Вторичные изоферменты

Ферменты 1, 2 и 3 — это истинные изоферменты, их синтез контролируется определенными участками ДНК ферменты 4, 5 и 6 являются вторичными изоферментами, образовавшимися в результате посттрансляционных модификаций продукта трансляции одного гена. [c.108]

ЧТО модификация ферментов в процессе старения происходит не случайным образом, поскольку это привело бы к появлению набора ферментов с разными свойствами. На первых этапах, по-видимому, происходят совсем незначительные, едва заметные изменения ферментного белка. Интересно отметить, что большая часть вторичных изоферментов, описанных к настоящему времени, обнаружена в эритроцитах [1790]. Эти клетки нетипичны в том отношении, что после их созревания синтеа белка практически прекращается и находящиеся в них белки должны обладать какой-то особой кинетикой продолжения жизни , чтобы обеспечить клеточный метаболизм [3023]. В других тканях скорость деградации ферментов, по-видимому, значительно выше, и используемые методы не позволяют выявить промежуточные формы, которые могут быть идентифицированы как изоферменты. [c.120]

Клинические проявления наследственного дефекта фермента тесно связаны с нормальной активностью фермента в различных тканях. В одном организме и даже в отдельной клетке может существовать несколько форм данного фермента [120]. Это так называемые изоферменты. Их существование можно объяснить как негенетическими причинами (вторичные изменения фермента в тканях), так и генетическими (наличием разных генетических локусов, кодирующих полипептиды с более или ме- [c.19]

Наследственные повреждения ферментов - результат мутаций в отдельных генах. Именно поэтому обычно повреждается только один из имеющихся в организме изоферментов данной группы. Если изменения затрагивают более чем один изофермент, то скорее всего имеется общая для них полипептидная цепь или происходя г какие-то вторичные изменения структуры фермента. [c.20]

Появление вторичных изоферментов (группы 4—6 в табл. 12.4) может быть обусловлено рядом причин. Они образуются в результате модификации одиночной полипептидной цепи, причем эта модификация может иметь, а может и не иметь биологическое значение. Например, свойства нескольких ферментов, участвующих в обмене гликогена, зависят от того, в каком состоянии они находятся, фосфорилированном или де-фосфорилированном [818]. В результате гликоген-фосфорилаза,, киназа фосфорилазы и гликоген-синтаза существуют по крайней мере в двух формах — фосфорилированной и дефосфорили-рованной — и различаются по каталитической активности и свойствам эти группы ферментов должны быть включены в группу 4а. Ферменты, которые могут находиться в разных конформациях, например в результате аллостерических превращений, должны быть отнесены к группе 6, хотя специфика этих взаимопревращений и легкость, с какой они происходят, крайне затрудняет разделение таких форм. Конформационные изменения, по-видимому, совершенно необходимы для функционирования большинства ферментов они участвуют в осуществлении каталитического и регуляторного действия, но предположение о том, что ферменты могут находиться в более чем одной стабильной конформации, не связанной с катализом, не получило особого признания. Изоферменты этого типа, так называемые конформеры , пытались обнаружить с помощью метода обратимой денатурации [1273], и обычно эти попытки оказывались безуспешными. Тем не менее можно привести пример фермента такого рода — это кислая фосфатаза эритроцитов [1790]. [c.113]

Иногда таким способом образуется большое число четко различимых изоферментов так, при электрофоретическом разделении пуриннуклеозидфосфорилазы эритроцитов на электро-.фореграмме выявляется до семи симметрично расположенных компонентов [1790]. Все эти компоненты обладают ферментативной активностью, но когда активность определяют с большой точностью, иногда удается обнаружить постепенное снижение удельной активности. Такое снижение наблюдается, в частности, для глюкозо-6-фосфат— дегидрогеназы эритроцитов человека при измерении отношения активности ферментативной к иммунологической активности, причем оно сопровождается появлением новых, более отрицательно заряженных форм фермента, которые, вероятно, поэтому обладают более низкой активностью [2292]. Такой способ образования вторичных изоферментов может быть просто связан с начальными этапами деградации фермента, предшествующими полной потере активности. [c.116]

Таким образом, выявлен выраженный фотопротекторный эффект серотонина по отношению к молекулам изоферментов Н , НдМ, Н2М2 ЛДГ эритроцитов человека, обусловленный образованием комплекса ЛДГ — серотонин, формирование которого затрагивает вторичную структуру белка. Возможно, комплексиро-вание биогенного амина с молекулами фермента происходит и в растворе. Однако полученные результаты не исключают и вероятность дезактивации серотонином АФК, в том числе [c.194]

В нервной ткани, таким образом, существует тесная взаимосвязь между двумя системами вторичных посредников, Са и цАМФ, осу1дествляемая посредством цАМФ- и Са-зависимо-го фосфорилирования-дефосфорилирования различных изоферментов фосфодиэстеразы цАМФ. Эта взаимосвязь может модулироваться также различным сродством к Са аденилатциклазы, фосфодиэстеразы, протеинкиназы и фосфатазы. Так, аденилатциклаза мозга активируется гораздо более низкими концентрациями Са , чем фосфодиэстераза. [c.346]

Для локализации изоферментов пероксидаз после их разделения методом ИЭФ была разработана [288] методика отпечатков на бумаге . Фильтровальную бумагу вначале пропитывают буфером и высушивают при комнатной температуре. На этой стадии следует использовать нелетучий буфер, обладающий достаточно большой буферной емкостью, чтобы он мог поддерживать постоянное, значение pH вдоль всего отпечатка, противодействуя буферной емкости амфолитов, присутствующих в тонком слое поддерживающей среды, в которой проводят ИЭФ. Следовательно, оптимальная концентрация буфера, используемого для пропитывания бумаги, зависит от ее толщины. Для насыщения бумаги ватман ЗММ применяли буфер, содержащий 0,1 М цитрат и 0,2 М фосфат, а для бумаги шлейхер-шуль 2043 Ь — тот же буфер, но в два раза более концентрированный. Пропитанная буфером бумага после высушивания может храниться в течение нескольких недель. Перед использованием ее пропитывают смесью первичного и вторичного субстратов, растворенных в метаноле до конечной концентрации 1—2%. Затем эту бумагу накладывают на тонкий слой поддерживающей среды, в которой проводилось ИЭФ. Полученный отпечаток снимают и высушивают при комнатной температуре или в сушильном шкафу. Из 20 исследованных вторичных субстратов наиболее чувствительными хромогенами оказались о-фенилендиамин п о-дианизидин. С помощью описанного метода можно обнаружить 0,001—0,01 мкг пероксидазы хрена. [c.289]

Примеры зимограмм для шести таких аллоферментов из линий клеток человека приведены на рис. 4.7. В случае АДА для простоты приведены только эритроцитарные формы. В клетках человека из некоторых других тканей обнаруживаются дополнительные АДА. Они могут представлять собой вторичные формы изоферментов АДА, образующиеся из изозимов АДА эрит-роцнтарного типа путем посттрансляционной модификации. Более того, экспрессия изоферментов АДА может зависеть также и от условий культивирования [23]. [c.138]

Используя этот метод были определены линейные антигенные детерминанты изофермента С пероксидазы хрена (рис. 3) [Аммосова и др., 1997]. Показано, что линейные антигенные детерминанты фермента, некоторые из которых пространственно локализованы в регулярных элементах вторичной структуры а-спиралях, расположены как с наружи, так и внутри белковой глобулы. Часть эпитопов локализована в петлях и изгибах пептидной цепи пероксидазы, обладает нерегулярной конформацией. В составе полученных антигенных детерминант наиболее часто встречались десять аминокислот — Arg, Ser, Ala, Thr, Leu, Ile, Val, Phe, Pro, Asn. В состав эпитопов входили заряженные аминокислоты Arg и Asp, неполярные аминокислоты Ala, Leu, Ile, Val, Phe, Pro и Trp и незаряженные полярные аминокислоты — Asn, Thr, Ser, Gln, Tyr, Gly (составляющие 13,4, 51,2 и 35,4% соответственно от общего состава детерминант). Таким образом, на поверхности белковой глобулы фермента преиму- [c.28]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология