Цитрат-синтетаза

Интересным фактом, касающимся стереохимии действия как оксалоацетат—ацетилгидролазы, так и цитрат-лиазы [уравнение (7-68)], является инверсия конфигурации, происходящая у атома углерода, несущего отрицательный заряд в отщепляющемся енолят-анионе. Эта инверсия, происходящая также при действии цитрат (ге)-синтетазы и других родственных ей ферментов, была продемонстрирована при использова- [c.168]

Цитрат далее транспортируется через митохондриальную мембрану в цитоплазму, где под действием фермента цитрат-синтетазы превращается в ацетил-8-КоА и оксалоацетат, который снова включается в образование цитрата в митохондриях. Полагают, что данный процесс обеспечивает перенос основного количества ацетил-5-КоА в цитоплазму, где он является субстратом для биосинтеза жирных кислот. [c.347]

На рис. 7-11 показана стереохимия реакций и, кроме того, приведен перечень кетонов, принимающих участие в реакции, и продуктов реакции. Эти ферменты могут быть разделены на две группы в зависимости от того, с какой стороны карбонильной группы происходит атака енолят-анионом. Обычная цитрат-синтетаза из тканей животных конденсируется с st-стороной и обозначается как цитрат (si)-синтетаза. В то же время в некоторых анаэробных бактериях содержится цитрат (ге)-син-тетаза, проявляющая противоположную стереоспецифичность [152, 153]. [c.168]

Цитратсинтетазная реакция — трехфазный процесс. Под воздействием цитрат-синтетазы водород метильной группы ацетилкоэнзима А активируется и превращается в энольную форму. [c.217]

Изящный вариант каскадной методики такого типа был продемонстрирован недавно на примере выделения цитрат-син-тетазы (К. Ф. 4.1.3.7) и фумаразы (К. Ф. 4.2.1.2) с использованием одной и той же аффинной колонки, содержащей пиромел--литовую кислоту (ПМК), присоединенную к сефарозе 4В через пространственную группу диаминопропанола. Экстракт ткани наносят на колонку с ПМК-сефарозой 4В в 0,01 М фосфатном буфере (pH 7,3), содержащем 0,01 М меркаптоэтанол. Цитрат-синтетаза сорбируется полностью, в то время как связывание фумаразы в присутствии фосфата подавляется (фосфат — конкурентный ингибитор этого фермента). Цитрат-синтетазу элюируют тем же буфером, содержащим 0,01 М лимонную кислоту. Полученный элюат наносят на колонку с гелем голубой сефарозы 4В, где фермент связывается количественно, и далее элюируют 0,01 М фосфатным буфером (pH 7,3), содержащим меркаптоэтанол (но не содержащим лимонной кислоты). Фракцию фумаразы, не сорбированную на ПМК-сефарозе 4В в условиях элюирования фосфатом и содержащую 100% ферментативной активности, подвергают диализу против 0,01 М трис-ацетатного буфера (pH 7,3), содержащего 0,014 М меркаптоэтанол и наносят на колонку с ПМК Сефарозой 4В в указанном буфере. При этом наблюдается количественное связывание фермента, элюирование которого проводят в присутствии ь-яблочной кислоты и далее, после удаления последней, фумаразу сорбируют на колонке с голубой сефарозой, а затем проводят элюирование, вновь добавляя яблочную кислоту в рабочий трис-ацетатный буфер. [c.190]

Хорошей иллюстрацией важности наличия четвертичной структуры у регуляторных ферментов служат данные Weitz-тап по цитрат-синтетазе, представляющей собой ключевой фермент цикла трикарбоновых кислот [29]. Оказалось, что цитрат-синтетазы из различных источников различаются по молекулярным весам (например, молекулярный вес фермента из Асте1оЬас1ег составляет около 250 000, а фермента из сердца свиньи — около 80000), и чувствительностью к аллостерическому ингибитору — НАДН обладают лишь цитрат-синтетазы с большим молекулярным весом. [c.95]

Гидратация фумарата проведена в тритированной воде, и образовавшийся малат окислен в оксалоацетат. Гидролиз последнего в присутствии оксалоацетат—ацетилгидролазы [уравнение (7-61)] в НгО приводит к образо вадию. оксалоацетата и хирального (В) ацетата. Тот же самый продукт может быть получен путем конденсации оксалоацетата с ацетил-СоА при использовании цитрат ( ге)-синтетазы. Образующийся цитрат расщепляется в НгО в присутствии цитрат-лиазы, имеющей з1-спёцифичность [154, 155]. Ацетат противоположной хиральности может быть получен ферментативным путем исходя из 2,3- Н-фумарата, гидратированного обычной водой в присутствии фумаразы. Хиральные ацетаты получены также неферментативным путем [154], и их конфигурация надежно установлена. [c.168]

Баланс цикла лимонной кислоты. В цикле лимонной кислоты для расщепления аце-тил-СоА используются восемь ферментов цитрат-синтаза, аконитаза, изоцитратдегидрогеназа, а-кетоглутаратдегид-рогеназа, сукцинил-СоА-синтетаза, сукцинатдегидрогеназа, фумараза и малатдегидрогеназа. [c.503]

Кроме того, при пиш еварении в клетках печени повышаются концентрации оксалоацетата и цитрата и, следовательно, активируется перенос ацетильных остатков из митохондрий в цитозоль (см. рис. 10.4). Цитрат к тому же является аллостерическим активатором ацетил-КоА-карбоксилазы. А конечный продукт действия пальмитоилсинтетазы — пальмито-ил-КоА — наоборот, ингибирует ацетил-КоА-синтетазу (рис. 10.10). [c.296]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология