зависимости к бесконечному разбавлению (малой подвижности) дает возможность вычислить подвижность, а по ней и молекулярный вес мономерного компонента. Для а-химотрип-синогена эти данные совпали с результатами химического определения молекулярного веса. [c.205]

Метод тонкослойной гельфильтрации может быть использован также для приблизительного определения молекулярного веса веществ, имеющихся в небольшом количестве ( 0,1 мг белка) [36, 37]. Виланд и Детерманн [38] применили градиентную хроматографию на слое ДЕАЕ-сефадекса для разделения энзимов молочнокислых дегидрогеназ и испытания их однородности. [c.317]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология