Полисахарид декстран

Рис. 4-46. Три типа матриксов, используемых для хроматографии. При ионообменной хроматографии (А) нерастворимый матрикс содержит ионы, задерживающие молекулы с противоположным зарядом. Для разделения молекул используются следующие матриксы диэтиламиноэтилцеллюлоза (ДЭАЭ-целлюлоза) - заряжена положительно карбоксиметилцеллюлоза (КМ-целлюлоза) и фосфоцеллюлоза - заряжены отрицательно. Силы взаимодействия между молекулами в растворе и ионообменником определяются ионной силой и pH элюирующего раствора, которые для достижения эффективного разделения можно варьировать определенным образом (как на рис. 4-47). При хроматографии по методу гель-фильтрапии (Б) матрикс инертен, но содержит поры. Низкомолекулярные соединения проникают внутрь частиц матрикса. Оказавшись при этом в относительно большем объеме, они проходят через колонку медленнее. В качестве матрикса можно использовать зерна поперечно-сшитого полисахарида (декстран или агароза). Поскольку в продаже имеются полисахариды с самым различным размером пор, их можно использовать для фракционирования молекул с молекулярной массой от 500 до 5 х 10 дальтон. При аффинной хроматографии (В) используется нерастворимый матрикс, ковалентно связанный со специфичными лигандами (антителами или субстратом ферментов), которые присоединяют определенный белок. Связываемые иммобилизованным субстратом молекулы фермента можно элюировать концентрированными растворами субстрата в свободной форме, а молекулы, связанные с иммобилизованными антителами, можно элюировать за счет диссоциации комплекса антитело антиген концентрированными растворами соли или растворами низкого или высокого pH. Однократная хроматография на такой колонке позволяет

В настоящее время осуществляется промышленное производство ряда микробных полисахаридов [декстран, ксантан, геллановая смола, занфло (2ап[1о) и политран (Ро1у1гап)]. Получение многих других находится на стадии разработки. В следующем разделе описаны основные свойства полисахаридов микробного происхождения и перспективы их применения. [c.222]

Наконец, разделение может проводиться по размеру частиц с использованием ситового эффекта. Молекулярные сита представляют собой материалы с порами определенного размера или с порами, размер ко4ч)рых находится в некотором определенном не очень широком диапазоне. Вещества, молекулы которых по размеру меньше, чем размеры пор молекулярного сита, при пропускании через колонку с таким ситом задерживаются на некоторое время в этих порах и движутся медленнее, чем большие молекулы, которые обтекают частички сита и выходят в свободном объёме раствора. В качестве молекулярных сит в биохимии наиболее широкое применение нашли так называемые сефадексы, представляющие собой полисахарид декстран, обработанный эпихлоргидрином, в результате чего слабо разветвленные цепи декстрана оказываются соединены (сшиты) трехуглеродными мостиками [c.235]

Метод разделения на активированном угле, покрытом декст-раном. Активированный уголь обладает широко используемым на практике свойством адсорбировать небольшие молекулы. Адсорбируются также белки и комплекс Ат — Аг, хотя медленнее и в меньшей степени. Однако если уголь покрыть сшитым полисахаридом декстраном (этот материал является молекулярным ситом, в которое не могут проникать большие молекулы, гл. 8), то ни Ат, ни Ат — Аг не будут адсорбироваться. Следовательно, если к смеси, содержащей свободный Аг и Ат—Аг, прибавить уголь, покрытый декстраном, и смесь немедленно центрифугировать, то радиоактивность, не связанная с Ат (т. е. Аг ), оказывается в гранулах угля, а радиоактивность, отвечающая Ат —Аг, остается в супернатанте. Схема действия этого быстрого и удобного метода изображена на рис. 10-8, А. [c.259]

Сефадекс представляет собой разветвленный полисахарид (декстран), имеющий структуру в виде трехмерной сети. Гидрофильность сефадекса определяется большим количеством полярных групп—ОН . В воде сефадекс вследствие большой гидрофильности значитель но набухает, образуя гель. В набухшем геле можно различать два типа водной фазы одна — внутри гранул геля и другая — окружающая гранулы, т. е. внешняя водная фаза. [c.131]

Водорастворимые продукты клеточного метаболизма полимерной природы (чаще всего белки) проявляют, как правило, свойства полиэлектролитов. Добавки многозарядных ионов или катионов полиэлектролитов могут в этом случае приводить к образованию ПЭК, что, в свою очередь, изменяет флокулирующее действие добавленных реагентов. В работе [134] показано, что расход полиэтиленимина или хитозана, необходимый для достижения одной и той же степени осаждения суспензии, для отмытых (обработкой дважды физиологическим раствором и ресуспендированных в растворе 0,1 моль/л хлорида натрия) клеток Е.соИ существенно меньще, чем для исходной культуральной жидкости (рис. 5.8). При этом возможно взаимодействие между реагентом и веществами, формирующими поверхность и слизистую оболочку клеток, а также компонентами среды и продуктами метаболизма. Эти взаимодействия приводят к дополнительному расходу флокулянта, как это обнаружено на примере отмытых клеток Е.соИ, предварительно обработанных белками (желатина, овальбумин) или полисахаридами (декстран), примешивающимися для моделирования слизистой оболочки клеток [134]. [c.105]

Есть все основания предполагать, что благодаря новым требованиям, предъявляемым к химии целлюлозы и других полисахаридов (декстран, крахмал) со стороны различных развивающихся отраслей промышленности, медицины и биологии, такое положение будет в ближайшие годы в различных странах и, в первую очередь, в Советском Союзе изменено. [c.13]

Популяция 1 -рецепторов состоит из миллионов вариантов специфичностей, поэтому ддя каждого конкретного антигена всегда существует не единственный клон В-лим( цитов, способный связать его. Обычно число таких клонов, связывающих антиген, насчитывает около 100, их рецепторы в широких пределах различаются по степени сродства к данному антигену (рис. 14). Число клонов, связывающих малые гаптены (например, ДНФ), может быть значительно больше 100. Напротив, вариантов 1 -рецепторов и антител, реагирующих с полисахаридом декстраном, по-видимому, не более 10. [c.40]

В полимерных цепях, находящихся в растянутых неупорядоченных конформациях, должны осуществляться множественные сег-мент-сегментные контакты при этом проявляются некоторые типичные свойства таких взаимодействий. Энтропия смещения растворов двух различных полимеров зависит в первом приближении от числа участвующих в этом процессе молекул и, следовательно, не зависит от молекулярной массы. Энергия же взаимодействия между двумя полимерами в смеси зависит от числа сегмент-сег-ментных контактов и для данного числа молекул должна расти с увеличением их молекулярной массы. Поэтому значение энтропийного члена возрастает по мере увеличения молекулярной массы и поведение полимеров в смеси определяется энергиями взаимодействия, даже когда сегмент-сегментные контакты непродолжительны и энергии их малы. Если взаимодействия между сходными полимерными сегментами более выгодны, чем между несходными, два водных раствора могут разделиться на четкие фазы, которые ведут себя как две несмещивающиеся жидкости. Такое явление часто называют несовместимостью полимеров . Если же взаимодействие между несходными сегментами выгоднее, чем между сходными, то возможно, что два полимера образуют одну общую фазу, подобную жидкости или твердому веществу. Такое явление часто называют комплексной коацервацией . Несовместимость полимеров может оказаться полезной, например, для получения двух не-смешивающихся водных фаз при биохимических разделениях, как в хорошо известной методике выделения плазматических мембран, где в качестве одной из фаз используют полисахарид декстран [22]. На основе комплексных коацерватов полисахаридов и белков, имеющих противоположные заряды (в особенности гуммиарабика и желатины) создана современная технология микроинкапсулирования. [c.291]

Кровезаменители противошокового действия могут относиться к различным классам иолимеров. В числе применяемых или испытываемых природные полимеры — полисахариды (декстран, крахмал), белки (желатина, пектины) синтетические — поли-К-винилпирро-лидон, поливиниловый спирт, полиметакриламид, а также их производные и сополимеры. Средняя молекулярная масса полимеров, применяемых для лечения кровоиотери и шока, может варьировать в пределах 20—70 тыс. [c.370]

Срубленный тростник контаминируется Leu onosto mesenteroides — бактерией, способствующей скисанию и преобразованию сахарозы в полисахарид декстран (резиноподобное вещество, создающее проблемы при экстракции сахара и ухудшающее качество мелассы). [c.337]

Сефадокс представляет собой полисахарид декстран, цепи которого соединены поперечными связями, образуя молекулярное сито . Чем больше поперечных сшивок, тем меньше размеры ячеек молекулярного сита . Молекулы небольших размеров диффундируют внутрь набухших гранул, а крупные белковые молекулы проходят сквозь колонку. Следует отметить, что при гель-фильтрации на сефадексах может происходить и частичное фракционирование белков. [c.199]

Открытие гель-хроматографии ( ксклю-зионной хроматографии). Разделение смеси глюкозы и фракций полисахаридов (декстранов), различающихся молекулярной массой, на слое гидрофильного геля (сефадекса). Подвижная фаза — вода [18] [c.10]

Рис. 9.18. Хроматограмма смеси олигосахаридов с различной степенью полимеризации (СП 1 7) в присутствии полисахарида. Колонка с сорбентом Диабонд амин на 81-600, 150 х 4 мм детектор — рефрактометр. 1 — ин-жекционный пик 2 — полисахарид (декстран, М = 30000) 3-9 — олигосахариды со степенью полимеризации от 1 до 7

ЛИЧНЫМ полимерам с одной и той же молекулярной массой, а именно глобулярному белку (альбумину), разветвленному полисахариду (декстрану) и линейному гибкоцепочечному полимеру (полиэтилен-гликолю), будет получено три совершенно разных значения отсечения. Так, если раствор содержит два полимера с большим различием молекуярных масс, например 7-глобулин с М = 150 000 и альбумин с М = 69 000, отсечение более низкомолекулярного полимера оказывается зависимым от присутствия высокомолекулярного компонента из-за проявления эффектов, связанных с пограничными слоями (адсорбция на поверхности). Высокомолекулярный компонент будет полностью задерживаться, а образующийся при этом слой полимера будет значительно влиять на скорость переноса низкомолекулярного компонента. Не исключено также, что высокомолекулярный компонент просто забьет поры. То есть будет иметь место значительное взаимное влияние разделяемых полимеров. [c.192]

В основе данного метода очистки кислой а-глюкозидазы лежит способность этого фермента гидролизировать а-1,6-глюкозидную связь в полисахариде декстране (Е. Л. Розенфельд и др., 1959). Благодаря этому при гельфильтрации через сефадекс кислая а-глюкозидаза не элюируется согласно своей относительной молекулярной массе, а оказывается связанной с декстрановым гелем сефадекса за счет образования с последним фер-мент-субстратного комплекса (Bruni е. а., 1969). После элюции всех балластных белков освобождение связанной с сефадексом кислой а-глюкозидазы осуществляют введением конкурентного ингибитора фермента — метил-a-D-глюкопиранозида, приводящего к быстрой элюции а-глюкозидазы в небольшом элюцконном объеме (Д. М. Беленький, Е. Л. Розенфельд, 1971). [c.106]

В этом виде хроматографии вещества разделяют в соответствии с размсра-мя и формой их молекул. Если гранулы различных пористых нерастворимых материалов, таких, как синтетические смолы, пористое стекло или полисахариды (декстран или агароза), суспендировать в подходящем растворителе, то образуются две фазы растворителя (одна внутри, а другая вне гранул), как показано с-хематически на рнс. 5.19. Колонка, наполненная такими гранулами, дей- [c.155]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология