Сшивки ковалентные

Если холинэстераза иммобилизована с помощью ковалентного связывания, то срок службы биосенсора возрастает Так, датчик, состоящий из рН-электрода с иммобилизованной на поверхности ацетилхолинэсте-разой (путем сшивки глутаровым альдегидом с альбумином), функционирует без изменения характеристик достаточно длительное время. С его помощью определяли паратион и севин на уровне 10 - 10моль/л Продолжигельность анализа 30 мин. Содержание паратиона и севина контролировали по относительному снижению отклика сенсора после внесения в ячейку аликвоты пробы. Заметим, что величина измеиения pH зависит не только от активности фермента, но и от буферной емкости раствора. Поскольку увеличение кислотности происходит лишь на мембране, а в объеме раствора pH остается практически постоянным, обычно применяют высокие (до 0,1 моль/л) концентрации субстрата и ячейки большого (100 мл и выше) объема. Кроме глутарового альдегида для иммобилизации холинэстеразы используют сополимеры акрил- и метакриламида, желатин. В последнем случае стеклянный шарик рН-электрода погружают в 5-10%-й раствор желатина, содержащий фермент, затем высушивают и обрабатывают водным раствором глутарового альдегида. Аналогичные мембраны используют и в датчиках на основе рН-чув-ствительных полевых транзисторов (911. [c.294]

Существует пять методов иммобилизации адсорбция на крупнопористом носителе, ковалентное связывание, адсорбция, поперечная сшивка, включение в полиакрила-мидный гель [165]. [c.163]

Ковалентная сшивка молекул фермента друг с другом при помощи -какого-либо полифункционального реагента (например, глутарового альдегида). [c.267]

Тейхоевые кислоты клеточной стенки в стенках бактерий достаточно прочно соединены с другим высокомолекулярным ингредиентом стенки — мукопептидом (см. стр. 582), причем эти биополимеры связаны ковалентной связью и образуют один сшитый поперечными сшивками высокополимерный блок, который обеспечивает механическую прочность стенки грамположительных микроорганизмов . [c.586]

ЭТИ мостики ковалентными связями привязаны своими концами к двум цепям. Такая сшивка может быть достигнута обработкой линейного полимера химическим реагентом, способным вступить в реакцию с двумя цепями, например при вулканизации каучука. Она осуществляется для превращения природного или синтетиче- [c.140]

Таким образом, при окислении хитозана хлоритом натрия (pH = 1 4.5) могут одновременно идти следующие процессы окисление хитозана по С(6) атому углерода, образование ковалентной связи между атомом азота аминогруппы и углеродом карбоксильной группы хитозана (сшивка), окислительная деструкция хитозана. Необходимо отметить, что введение каталитических количеств нитроксильных радикалов в реакцию окисления не приводит к заметным изменениям в ИК-спектре окисленного образца [c.508]

Как правило, ферменты прикрепляют к гидрофильным носителям одним из трех методов. Первый метод — это присоединение с помощью ковалентной связи [см. разд. 27.4.1(4)]. Второй метод основан на принципе ловушки в присутствии фермента проводят синтез сшитого полимера, например полиакриламида или поли(2-гидроксиэтилметакрилата). При достижении определенной степени сшивки значительная часть молекул фермента оказывается буквально пойманной в сеть полимера. Третий метод состоит в физической адсорбции фермента на инертном носителе или на ионообменной смоле. [c.336]

Углеводные цепи П. построены из регулярно чередующихся остатков Ы-ацетил-О-глюкозамина и его 3-0-(Л)-1-кар-боксиэтилового эфира (мурамовой к-ты), соединенных р-1-+4-СВЯЗЯМИ. Мурамовая к-та связана пептидной связью с тетра- или пентапептидами, к-рые образуют поперечные сшивки между отдельными углеводными цепями (см. схему). Гигантские сетчатые молекулы П. образуют жесткий чехол вокруг бактериальной клетки, к-рый поддерживает ее форму и защищает клетку от разрушения при мех. и осмотич. воздействиях. К П. ковалентными связями присоединяются др. компоненты клеточной стешп-тейхоевые кислоты и тейхуроновые к-ты, липопротеины. [c.468]

Влияние неподвижной фазы. Какой тип неподвижной фазы окажется наиболее приемлемым для сверхкритической флюидной хроматографии, пока еще не ясно. Степень устойчивости жидких неподвижных фаз неизбежно окажется недостаточной. В качестве неподвижных фаз были использованы полимерные пленки различной толщины и различной степени сшивки. Более предпочтительны такие полимерные фазы, которые ковалентно связаны со стенками колонки (полые колонки) или с твердым носителем (упакованные колонки). Однако в качестве подвижных фаз можно применять и твердые адсорбенты и химически связанные монослои. [c.133]

Когда полимерные цепи соединены друг с другом истинными ковалентными химическими связями (поперечными связями, или так называемыми сшивками ), пластическое течение крайне затруднено при достаточно большом количестве поперечных связей полимер будет жестким твердым телом и пе будет обладать способностью к пластическому течению, до тех пор пока температура не станет достаточно высокой, для того чтобы разорвать химические связи. Такие полимеры называют термореактивными. [c.348]

Сшивки в геле агарозы обусловлены не ковалентными, а водородными связями между цепями полисахарида. Этим объясняется ббльшая чувствительность агарозы к воздействию таких реагентов, которые способны разрушать водородные связи. Агароза устойчива в интервале pH 4—9 и в интервале температур 1—40°С. Относительно концентрированные растворы солей, например Ш раствор хлорида натрия, или мочевины (до 2М) не влияют на хроматографические свойства агарозы. [c.355]

Когда речь идет о макромолекулярной агрегации, большое значение имеет существование связей между цепями полимера. Эти поперечные сшивки могут быть обусловлены первичными валентными силами (ковалентные поперечные связи) или более слабыми вторичными валентными силами, такими как солевые мостики, диполь-дипольные взаимодействия, и наличием кристаллитов (эффективные поперечные связи). Материалы с незначительным числом поперечных сшивок ведут себя как разветвленные полимеры. Они могут сохранять свои растворимость и эластичность и даже участвовать в образовании кристаллитов. Более сильносшитые полимеры уже теряют свои эластичность и растворимость, и при этом возрастает температура [c.116]

Итак, организация белковой молекулы происходит в результате различного рода молекулярных взаимодействий, которые и определяют уровни ее структуры. Первичная структура макромолекулы белка целиком определяется ковалентными связями вдоль полипептидной цепи, вторичная — водородными связями между пептидными группами, расположенными в соседних витках спирали или соседних участках разных цепей, и, наконец, третичная структура — химическими сшивками отдельных участков одной цепи или нескольких цепей (дисульфидные мостики, фосфоэфирная связь) и силами взаимодействия неполярных боковых радикалов некоторых аминокислот. [c.95]

Непосредственное npi-геязынание клеток друг к друг с помощью бифункциональных или полифункциональных реагентов типа альдегидов или аминов относится к химическому поперечному связыванию . Метод ковалентного связывания и поперечной сшивки живых клеток используется реже остальных методов иммобилизации [c.165]

Бифункциональные реагенты. К бифункциональным реагентам относят химические соединения, содержащие две (обычно одинаковые) пространственно разделенные реакционноспособные группировки. Бифункциональные реагенты широко используются для ковалентной сшивки пространственно сближенных участков как одной белковой молекулы, так и двух разных белков, функцио-пирующих в едином комплексе. С помощью таких реагентов изучают третичную и четвертичную структуры белков и выясняют области контактов различных белковых молекул между собой или с другими биополимерами. К бифункциональным реагентам относятся, например, глутаровый альдегид, взаимодействующий с аминогруппами, и N-замещенные производные малеимидд, реагирующие с сульфгид-рильными группами белков. [c.168]

Ферментные (энзимные) электроды представляют собой электродные устройства (ионометрические датчики), позволяющие определять концентрации веществ, участвующих в ферментативных реакциях. Для этой цепи на чувствительный элемент ионоселективного электрода или на специальный носитель, расположенный на некотором расстоянии от него, наносят спой, содержащий фермент. Обычно фермент применяют в иммобилизированном состоянии, используя один иэ методов иммобилизации ковалентное связывание с поверхностью электрода, внедрение фермента в сетку геля или полимера, ковалентную сшИвку молекул фермента между собой с помощью соответствующего полифунк-ционального реагента, [c.57]

Ксерогели представляют собой классические гели, образованные линейными макромолекулами, взаимное расположение которых закреплено ковалентными поперечными связями (сшивками) или также водородными связями. Нерастворимая матрица ксерогелей пронизана порами определенных размеров. Типичные представители ксерогелей — гели сефадекс О, биогель Р и биобедс 8 (см. разд. 6.2.2, 6.2.3 и 6.2.6). В качестве растворителя в сочетании со ксерогелями чаще всего употребляют во- [c.341]

Дублирование информации в двух комплементарных цепях ДНК не позволяет безошибочно исправлять все типы повреждений. Ойи-санные механизмы репарации не могут справиться с такими нарушениями структуры ДНК, как ковалентные межнитевые сшивки, которые могут возникать под действием ряда мутагенов, или дву1№По- [c.83]

Прямым методом изучения наличия гистонов в тех или иных участках ДНК является ковалентная сшивка гистонов с ДНК- [c.254]

При щелочной клейстеризации крахмала получают высоковязкие растворы, которые в процессе сушки могут сильно разжижаться из-за развития гидролитических процессов. Защитная способность при этом снижается. Хотя, по данным Г. Грея, Д. Фостера и Т. Чеп-мана, щелочной клейстеризацией могут быть получены и хорошие реагенты, но регулирование этого процесса затруднено. При высокотемпературной сушке щелочного крахмала происходит сшивка макромолекул ковалентными поперечными связями. Этот процесс, обусловленный самоокислением и альдолизом, интенсифицируется повышением pH. Ингибирует его введение таких реагентов, как сульфат натрия [154]. [c.175]

Стабилизация молекулы К. осуществляется благодаря электростатич. и гидрофобным взаимод., а также водородными и ковалентными поперечными связями между а-цепями. Водородные связи образованы карбонильной группой и группами NH пептидной связи или НО-группой НО—Pro возможны также связи с участием HjO. Ковалентные связи между а-цепями (сшивки) образуются в результате альдольной конденсации остатков 2-амино- [c.433]

Два факта заставляют думать, что упомянутые группировки действительно расположены в ферменте весьма близко. Во-первых, ароматические соединения, являющиеся конкурентными ингибиторами фермента, ингибируют также реакцию с сульфгидрильной группой, играющей существенную роль в катализе. Во-вторых, ароматические окислители (динитрофенильные соединения), обладающие незначительной реакционноспособностью в отношении обычных сульфгидрильных групп, но способные к образованию комплексов с остатками триптофана, окисляют эту сульфгидрильную группу с большой скоростью. Эти факты убедительно свидетельствуют о том, что остаток триптофана и сульфгидрильная группа расположены поблизости друг от друга и что они близки (по меньшей мере) к центру связывания тиосульфата. В настоящее время метод бифункциональных ингибиторов используется достаточно широко. Шоу [16] описал группу специфических реагентов, взаимодействующих с активными центрами химотрипсина и трипсина. Уолд [17] обобщил опыт применения бифункциональных реагентов для поперечной сшивки пептидных цепей с помощью ковалентных связей. [c.225]

Фотореактивные (фотоактивируемые, фотоаффинные) Л 3, как правило, несут и радиоактивную метку (см напр, соед ф-лы IV) При освещении светом с определенной длиной волны эти Л 3 образуют в изучаемом объекте через промежут реакционноспособные состояния (обычно карбены или нитрены) ковалентные свяэи (сшивки) с расположенными рядом молекулами Изучение полученных продуктов (применяют разл виды хроматографии, электрофорез, масс- и ЯМР-спектроскопию и др) дает информацию о распределении и характере взаимод липидов с др молекулами в изучаемом объекте [c.597]

В отличие от физических методов этот способ иммобилизации обеспечивает прочную и необратимую связь фермента с носителем и часто сопровождается стабилизацией молекулы энзима. Однако расположение фермента относительно носителя на расстоянии одной ковалентной связи создает стерические трудности в осуществлении каталитического процесса. Фермент отделяют от носителя с помохцью вставки (сшивка, спейсер), в роли которой чаще всего выступают бифункциональные и полифункциональ-ные агенты (бромциан, гидразин, сульфурилхлорид, глутаровый диальдегид и др.). Например, для выведения галактозилтрансфе-разы из микроокружения носителя между ним и ферментом вставляют последовательность — СНг—КН—(СНз)5—СО—. В этом случае структура иммобилизованного фермента включает носитель, вставку и фермент, соединенные между собой ковалентными связями (рис. 4.5). [c.91]

Аналогично, другой традиционно используемый катализатор - серная кислота -проявляет каталитические свойства как комплексно-связанное соединение, например на сульфатах металлов [109, 110], так и в виде ковалентно присоединенных к матрице сульфогрупп, т.е. полимерных сульфокислот [114-117]. В обоих случаях чем больше количество связанной кислоты (80зН-групп) и чем сильнее ее связь с матрицей, тем выше кислотно-каталитическая активность. Обпще представления о характере действия таких катализаторов можно проиллюстрировать на примере сульфированных сополимеров стирола с дивинилбензолом. Как и для любой твердой матрицы, и в этом случае существенную роль играет проницаемость полимерной сетки, определяемая степенью сшивки, набухаемостью, размером гранул, а также другими факторами. Химическая сторона каталитического действия сульфока-тионитов связана с наличием сетки водородных связей, кооперативных эффектов и формированием ассоциатов - центров повышенной локальной концентрации кислотных групп [182,183]. Наличие остаточной воды обеспечивает необходимую подвижность протонов, динамический характер сетки и наблюдаемое в эксперименте соотношение активности и селективности действия. Встраивание субстрата в сетку предпочтительнее, чем простое взаимодействие его с поверхностью [184-186]. Учитывая низкую полярность олефинов, например изобутилена, можно предположить электрофильные превращения его в присутствии сульфокислот через промежуточное образование спирта и последующее встраивание в сетку матрицы. Ниже приведены возможные структурные элементы полимерных сульфокислот [c.57]

У структурных белков находят следующие типы конформаций полипептидных цепей а-спираль, -структуру складчатого листа и суперспирапь. Важнейшие представители этих белков — кератины, белки шелка и коллагены. В ряде других структурных белков особые физические свойства достигаются благодаря трехмерным сшивкам полипептидных цепей ковалентными мостиками. Резилин, белковый компонент хитиновых пластинок, содержащийся, в частности, в местах причленения крыльев насекомых. [c.420]

Интенсивное изучение данного метода началось с 1977 г., после того как выяснилось, что полистирольный сорбент, полученный с применением оптически активного прототипа, позволяет осуществить частичное разделение соответствующих рацематов [76—80]. Один из наиболее удачных методов предусматривает быстрое и обратимое образование эфиров борной кислоты в результате реакции между углеводом и винилзамещенной фенилборной кислотой (рис. 7.8). Этим путем молекулы мономера ковалентно связываются с прототипом (ср. схему 7.5, этап 1). Полимеризация и сшивка Днвинильным компонентом, последующий гидролиз и промывка приводят к хиральному сорбенту. [c.129]

В настоящее время разработаны методы иммобилизации множества ферментов. Некоторые из них приведены в табл. 22. Как видно из таблицы, один и тот же фермент можно иммобилизовать несколькими методами. Так, лактатдегидрогеназу можно включить в гель, прикрепив к носителю поперечной сшивкой аспара-гиназу — прикрепить к носителю сорбционным путем или химической (ковалентной) связью и т. д. [c.205]

Амидная связь между двумя а-аминокислотными остатками обычно называется пептидной связью, а. полимеры, построенные из остаткои -аминокислот, соединенных пептидными связями, называют полипептидами. Белок, как биологически значим 1Я структура, может представлять собой 1<ак один по.т1ииептид, так и несколько полипептидов, образующи.ч в результате нековапентных взаимодействий единый комплекс, а иногда дополнительно связанных между собой ковалентными сшивками. [c.30]

Ван Кревелен на основании изучения структуры углей сделал вывод, что количество сшивок между структурными элементами в ОМУ снижается по мере роста содержания углерода [18]. В более поздних исследованиях было показано, что сшивки в бурых и молодых каменных углях осуществляются в значительной степени за счет ЭДА-взаимодействия различных функциональных групп, количество которых уменьшается с ростом степени метаморфизма [19], причем максимальное количество сшивок с ковалентными связями, образуемых алкильными группировками, наиболее характерно для углей с содержанием 80—82% углерода [20]. Интересно отметить, что подобные выводы подтверждаются закономерностями, наблюдаемыми при набухании углей в контакте с органическими полярными растворителями и хорошо коррелируют с их донорными и акцепторными свойствами [21]. Следовательно, помимо указанных выше факторов, на глубину конверсии и скорость гидрогенизационных превращений угля может влиять степень его набухания, способствующая взаимодействию молекул растворителя (доноров водорода) с активными фрагментами распада исходной ОМУ. [c.196]

Согласно определению Штау-дингера, трехмерными называют полимеры, в которых макромолекулы соединены ковалентными связями в трех направлениях. Флори [74], предложивший статистический метод расчета сетчатых структур, рассмотрел модель сетки, образованной при соединении линейных макромолекул поперечными сшивками. Такие сшивки по длине намного короче основных геней и могут рассматриваться как точечные узлы. Узлы, образованные ковалентными связями, называют химическими. [c.291]

Дисульфидные связи часто встречаются в природных продуктах. Во внеклеточных белках [81] ковалентные дисульфидные связи обеспечивают образование поперечных сшивок, значительно более прочных, чем гидрофобные взаимодействия и водородные связи, которые, как полагают, обеспечивают первоначальное скручивание молекулы белка. Дисульфидная поперечная сшивка делает относительно постоянным то расположение пептидных цепей, которое первоначально образовалось за счет более слабых связывающих сил. Дисульфидные связи не являются основным типом связей во внутриклеточных структурах. Биохимическая важность дисульфидной связи определяется уникальностью природы системы тиол — дисульфид, в которой связь 8—5 может образовываться и разрываться в условиях, приемлемых для биологических процессов, посредством дисульфидного обмена с участием глутатиона (61). Цистин (62) является составной частью аэробных систем. Он образуется посредством легкого окисления цистеина НЗСН2СН(НН2)С02Н и при переваривании дисульфидов, входящих в состав белка. Липоевая кислота (63) участвует в окислительном декарбоксилировании а-оксокислот и является общим звеном в двух основных биохимических процессах, в которых участвует тиол — дисульфидная система перенос электрона и генерирование тиоэфирных связей, обладающих большой энергией [81,82]. [c.446]

Другой интересной особенностью циклических ДНК, наблюдаемой при щелочной денатурации, является очень быстрая ренатурация при нейтрализации щелочного раствора такой денатурированной ДНК, если значение pH не превышает 12,5. При денатурации щелочью более высоких концентраций не удается добиться ренатурации (после нейтрализации) в условиях, когда ДНК II легко ренатурирует . Необратимо денатурированная ковалентно-замкнутая ДНК после нейтрализации и обработки панкреатической ДНК-зой спонтанно ренатурируетобразуя циклическую ДНК II с односпиральными разрывами данный процесс протекает значительно быстрее, чем ренатурация ДНК П. Это означает, по-видимому, что необратимая денатурация ДНК I происходит без разрыва цепей ДНК, однако в процессе денатурации они сдвигаются относительно друг друга вдоль оси спирали, после чего образование полностью комплементарной структуры при нейтрализации затруднено из-за случайного образования ненативных комплементарных пар 5 Возможно также, что воссоздание вновь исходной комплементарной структуры затруднено стерически из-за образования сверхспиральной структуры. Быстрая спонтанная ренатурация после образования единственного одноцепочечного разрыва объясняется, очевидно, тем, что при этом происходит быстрое раскручивание сверхспиральной денатурированной структуры и две цепи, находясь в непосредственной близости друг от друга, могут легко образовать полностью комплементарную двухспиральную структуру, как это происходит, например, при ренатурации денатурированной ДНК со сшивками между комплементарными цепя- [c.270]

Сделано несколько попыток решить, в какой мере увеличение молекулярного веса вызвано ковалентными сшивками, а в какой — агрегацией частей белка посредством водородных связей. Однако успешное диспергирование белкового геля тиогликолевой кислотой является наиболее показательным опытом (см. стр. 255). В случае агрегатов, образованных из серумальбумина, введение мочевины приводит к частичному диспергированию. Это указывает на то, что по крайней мере часть увеличения молекулярного веса вызвана связыванием молекул водородными связями [А18]. В опытах с ультрацентрифугированием фибриногена найдены некоторые компоненты низкого молекулярного веса это доказывает, что происходит некоторая деструкция, и определенно указывает на то, что водородные связи обусловливают по крайней мере часть наблюдаемого возрастания молекулярного веса. [c.258]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология