Хроматография на гидроксиапатите

VI. Хроматография на гидроксиапатите и фосфате кальция [c.437]

Осаждение объединенных фракций, хроматография на гидроксиапатите (Bio-Gel НТР) [c.16]

ДНК отделяют от РНК, высших олигонуклеотидов и белка методом адсорбционной хроматографии на гидроксиапатите, метилированном альбумине-f-кизельгур (МАК), полилизине+ + кизельгур (ПЛК) или нитроцеллюлозе. Эти же сорбенты с успехом применяют для разделения нативной (двунитевой) и денатурированной (однонитевой) ДНК. [c.69]

Эту фракцию иногда называют ДНК, ренатурирующей в нулевой момент времени, поскольку в реакции реассоциации она обнаруживается в виде двухцепочечных молекул, по существу, в момент времени, равного нулю. Обычно ее удаляют до определения кинетики реассоциации других фракций ДНК. (Это означает, что ДНК денатурируют, а затем двухцепочечные молекулы удаляют хроматографией на гидроксиапатите, после которой инкубируют одноцепочечную ДНК для осуществления реакции реассоциации второго порядка.) [c.299]

Эти противоположные взаимодействия позволяют получать прекрасное разделение фракций при хроматографии на гидроксиапатите. Абсорбция вещества на гидроксиапатите в существенной степени зависит от вторичной и третичной структур его молекул. При этом элюция также определяется структурой молекул, и, следовательно, можно разделить вещества, фракционирование которых другими хроматографическими методами неэффективно. [c.135]

Разделение одно- и двухцепочечных ДНК при помощи хроматографии на гидроксиапатите. [c.216]

Однако наиболее важным и самым распространенным методом выделения и анализа ферментов является хроматография. Об этом можно судить по множеству публикаций и специальных обзоров, посвященных различным аспектам хроматографии ферментов. (См. обзор по колоночной хроматографии [20 и табл. 36.1.) В последние годы получили дальнейшее развитие новые высоко избиратетгьные методы выделения, такие, как аффинная хроматография [21—26 и гл. 7, 14], хроматография на гидроксиапатите [27 и гл. 35], хроматография на геле фосфата кальция [28 и гл. 35], гель-хроматография в градиенте детергента как метод очистки мембраносвязанных ферментов [29, 30], гель-проникающая хроматография [31 и гл. 5, 12], электрохроматог-рафические методы [11], ионообменная хроматография [32, 33 и гл. 6, 13], субетрат-специфичное элюирование [34]. [c.9]

Хроматография на гидроксиапатите была использована для доказательства предположения, что остаточная трансформирующая активность ДНК, подвергавшейся тепловой денатурации, обусловлена присутствием фракции ДНК, похожей, вероятно вследствие сшитости, на нативную ДНК (элюирующуюся в том же объеме, что и нативная ДНК, рис. 38.5) [63]. При помощи этого метода определяли число половых факторов в хромосомах Е. oli [73]. [c.73]

Хроматографию на гидроксиапатите не применяют для выделения высокомолекулярной рРНК, поскольку при этом наблюдается деградация полимера [172] однако репликативные формы РНК и промежуточные формы, похожие в структурном отношении на ДНК, можно фракционировать на гидроксиапатите [71]. Тем не менее, несмотря на детальные исследования процессов фракционирования различных тРНК, вирусной РНК и полинуклеотидов [67], хроматография РНК на гидроксиапатите не нашла широкого применения. [c.84]

Для фракционирования тРНК была с успехом использована хроматография на гидроксиапатите в градиенте концентрации натрий-фосфатного буфера [62—65]. Согласно теории Бернарди [66], ионы Са +, присутствующие на поверхности кристаллов гидроксиапатита, связывают специфические фосфатные группы РНК. Поэтому разделение на таком сорбенте зависит от прост- анственной ориентации остатков фосфорной кислоты относи- [c.173]

Наиболее распространенным методом для регистрации образования зародышей спиралей (в действительности для любых ренатурационных измерений) является хроматография на гидроксиапатите. По неясным пока причинам молекулы ДНК даже с короткими спиральными участками (50 пар оснований, а возможно, и значительно меньше) задерживаются на гидроксиапатите в тех условиях, когда одиночные цепи полностью вымываются. Поэтому, просто измеряя количество оставшихся на колонке фосфатных групп ДНК, можно оценить количество цепей ДНК, в которых имелись зародыши спирализации. Было показано, что полученные таким образом кинетические кривые являются обычными [c.354]

Использование хроматографии на гидроксиапатите (или других физических методов разделения) открывает целую новую область в экспериментальном исследовании ренатурации. Измерение поглощения света позволяет определить лищь общее количество рена-турировавшего материала при этом вклад в поглощение достаточно маленького участка может быть весьма невелик. Однако, если использовать ДНК, меченную радиоактивными изотопами, с помощью методов разделения можно изучать ренатурацию следовых количеств компонент. При этом следовое количество известной, не содержащей примесей ДНК может быть добавлено к исследуемой сложной системе или же ренатурация может проводитья при избытке известной чистой ДНК и следовых количеств исследуемой компоненты. [c.355]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология