Гаптены определение

А. взаимодействуют с рецепторами лимфоцитов и с антителами, определенными участками своей молекулы, т. наз. антигенными детерминантами, к-рыми собственно и определяется специфичность А. Впервые это было показано К. Ландштейнером, использовавшим в кач-ве А. белки с присоединенными к ним хим. группировками (т. наз. гаптенами). Животное в ответ на введение такого антигена образует антитела, специфичные не только к белку-носителю, но и к гаптену, к-рый является, т. обр., одной из антигенных детерминант использованного сложного А. [c.174]

Иммуноглобулины из-за своей поразительной специфичности стали исключительно важным инструментом биохимического анализа. Методы, основанные на образовании комплексов антител с антигенами или гаптенами, называют иммуноанализом. Иммуноанализ используется либо для определения определенных антигенов с помощью специфических к этим антигенам антител, либо, наоборот, для детекции антител определенной специфичности с помощью соответствующих антигенов. И та, и другая задача имеет широкий спектр применений в фундаментальных биохимических исследованиях, в биотехнологии, в медицинской практике и для оценки состояния окружающей среды. [c.256]

Соединение с гаптеном должно, вообще говоря, использовать ту же группу, что и для образования иммуногена в первом случае, так чтобы лиганд не маскировал место распознавания. Наприм , в большинстве определений гидрокортизона применяют сыворотку, полученную с помощью конъюгата кортизон-3-(0-карбоксиметил)оксима, поскольку это оставляет уникальное 17 положение О-кольца доступным для распознавания, создавая, таким образом, специ- [c.594]

Если лиганд не имеет некоторых из указанных свойств, его можно химически видоизменить, чтобы придать ему эти свойства. Его выбор будет предопределен функциональными активностями, которые подлежащее очистке вещество может проявить в отношении определенных соединений, например ферменты с их субстратами, кофакторами или их ингибиторами, антитела с их гаптенами и антигенами и пр. [c.82]

При анализе содержания в образце антител определенной специфичности можно использовать так называемый белок А из стафилококка, который обладает специфическим сродством к константной части антител в комплексе с их антигенами или гаптенами. Образование комплекса антиген — антитело регистрируется после удаления избытка антитела по взаимодействию конъюгата белка А с детектируемой меткой, например пероксидазой. [c.258]

Антигенная специфичность обусловлена не молекулой белка в целом, а только определенной атомной группой молекулы, называемой гаптеном. Это было установ- [c.448]

Антитела, индуцируемые определенными антигенами, характеризуются значительной гетерогенностью. При использовании простых химически определенных гаптенов причины для такой гетерогенности могут быть следующими [35] [c.114]

Для определения положения равновесия между свободными антителом и антигеном и их комплексом или между антителом и гаптеном и их комплексом использовали различные методы. Среди них — метод равновесного диализа (I), прямой анализ преципитатов и надосадочной жидкости (II), электрофорез и ультрацентрифугирование (III) и метод рассеяния света (IV). Эти эксперименты подробно описаны в цитированных работах. Здесь мы можем только сказать, что все это методы определения или расчета концентраций свободных антител, свободных антигенов, свободных гаптенов и их комплексов в состоянии равновесия. На основе таких измерений можно вычислить константу равновесия К и AF°. Если эти измерения произвести при нескольких значениях температур, можно определить также величины ДЯ° и А5°. [c.166]

В большом числе экспериментов Полинг с сотрудниками определили сродство гомологичных и гетерологичных гаптенов по отношению к антителам, исходя из предела разведения, в котором они еще растворяли определенное количество осадка, образованного антителом и гомологичным антигеном. Оптимальное количество гомологичного контрольного антигена добавлялось к антисыворотке в присутствии различных количеств гаптена, а образовавшийся осадок определялся химическими методами. На рис. I показаны результаты одного из таких опытов, , . i [c.659]

Чрезвычайно широкий спектр применений имеет иммуноанализ для определения как самого факта присутствия, так и измерения количества антигенов, в том числе гаптенов, т.е. низкомолекулярных соединений, к которым можно получить антитела, как правило, путем иммунизации животных конъюгатом гаптена с высокомолекулярным носителем, способным вызывать иммунный ответ. Иммуноанализ нашел широкое применение для анализа содержания различных гормонов, что имеет огромное значение для оценки состояния эндокринной системы человека и животных. Важное значение для оценки состояния окружающей среды, в первую очередь качества питьевой воды и пищевых продуктов, приобретает иммуноанализ содержания пестицидов. В связи с интенсивным развитием гибри-домной техники для анализа определенных антигенов всё более широкое применение находят моноклональные антитела. [c.257]

Таким образом, опыты с конъюгатами чужеродных носителей с ограниченным числом химических гаптенов и с искусственными полимерными антигенами показали, что конкуренция между ними, как правило, приводит к подавлению иммунного ответа на один или несколько антигенов при сохранении или небольшом угнетении ответа на доминантный антиген. Однако возникает вполне закономерный вопрос насколько этот вывод соответствует реальным условиям сенсибилизации организма химическими аллергена(ми Ведь в последнем случае носитель окажется своим белком, к которому в определенной мере будет сохранена естественная толерантность. При этом можно ожидать, что чем сильнее будет химическая детерминанта и чем меньше ее присоединение к белку будет модифицировать последний, тем в большей степени окажется сохраненной естественная толерантность к носителю, а следовательно, менее вероятным будет участие белкового носителя в качестве доминантного антигена во внутри- и межмолекулярной конкуренции. [c.56]

Фиг. 5. Принцип определения антител к гаптену независимо от антител к белку-носителю.

Вполне понятно, что если результаты опытов с гаптеном Г могут варьировать от 1,0 до 2,0 и 0,5 мМ, то и результаты опытов с гаптеном Г могут варьировать от 0,25 до 0,5 и 0,125 мМ. Можно ожидать, что изменения. при определении МИД для двух гаптенов обычно направлены в одну сторону. Действительно, это одна из причин одновременной постановки всех опытов, но очевидно, что отношение минимальных ингибирующих доз может варьировать от 16 до 1. [c.32]

Было обнаружено, что гаптен с такой же стерической конфигурацией, как и у антигена, соединяется в 200 раз прочнее это показывает, какое большое значение имеет стереохимическое соответствие. Результаты исследования диализа могут быть также использованы для определения стехиометрии реакции. Так, было найдено, что антитела ассоциируются с двумя гаптеновыми группами. [c.340]

В-четвертых, в свете данных современной аллергологии (в частности, исследований А. Д. Адо и его сотрудников) сегодня представляется мало целесообразны.м выделение группы химических веществ комбинированного действия. Каждое химическое вещество может иногда обладать и первично раздражающими, и сенсибилизирующими кожу (и весь организм) свойствами, а поэтому все химические вещества принципиально являются в этом смысле веществами комбинированного действия. Как показали исследования последних лет, значительное большинство химических веществ, в частности такие известные сенсибилизаторы, как хром, кобальт и другие металлы, приобретают антигенные свойства после соединения с тканевыми белками, т. е. они являются не первичными полными антигенами, а гаптенами. Многие несомненные сенсибилизаторы (хром) при определенных значительных концентрациях будут действовать на кожу как первичные и даже как облигатные раздражители сказанное относится и ко многим другим органическим и неорганическим веществам, например к фенолу, формалину. Многие бесспорные первичные и даже облигатные раздражители, как, например, иприт, обладают и некоторыми сенсибилизирующими свойствами по данным А. Д. Адо, даже при воздействии сильных кислот ( классических облигатных раздражителей) иногда удается выявить иммунологические признаки сенсибилизации. Вместе с тем, если сенсибилизирующие свойства различных веществ значительно разнятся (даже химически близких веществ, например хром значительно более [c.95]

В ряде случаев для определения частоты соматического мутагенеза необходимо исследовать огромное число клеток, экспрессирующих один и тот же V-ren. Практический подход для идентификации такой группы состоит в характеристике иммуноглобулинов, получаемых от серии клеточных линий, осуществляющих иммунный ответ на одинаковый антиген. (Используемые для этой цели антигены представляют собой маленькие молекулы, имеющие дискретную структуру, которая, по-видимому, обусловливает стойкий иммунный ответ. Они отличаются от больших белков, отдельные части которых могут стимулировать образование разных антител. Эти маленькие молекулы получили название гаптенов. Для того чтобы придать им свойства антигена, их соединяют с инертным белковым носителем. Иммунизируя таким антигеном мышь, получают реактивные лимфоциты, которые соединяют путем слияния с миеломными клетками для получения гибридом. Такие гибридные клетки продолжают независимый синтез желаемого антитела.) [c.515]

Конкурентные методы анализа используют для различных антигенов, но чаще всего для определения гаптенов. Они отличаются простотой постановки реакции, но имеют ряд ограничений. Во-первых, в конкурентных методах предъявляются высокие требования к стандартизации количества связанных и добавленных реагентов. Во-вторых, чувствительность этих методов определяется в основном константой связывания антител. [c.118]

Знание антигенной структуры и специфичности гаптенов имеет важное значение для создания методов иммунохимического определения различных физиологически активных соединений, так как многие из них претерпевают различные биохимические превращения, в результате чего образуется группа близкородственных метаболитов. [c.17]

Подобного рода проблемы очень часто возникают, например, при разработке методов иммуноферментного анализа лекарственных препаратов, стероидных и белковых гормонов. В зависимости от способа получения антисыворотки антитела могут быть специфичны либо только к одному лекарственному препарату (гап-тену), либо к целой группе близких по структуре химических соединений. В этих случаях распространен способ оценки специфичности, основанный на сравнении связывания антител в данной концентрации (или в определенном разведении иммунной сыворотки) одного и того же количества гомологичного и гетерологичного гаптена. При этом концентрация образовавшегося иммунного комплекса для гомологичного гаптена принимается равной единице, а связывание всех гетерологичных гаптенов оценивается как доля от соответствующего связывания гомологичного гаптена. [c.37]

Выполнение работы включало три основных этапа I) направленный синтез высокоспецифических реагентов, являющихся основой получения коньюгатов антигенов, и последующая наработка иммуноспецифических субстанций антител к наркотикам и монодисперсных полимерных суспензий с заданными свойствами реакционно-способных комплексов гаптенов либо их специфических антител с ферментом или их макромолекулярным носителем (белок, полимер) 2) разработка иммунохимического метода анализа для определения опиатов, каннабиноидов и гидазепама на основе полученных реагентов с использованием латексной агглютинации 3) разработка экспериментально-технологического регламента и пакета нормативно-технической документации для выпуска опытно-промышленной серии иммунодиагностикумов для быстрого определения наркотиков в биологической жидкости человека. Создание и испытание опытных серий наборов тест-систем для получения необходимых рекомендаций для внедрения в клиническую практику. [c.200]

Устройство ввода на основе решетки позволяет завести свет в световод. Решетка —это периодическая структура (например, треугольная, пилообразная, синусоидальная) (рис. 7.8-21), которая нанесена на поверхность световода. Когда свет падает на решетку он возбуждает в световоде проходящую моду в зависимости от периода решетки. Чтобы усилить эффект изменения показателя преломления на границе раздела, изменения, происходящие на поверхности решетки, надо перенести на световод. Например, на рис. 7.8-21 свет, падающий вблизи устройств ввода, будет возбуждать проходящие моды, зависящие от показателя преломления окружающей среды. В этом варианте поверхность становится чувствительной к тонким изменениям показателя преломления. Этот вариант, следовательно, подходит для проведения безметочного иммунного анализа, поскольку связывание между иммобилизованным антителом и антителом пробы дает большую плотность этих молекул на расстоянии порядка длины волны вглубь от поверхности (заметьте, что глубина проникновения света составляет величину порядка длины волны, уравнение 7.8-34) и, таким образом, приводит к изменению показателя преломления. Например, конкурентный иммунный анализ можно применить для определения пестицидов, при этом на модифицированной аминосиланом поверхности устройства связи ковалентно иммобилизован триазиновый гаптен, а связывание антитела детектируют за счет измерения угла несвязывания [7.8-53, 7.8-54]. Чтобы детектировать присутствие триазиновых пестицидов, пробу следует предварительно выдержать с антителами, а затем — перенести к иммобилизованному гаптену. Очевидно, чтобы обеспечить невмешательство пользователя в эту процедуру анализа, в устройстве должен быть предусмотрен этап выдержки. [c.559]

Бели привязать специфические гаптенные группы (например, динит-рофенильную или углеводную) к определенным местам рибосомной РНК или же получить антитела к модифицированным (минорным) основаниям ее, то можно с таким же успехом использовать иммунную электронную микроскопию для изучения топографии РНК на поверхности рибосомной частицы. Таким путем удалось локализовать прежде всего концы рибосомных РНК, к которым легче всего можно избирательно привязать ту или иную гаптенную группировку. [c.113]

Важной группой аффинных сорбентов являются иммобилизованные антитела, или антигены. В первом случае сорбенты могут бьпъ использованы для специфического выделения определенных антигенов, или гаптенов, из сложных смесей. В этом случае эти сорбенты называют иммумосорбентами. Во втором случае иммобилизованные антигены способствуют выделению антител с определенной специфичностью из сложной смеси антител. [c.248]

В настоящее время разработаны иммунологические методы определения КБА. В этих методах для иммзшологической регистрации КБА, образующихся при появлении в нем канцерогенных веществ, используются антитела, полученные с помощью азопротеинов, содержащих канцерогенное вещество, присоединенное ковалентной связью к носителю белковой природы. При помощи иммунологических методов КБА обнаруживаются в биологических жидкостях в период инициации экспериментального канцерогенеза у животных, у больных с опухолями и у рабочих с профессиональным онкологическим риском. Образование КБА коррелирует с канцерогенезом, и поэтому они могут служить эффективными маркерами рака и онкологического риска. Однако следует отметить, что при иммунизации животных конъюгатами канцерогенов с белковыми носителями неизбежно индуцируются побочные антитела против общевидовых антигенов, что затрудняет интерпретацию результатов определения канцерогенов в биологических материалах. Побочные антитела ограничивают специфичность антисывороток к гаптенам (веществам, к которым вырабатываются антитела в организме), особенно при необходимости их регистрации в крови человека. [c.184]

Антитела могут быть нацелены против различных частей молекулы гаптена, С антителами против белков ситуация еще более сложная, потому что белок содержит различные антигенные группы, которые еще менее определенны, чем в случае простых гаптенов. Более того, сыворотка содержит несколько классов белков с активностью антител, та кие, как им 1уноглобулины gG, IgM и 1 А. [c.114]

В книге обобщены материалы по изучению аллергии к промышленным химическим соединениям. На основании данных современной литературы и собственного многолетнего опыта авторы высказывают оригинальное суждение по ряду теоретических и прикладных аспектов проблемы. В книге дано представление оо иммунных механизмах различных типов аллергических реакций, о химической структуре и конкуренции гаптенов и полных комплексных антигенов, об иммунологической толерантности и гипосенсибилнзации к химическим аллергенам. Освещены приемы выявления сенсибилизирующего действия промышленных химических соединений, сложных и полимерных продуктов, методы определения опасности контакта с ними в условиях производства и в повседневной жизни, принципы установления их гигиенического норматива. Представлены методы специфической диагностики аллерго-зов химической этиологии и методы применення промышленных химических аллергенов при постановке кожных, провокационных, клеточных и серологических тестов. Рассмотрены возможные всходы сенсибилизации к промышленным химическим аллергенам. [c.2]

Если химический аллерген не обладает жесткой структурой (алифатические цепи, эпоксидные и альдегидные группы и т. д.), то он вряд ли может сам по себе обеспечить стабильность гаптенной иммунодоминанты. По-видимому, в этом случае стабильность конформации имму-нодоминанты и всей детерминанты обеспечивается носителем и специфичность их обусловлена присоединением гаптена в строго определенном участке молекул различных белков (рис. 4, г). При этом довольно вероятно, что новая детерминанта замещает детерминанту носителя. Так, хорошо известно, что формалинизация белков приводит к потере их видовой специфичности (см. главу 4). Формально такие нестабильные гаптены являются дена-тураторами белка. Однако денатурированный под влиянием химического соединения белок достаточно строго специфичен, и, следовательно, вполне правомерны такие термины, как ГЗТ или антитела к формальдегиду, эпоксидным соединениям и т. д., хотя, безусловно, их специфичность менее строгая, чем специфичность гаптенов, обладающих жесткой структурой. [c.46]

Аллергенная активность полимеров зависит не только от взаимоотношения содержащихся в них свободных аллергенных ингредиентов, но и от структуры полимерных композиций и, в частности, от распределения активных групп по поверхности макромолекулы. Так, по данным экспериментальных исследований Ш. 3. Загидуллина (1970), выполненных в нашей лаборатории, установлена определенная зависимость аллергенной активности эпоксидных соединений от количества свободных эпоксидных групп, т. е. гаптенных детерминант. Так, эпихлоргидрин — моноэпоксидное соединение — явился более слабым аллергеном по сравнению с диэпоксидными смолами ДЕГ-1 и ЭД-5 (1,8 и 0,7 балла), а различная аллергенная активность последних связана с количеством свободных эпоксидных групп (134,8 и 66,6 мкмоля). Эпок-сифурфуриловый эфир, хотя и является моноэпоксидным соединением, содержит довольно много свободных эпоксидных групп (148-мкмоль) и, кроме того, активное фурановое кольцо, что и определило его выраженное сенсибилизирующее действие (2,2 балла). В отношении сложного эпоксидного компаунда ЭПМ отчетливо проявляется синергизм действия содержащихся в нем моно- и диопоксидных соединений (ЭФ, ДЕГ и ЭД-5), в связи с чем его сенсибилизирующее действие достигало по результатам тестирования кожи 3,2 балла. В то же время компаунд ЭПМ с отсутствием свободных эпоксидных групп за счет их полного включения в структуру макромолекулы вообще не является аллергеном. [c.139]

В 1967 г. И. Е. Сосонкин [60] предложил для диагностики аллергии к химическим промышленным соединениям методику определения специфического подавления ретракции кровяного сгустка (СПРКС). Принцип методики заключается в уменьшении объема сыворотки крови, отслаивающейся от сгустка крови, при добавлении опецифического аллергена. Механизм этой реакции автор объясняет аллергической реакцией лейкоцитов, в том числе и возможным увеличением объема реагирующих на гаптен клеток крови, а также их лизисом. В результате образование сгустка замедляется и отделяется меньший объем сыворотки. [c.213]

Антитела — не единственные высокомолекулярные соединения, обладающие специфической биологической активностью. Ферменты, которые тоже являются белками, и гормоны, многие из которых — белки, также обладают этим свойством. Ферменты—наиболее яркие представители веществ такого рода—имеют различную степень специфичности. Некоторые ферменты, например мальтаза солода и сук-цинатдегидрогенеза, высоко специфичны каждый из них катализирует одну и только одну реакцию. Специфичность других ферментов проявляется лишь по отношению к определенной химической группе, входящей в состав молекулы их субстрата. Ферменты, катализирующие реакции, в которых принимают участие оптически активные вещества, например сахара или аминокислоты, часто реагируют преимущественно или исключительно с одной из энантиоморфных форм. Даже такой фермент, как трипсин, действует только на некоторые связи субстрата. Действие фермента можно подавлять, увеличивая концентрацию одного из соединений, образующихся в результате той реакции, которую катализирует данный фермент, — явление, очень напоминающее специфическое подавление реакции антиген — антитело гаптеном. [c.81]

Гаптенное ингибирование представляет собой достаточно простой метод определения относительной стабильности приципитатов, образованных конканавалином А и рядом полисахаридов. Мерой стабильности служит число микромолей метил-а-в-маннопиранозида, вызывающее 50%-ное ингибирование реакции преципитации с данным полисахаридом. Стабильность преципитатов, несомненно, связана с такими особенностями структуры молекулы полисахарида, как природа и относительное количество терминальных невосстанавливающих гликозильных остатков, а также длина боковых цепей. Если боковые цепи полисахарида содержат по одному моносахаридному остатку, комплекс конканавалина А с этим полисахаридом очень легко диссоциирует под действием метил-а-о-маннопиранозида. [c.96]

Гаптенный ингибиторный анализ может применяться и для определения природы гликозидной связи в олигосахаридах, содержащих остатки п-глюкозы, 2-ацетамидо-2-дезокси-о-глюкозы и о-маннозы [25]. С этой целью изучается ингибирующее действие олигосахарида на преципитацию конканавалина А полисахаридом, которое далее сопоставляется с действием контрольных ингибиторов, таких, как мальтоза, изомальтоза и различные а-мапнобиозы. Основываясь на полученных данных, можно сделать вывод о положении связи между мопосахарид-ными звеньями, находящимися на невосстанавливающем конце полисахарида. [c.97]

Схема постановки отштов, разработанная Ландштейнером, включала иммунизацию кроликов гаптенбелковым комплексом и последующий анализ антисывороток от иммунизированных животных с тем же самым или иным гаптеном, но конъюгированным с другим неродственным белком. Подобный прием позволял работать только с антителами к гаптену и исключал те антитела, которые образовывались к эпитопам белка, взятого для иммунизации (рис. 1.3). В результате удалось показать решающую роль тонкой конфигурации Гаптена в определении специфичности. Другой пример, иллюстрирующий это основное положение, представлен в табл. 1.4. [c.40]

Изучение гаптенов имеет не только теоретическое значение для понимания явления антигенной специфичности, но и практическое приложение. Многие биологически важные соединения, включая пептищные и стероидные гормоны, циклические АМФ и ГМФ, лекарства и т.д., являются низкомолекулярными, неиммуногенными соединениями. Их конъюгация с иммуногенным белком позволяет получать антигаптеновые антитела. Такие антитела затем используются в тест-системах для определения уровня ана- [c.40]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология