Гаптены химические модификации

ХИМИЧЕСКАЯ МОДИФИКАЦИЯ БЕЛКОВ, ГАПТЕНОВ И НЕРАСТВОРИМЫХ НОСИТЕЛЕЙ [c.149]

Химическая модификация гаптенов и носителей 153 [c.153]

Рис. 24 схематически иллюстрирует механизм метки по сродству на примере азопроизводного динитрофенильной группы. К настоящему времени синтезировано большое число различных реакционноспособных производных гаптенов, избирательно реагирующих с разными аминокислотными остатками. В ходе реакции образуются устойчивые ковалентные связи, поэтому, разделив полипептидные цепи и фрагментировав их, можно точно локализовать меченый аминокислотный остаток. Таким способом удалось установить, что оба вариабельных домена (от легкой и тяжелой цепей) участвуют своими аминокислотными остатками в формировании полости активного центра и что полость центра выстилают отрезки цепей, соответствующие гипервариабельным участкам. Данные, накопленные с помощью метода метки по сродству , были дополнены результатами, полученными методами дифференциальной спектрофотометрии и электроннопарамагнитного резонанса (см. гл. 12), а также химической модификации определенных аминокислотных остатков в молекуле антитгла. Для ряда гаптенов гидрофобного характера. (например, нитрофениль-ные производные) было доказано присутствие в активном центре антитела остатка триптофана, продемонстрирован гидрофобный характер полости антидетерминанты. Для других гаптенов установлена локализация остатков гистидина, лизина, тирозина и точно определено их местоположение в каждой цепи. [c.93]

В качестве иммуноглобулина, с которым связывается ревматоидный фактор, мы используем моноклональные антитела, специфичные по отношению к определенному гаптену. Это позволяет антителам-мишеням нековалентно связываться с эритроцитами, конъюгированными с гаптеном. Такой подход имеет два главных преимуш,ества по сравнению с химической конъюгацией иммуноглобулина с эритроцитами. Во-первых, он дает возможность, работая с одним и тем же препаратом эритроцитов, использовать серию различных антител к одному гаптену, раз-личаюш,ихся по классу тяжелых цепей. Это позволяет анализировать изо- и аллотипическую специфичность ревматоидных факторов. Во-вторых, предлагаемый метод исключает возможность прямых химических модификаций антигена-мншенп, которые могут возникать при ковалентных сшивках антител и эритроцитов. [c.316]

В 34 главах изложены методы определения, выделения и очистки антител (включая дансилироваиие, двумерную хроматографию, изоэлектрофокусирование, электрофорез в полиакриламидном геле и изотахофорез) методы определения констант равновесия (равновесный диализ, равновесная фильтрация и седиментация) способы маркировки реагентов изотопами и флуоресцентными красителями и определение компонентов клеточной поверхности меры предосторожности при работе в изотопной лаборатории методы химической модификации белков, гаптенов и нерастворимых носителей приемы получения аитн-сывороток к аллотипам и антигенам гистосовместимости и получения антител доминирующего клонотипа методы оценки гистосовместимости и реакций в смешанной культуре лимфоцитов методы разделения клеток на гелях, несу- [c.7]

Наиболее характерно эффект иммунодоминантной группы выявляется при модификации отдельных аминокислотных остатков химическими соединениями, например динитрофенильной группой. Антитела, образующиеся в такой модифицированной антигенной детерминанте, способны реагировать не только с ней, но и с другими аминокислотными остатками, к которым будет пришита динитрофенильная группа. Более того, если в раствор, содержащий модифицированный белок и антитела, добавить свободный динитрофенол, то он будет ингибировать образование комплекса антиген — антитело. Это явление, которое впервые былГо описано и детально изучено К. Ландштейнером, послужило основой для получения антител против различных гаптенов. [c.13]

При эмульсионной полимеризации образуются не бусинки, как в случае стирола, а пузырьки ( искусственные клетки — hang, 1972). Для присоединения гаптенов можно использовать концевые аминные и карбоксильные группы. Количество таких функциональных групп на поверхности сополимера можно увеличить путем мягкого кислотного гидролиза (Зн. НС1). В отличие от полистирола найлон нерастворим в большинстве органических растворителей. Поэтому диапазон химических реакций для его модификации гораздо шире. Приводим последовательность реакций введения легко отш,епляющегося спейсера (16). [c.155]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология