Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Трансформанты, анализ

    Фурье-трансформанту элементарной ячейки Р (Н) в структурном анализе называют структурной амплитудой. Именно она содержит информацию о положении, координатах и типе атомов, образующих структуру кристалла. [c.28]

    При исследовании одного из трансформантов, содержащего вставку длиной 10,5 т.п.н. и способного превращать нафталин в салициловую кислоту, обнаружилось, что минимальная ростовая среда, содержащая триптофан, приобретает синюю окраску. Тщательный анализ этого явления показал, что трансформированные клетки Е. соИ синтезировали краситель индиго. Синтез происходил в четыре стадии (рис. 12.6). [c.252]


    В предыдущих главах путем анализа экспериментальных данных идентифицированы многие реакции и установлена их природа. В соответствии с их формой кривые степени превращения и скорости отнесены к одному из фундаментальных типов реакций. При некоторых, наиболее благоприятных условиях оказалось возможным определить величины энергий активации и характер зависимости от давления. Отмечалось также, что в ряде случаев возможна Смена кинетического режима реакции. Теперь, исходя из известных или гипотетических законов образования и роста зародышей, остается дать согласованную интерпретацию всех результатов с учетом числа и характера элементарных стадий, на которые может быть разбита исследуемая реакция. Для этого теоретические кривые для степени превращения и скорости нужно сравнить с экспериментальными результатами либо в виде линейных трансформант, либо при помощи таблиц, имеющихся для некоторых классических случаев [1]. Если будет установлено соответствие во всех точках и устранена неоднозначность в экспериментальных данных, то можно считать, что уравнение скорости (Г, Р,. .. а) полностью определено, по крайней мере в исследованной области температур и давлений. [c.177]

    Анализу предполагаемых трансформантов обычно придается большое значение, и мы не остались в стороне от этой проблемы и разработали несколько соответствующих методик. Не нужно объяснить, насколько важно определить, являются ли колонии, отобранные как трансформанты, на самом деле трансформантами или же это ревертанты. Анализ трансформантов предполагает гибридизацию с колониями или выделение и анализ плазмидной ДНК. Кроме того, для оценки экспрессии чужеродного гена в дрожжевой системе весьма важно определить копийность плазмиды как фактор, оказывающий существенное влияние на уровень экспрессии. [c.230]

    Анализ клонов ТК -трансформантов показал, что вводимый вирусный ген ковалентно связывается с хромосомной ДНК клетки. Независимо выделенные клоны трансформантов различались по местам интеграции чужеродной ДНК, следовательно, встройка экзогенной последовательности не происходит только по определенной хромосоме или ее району. Многие исследователи отмечали широкую вариабельность получаемых клонов трансформантов по числу копий интегрированного гена tk (от одной до нескольких десятков на геном клетки). При этом в каждой клетке (клоне) встройка трансформирующей ДНК происходит в виде множественных тандемных повторов чаще всего в единственное место на одной из хромосом. [c.341]

    Здесь Ф (Н) — гармонический спектр или трансформанта Фурье функции плотности. Формула (В.10а) выражает операцию фуръе- анализа функции р (г) и позволяет найти ее гармонический спектр Ф (Н), если функция р (г) известна. Формула (В. 106) выражает операцию фурье-синтеза и позволяет найти функцию р (г), если известен ее спектр. [c.13]


    Анализ трансформантов методом бпот-гибридизации на присутствие в геноме вектора синтеза модифицированного бепка [c.67]

    Бактериальные трансформанты, например трансформированные клетки Е. oli, растут на поверхности агара, и их можно анализировать методом реплик. Трансформированные же клетки дрожжей растут в толще агара и, следовательно, требуют индивидуального подхода выделения каждого клона и его последующего анализа. Часто для этой цели используют стерильные зубочистки — как более дешевую замену петле разового [c.226]

Рис. 36.4. Метод выявления рекомбинантных молекул ДНК. Фрагмент ДНК встроен в уникальный Pst 1-сайт плазмиды pBR322. Вставка инактивирует ген, кодирующий белок, который обеспечивает устойчивость бактерии-хозяина к ампициллину. Следовательно, бактериальные клетки, несущие рекомбинантную ДНК, не способны формировать колонии на среде, содержащей этот антибиотик. Используя для анализа трансформантов среды с тетрациклином и ампициллином, Рис. 36.4. <a href="/info/1099966">Метод выявления</a> <a href="/info/1338403">рекомбинантных молекул</a> ДНК. Фрагмент ДНК встроен в уникальный Pst 1-сайт плазмиды pBR322. Вставка инактивирует ген, кодирующий белок, который обеспечивает <a href="/info/1304864">устойчивость бактерии</a>-хозяина к ампициллину. Следовательно, <a href="/info/32980">бактериальные клетки</a>, несущие рекомбинантную ДНК, не способны формировать колонии на среде, содержащей этот антибиотик. Используя для анализа трансформантов среды с тетрациклином и ампициллином,
    Хотя векторы, несушие два (или более) селектируемых маркера, и позволяют в большинстве случаев отбирать бактерии, содержащие гибридные плазмиды, по инактивации одного из маркеров, однако для этого требуется перенос клонов трансформантов с одной среды на другую методом отпечатков. Это трудоемкая операция, особенно при анализе большого числа клонов. Поэтому в настоящее время сконструированы векторы, позволяющие производить прямой отбор клонов, несущих гибридные молекулы. Для этого в векторную молекулу вводят ген, выражение которого в определенных условиях вызывает гибель кпетки. Инактивация этого гена путем интеграции в него чужеродной ДНК делает трансформанты, содержащие гибридные л-олекулы, жизнеспособ- [c.145]

    Если исследователь заинтересован в анализе РНК, образуемой трансформантами, содержащими вектор с последовательностями плазмиды pBR322, не следует пользоваться зондами которые содержат pBR322. Многие трансформанты образуют РНК, которая содержит последовательности плазмиды pBR322, и в результате могут быть получены ошибочные данные. [c.46]

    Анализ трансформированных клеток В. subtilis показал, что плазмидная ДНК проникает в компетентные клетки в виде линейных одноцепочечных структур. Цепи существенно де-градируются с концов, поэтому при введении в компетентные клетки мономерных плазмид для образования трансформанта необходимо, чтобы в клетку попало не менее двух молекул ДНК. Для мультимерных форм плазмид достаточно единичной молекулы, чтобы обеспечить трансформацию. [c.237]

    Учитывая возможность замолкания трансгена, в каждом эксперименте необходимо получать как можно больше трансгенных растений и тестировать уровень экспрессии встроенного гена. При этом по сравнению с исходными трансформантами (поколение ТО) более надежные результаты будут получены при анализе растений следующих поколений (Т1 или Т2), выросших на селективной среде из семян. [c.467]


Смотреть страницы где упоминается термин Трансформанты, анализ: [c.230]    [c.197]    [c.69]    [c.79]    [c.51]    [c.194]    [c.271]    [c.225]    [c.229]    [c.70]    [c.73]    [c.74]    [c.76]    [c.96]    [c.280]    [c.206]    [c.256]    [c.306]    [c.308]    [c.468]    [c.98]   
Новое в клонировании ДНК Методы (1989) -- [ c.230 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Анализ трансформантов

ДИФРАКЦИОННЫЙ СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ Фурье-трансформанта кристалла и интерференционная функция пространственной решетки

Трансформант



© 2025 chem21.info Реклама на сайте