Элюирование условия

Половинная прочность, с которой связывается медь на наполовину насыщенной Си-форме в использованных при элюировании условиях, позволяет на данной хроматографической колонке проводить практически любое число разделений без регенерации смолы. [c.216]

Периодический процесс разделения белков осуществляют путем их адсорбции и последующего элюирования. Условия проведения такой процедуры следует установить в ходе контрольных опытов с каждой партией адсорбента и обычно с каждым препаратом белка (фермента или антитела), предназначенным для разделения. На рис. 16.6 представлены результаты проведения циклов адсорбции и элюирования, полученные в контрольных опытах. На рис. 16.6, Л показаны три процесса адсорбции, различающиеся в зависимости от природы очищаемого материала, примесей и других параметров, например pH и ионной силы. Интересующий нас белок может адсорбироваться лучще, чем белки-примеси (слева), так же, как они (в центре), или хуже (справа). В первом случае к раствору добавляют такое количество адсорбента, какое необходимо для извлечения основной части нужного вещества, при этом большинство других белков остается в растворе (положительная адсорбция). Если нужный белок адсорбируется хуже примесей, то адсорбент добавляют, а затем удаляют до тех пор, пока не начнется адсорбция нужного белка (количество адсорбированного белка должно составлять около 10%). В этом случае вначале удаляются белки-при-меси (отрицательная адсорбция), после чего нужный частично очищенный материал можно адсорбировать или очистить каким-либо иным способом. Если примесный и основной белки адсорбируются с одинаковой скоростью, адсорбция может привести лишь к небольшой степени очистки. Тем не менее можно добиться положительных результатов, подвергнув очищаемый белок последовательным циклам адсорбции и элюции. [c.203]

Расстояние между пятном и стартовой линией зависит от природы растворителя, продолжительности элюирования, степени насыщенности атмосферы камеры парами растворителя, влажности бумаги или атмосферы камеры, типа бумаги, температуры, но главным образом от природы вещества. Это расстояние является типичной характеристикой определенного вещества для заданных условий. Для идентификации веществ в БХ используют относительную величину — / /, определяемую как отношение расстояния а (от стартовой линии до пятна) к расстоянию Ь (от стартовой линии до фронта растворителя) [c.240]

Подбором структуры нор и химии поверхности адсорбента, а также оптимальных условий элюирования можно осуществить концентрирование и очистку биополимеров методами адсорбционной и (или) ситовой хроматографии. В последнем случае крайне важно устранить сильную адсорбцию белков и вирусов на внешней поверхности макропористых зерен. [c.343]

Эти ряды изменяются в зависимости от природы сорбента, хроматографируемых веществ, растворов, применяемых при элюировании, и внешних условий эксперимента. [c.285]

В настоящее время известен метод с программированием газового потока , в котором в ходе элюирования непрерывно повышается скорость газа-носителя. Этот метод, так же как и программирование температуры, ведет к сокращению времени анализа. Комбинированием данных методов можно получить оптимальные условия проведения анализа. Для работы с программированием газового потока целесообразно применять капиллярные колонки. [c.370]

Метод газовой хроматографии основан на способности веществ сорбироваться тем или иным сорбентом и затем без каких-либо изменений смываться с сорбента — элюироваться. Разные вещества по-разному сорбируются одним и тем же сорбентом — одни лучше, другие хуже одни прочнее удерживаются на поверхности сорбента, другие — слабее. Поэтому при элюировании одни вещества будут вымываться медленнее, другие быстрее причем для каждого вещества в воспроизводимых условиях время, за которое оно будет элюировано с сорбента, будет определенным — характерным для этого вещества и данного сорбента. Это время носит название времени удерживания (туд). Пользуясь тем, что все компоненты смеси обладают разным временем удерживания, мож- [c.241]

При хроматографировании элюентным способом следует обеспечить такие условия, при которых не перекрываются выходные кривые на хроматограмме. Вместе с тем не следует стремиться к чрезмерному увеличению расстояния между зонами (выходными кривыми на хроматограмме), так как это связано с излишней затратой времени и реактивов. Иногда в процессе элюирования можно изменять состав элюента и благодаря этому достигать более полного разделения смеси на отдельные чистые фракции ионов. [c.120]

Возможность прогнозирования ус ловий хроматографического разделе ния анионов и катионов по концентрационным константам обмена показана И. К. Цитовичем и Ж. Н. Гончаренко [74] на примере ионообменной сорбции переходных металлов четвертого периода на катионите КУ-2 в Н-форме. В качестве элюирующих растворов применялись водно-спиртовые среды, 1 н. по соляной кислоте и содержащие различные количества метанола или этанола (50 и 80%). Для иллюстрации возможности расчета оптимальных условий элюирования при хроматографическом разделении ионов приведем основные результаты, полученные в исследованиях указанных авторов. [c.134]

Газ-носитель и адсорбенты. Газ-носитель. Природа газа-носителя существенно влияет на качество разделения веществ и их определение. Основными требованиями, предъявляемыми к газу-носителю как подвижной фазе, являются следующие газ-носитель должен быть инертен по отношению к разделяемым веществам и сорбенту, поэтому не рекомендуется использовать, например, водород для элюирования ненасыщенных соединений, так как может происходить их гидрирование вязкость газа-носителя должна быть как можно меньшей, чтобы поддерживался небольшой перепад давлений в колонке коэффициент диффузии компонента в газе-носителе должен иметь оптимальное значение, определяемое механизмом размывания полосы (в ряде случаев последние два условия противоречат друг другу, тогда газ-носитель необходимо подбирать в соответствии с конкретной задачей анализа) газ-носитель должен обеспечивать высокую чувствительность детектора поскольку при проведении хроматографического процесса расходуется значительное количество газа-носителя, необходимо, чтобы он был вполне доступен газ-носитель должен быть взрывобезопасным выполнение этого требования особенно важно при использовании хроматографов непосредственно на технологических установках газ-носитель должен быть очищенным. [c.84]

Получение аналитических концентратов. Для этого используют катиониты и аниониты. Основное условие эффективности концентрирования — поглощение ионов с максимально возможной величиной Ка и их элюирование при Ка 0. В таких условиях из большого объема раствора удается поглотить определяемые ионы на колонках небольших размеров, а затем элюировать поглощенные ионы небольшим объемом соответствующего реагента. При удачном выборе условий поглощения и элюирования одновременно с концентрированием определяемого элемента возможно его отделение от мешающих ионов. [c.205]

Как и в опытах по двухступенчатому хроматографированию опорной смеси, при соблюдении условия полного элюирования всех компонентов выделенной фракции из второй колонки до начала элюирования из первой колонки очередной зоны ее можно направлять на II ступень в этом же опыте. При удачном стечении обстоятельств в одном опыте удается провести вырезание всех элюируемых из колонки I ступени зон компонентов. [c.303]

Эти недостатки моншо устранить очень простым способом — непрерывным повышением температуры колонки в процессе опыта в соответствии с определенной программой. Если начальная температура Го. т. е. температура колонки в момент ввода пробы, является оптимальной для наиболее летучих компонентов смеси, то они выделяются из колонки в приемлемое время и при этом хорошо разделяются, а высококипящие компоненты смеси удерживаются в начале колонки. При повышении температуры условия элюирования последовательно становятся оптимальными для компонентов с более высокими температурами кипения и они начинают значительно быстрее двигаться вдоль колонки. Каждый компонент при повышении температуры колонки имеет оптимальную для него область температур и элюируется примерно с той же скоростью, что и другие, но в другое время. Поэтому компонепты смеси, резко различающиеся по температурам кипения, дают пики примерно одинаковой формы и ширины. [c.394]

Особый интерес представляют относительно немногие примеры, в которых реакции протекают непосредственно в условиях хроматографического элюирования. Газовая хроматография при этом является не только аналитическим вспомогательным средством, НОИ важнейшей неотъемлемой частью реакции. [c.470]

Прн жидкостном хроматографировании и элюирования зон в обычных условиях может применяться обыкновенная бюретка с тампоном из хлопчатой нлн стеклянной ваты для удержания адсорбента (рнс. 36,в). [c.142]

Таким образом, к категории слабых могут быть отнесены ионообменники, значительно отличающиеся друг от друга. Для них характерно не толыко сужение рабочего диапазона pH, но и уменьшение прочности сорбции вещества внутри этого диапазона. Слабым ионообменникам, в частности анионитам с замещающими группами диэтиламиноэтила (ДЕАЕ), отдают предпочтение в тех случаях, когда необходимо элюирование в мягких условиях, например, при разделении белков и пептидов. [c.35]

Следует также отметить, что при работе в обращенно-фазном режиме с системой метанол — вода, вязкость которой не аддитивна, а меняется от 1 до 1,5 и затем до 0,6 Мпа с при переходе от 100% воды к 100% метанола, колонка находится в неблагоприятных условиях, так как при постоянном расходе давление на колонку сначала возрастает в 1,5 раза, а затем падает в 2 раза к концу градиентного элюирования. Картина повторяется в процессе регенерации колонки, при возврате к слабому растворителю. Это сокращает срок службы колонки и затрудняет работу с колонками, содержащими мелкий сорбент (менее 5 мкм). [c.68]

Рефрактометр представляет собой недеструктивный концентрационный детектор средней чувствительности. Последняя определяется разностью показателей преломления элюента и анализируемых веществ и часто может быть повышена за счет правильного выбора подвижной фазы. В оптимальных условиях предел обнаружения для рефрактометра достигает 5 10" г/мл. Основные недостатки рефрактометрических детекторов— практическая невозможность использования при градиентном элюировании и необходимость тщательной стабилизации температуры. Для работы на максимальной чувствительности нужно поддерживать температуру элюента и обеих ячеек кюветы, с точностью до 10 -10 °С, что затруднительно даже при помещении кюветы в металлический блок с большой теплоемкостью и использовании эффективных теплообменников. Последние, в свою очередь, увеличивают мертвый объем между колонкой и кюветой детектора, что приводит к дополнительному размыванию хроматографических зон и снижению эффективности разделения. [c.153]

Основной величиной, характеризующей поведение вещества в условиях газовой хроматографии, является время элюирования [124]. Временем элюирования называют величину, показывающую, во сколько раз зона данного вещества движется по колонке медленнее, чем газ-носитель (например, водород). Эта характеристика зависит от таких параметров, как температура, скорость тока газа-носителя, качество наполнения колонки, размеры аппаратуры и т. д. Зависимость величины времени элюирования от скорости тока газа-носителя устраняется введением понятия удерживаемый объем [124], которое определяется как произведение времени элюирования на скорость протекания газа-носителя. Фактически это объем газа-носителя, прошедший через колонку с момента внесения образца до момента, когда данный компонент смеси выходит из хроматографической колонки в максимальной концентрации. [c.491]

Рис 7-14 Разделение ком понентов эпоксидной смолы Epikote 1004 с использованием метода градиентного элюирования Условия опыга те же что и на рис 7-13 Изменение состава элюента в процессе разделения показа но на рисунке Масса пробы О 2 мкг [c.171]

Следующее важное условие состоит в том, что хелат должен быть термически устойчивым, особенно если он обладает низкой летучестью поэтому требует высокой рабочей температуры (колонки. Для достижения хорошей воспроизводимости значений времени удерживания, жоторое представляет собой период времени от. вюедения образца в колонку до появления максимума пика яа кривой элюирования, условия опыта должны быть подобраны таким образом, чтобы яе происходило разложения хелата. Одним из путей предотвращения этого является наблюдение за полостью ввода образца с целью обнаружения возможного нелетучего остатка. Другой способ контроля заключается в анализе элюируемых компонентов. Хелатирующий агент должен подбираться с учетом чувствительности применяемого детектора. Например, в случае использования электронозахватяого детектора его чувствительность значительно повышается, если в состав молекулы реагента входит по крайней мере один атом галогена. Применение детектора, снабженного счетчиком радиоактивности, позволяет использовать реагенты, меченные радиоактивными изотопами. [c.240]

С технической стороны выполнение первых двух условий не связано с какими-нибудь трудностями. Более сложным является получение эталонных углеводородов. Одвака нет никакой необходимости в синтезе всех индивидуальных углеводородов, которые могут присутствовать в анализируемых смесях, т. е. нет необходимости полного повторения того пути, который у же был пройден исследователями, разрабатывающими эти методы. Для газохроматографических целей с успехом можно использовать методы равновесной изомеризации или метиленирования, позволяющие легко и быстро получать смеси необходимых для анализа углеводородов. При использовании в качестве неподвижной фазы сквалана в целях большей достоверности желательно проведение газохроматографических анализов при нескольких температурах, отличающихся на 10—20° С. При этом полезно, для целей более надежной качественной идентификации, использовать следующие изменения в характере элюирования углеводородов различного строения. С повышением температуры уменьшаются времена удерживания алканов и, менее значительно, пятичленных цикланов. Углеводороды, имеющие групировку четвертичного атома углерода, начинают элюироваться позднее, чем их изомеры, не содержащие этой группировки. Само собой понятно, что понижение температуры приводит к противоположным эффектам. [c.337]

После заполнения колонки ионитом, обработки буферным раствором и BBo.jM пробы приступают к элюированию — пропусканию элюента через колонку. Элюирование может быть простое, когда используют один элюент, такой же, как взятый для растворения пробы, и ступенчатое, при котором элюирование ведут более сильными элюентами, чем растворитель, использованный для растворения пробы. Если хроматографическая колонка заполнена катионитом в Н + -форме, то концентрация ионов Н + в элюенте должна быть более высокой. Для колонок, заполненных анионитом в ОН -форме, концентрация ОН -ионов в элюенте должна возрастать. Если применяется ионит в солевой форме, то используют элюенты с возрастающей концентрацией других противоионов, чтобы обеспечить условия десорбции. Для создания необходимой ионной силы в элюент добавляют нейтральные электролиты (K I, Na l). [c.360]

К сожалению, часто встречается эмпирический. подХод к использованию хроматографии в аналитических целях. Прогнозирование условий хроматографического разделения неорганических ионов почти не применяется, теоретические положения мало используются на практике. По-этбму в настоящем пособии подробно рассмотрен вопрос о том, как, пользуясь константами ионного обмена, можно рассчитать оптимальные условия разделения ионбв в хроматографической колонке (объем промывной жидкости, ее концентрацию для элюирования и т. д.). [c.4]

Для выбора оптимальных условий хроматографического разделения были рассчитаны объемы промывных растворов, соответствующие максимумам выходных кривых для каждого иона (Ктах), при задэнных величинах концентрации элюентов по иону-вытеснителю. Эти расчеты выполнялись при помощи уравнения Г, М. Колосовой и М. М. Сенявина (П. 97) путём подстановки в него известных значений концентрационных констант ионного обмена, взятых из табл. 6. В табл. 8 приведены в качестве примера расчетные величины Утах для элюирования катионов раствором соляной кислоты, содержащим 80% этанола. [c.136]

Теоретическому обоснованию прогнозирования условий хроматографического разделения смесей редкоземельных элементов с применением комплексообразующего элюирования посвящено исследование А. М. Сорочан и М. М. Сенявина [45]. Они вывели уравнение, связывающее коэффициент распределения Кр с величинами, характеризующими процесс комплексообразующего вымывания, — константой обмена иона металла на водород /Сме.н и константой устойчивости несорбируемого комплекса Куст-Ме + + пкч- = [MeA ] - [c.138]

В колоночной (в том числе газовой) хроматографии по достижении положения, показанного на рис. 61, б, подачу подвижной фазы не прегфащают. Хроматографирование продолжают до тех пор, пока подвижная фаза выносит из колонки разделяемые вещества. Этот процесс называют элюированием, а выходящую из колонки подвижную фазу, содержащую разделяемые вещества, — элюатом. Элюат обычно контролируют на содержание разделяемых веществ с помощью датчиков, которые называют детекторами. Сигналы детекторов принимаются измерительными приборами и передаются к самописцам. Получают хроматограммы, подобные той, которая показана на рис. 61, в. Если на оси абсцисс отложено время, по хроматограмме можно определять время удерживания вещества в колонке. Для 81 это 1, а для 83 — 2 (отсчет времени ведется с момента ввода смеси разделяемых веществ). Часто все же по оси абсцисс откладывают не время, а объем элюата. Нулевая точка тогда соответствует выходу той порции подвижной фазы, в которую была введена смесь разделяемых веществ. Потом в элюате меняются концентрации разделяемых веществ в соответствии с различными степенями их удерживания. По полученной хроматограмме определяют объем удерживания. Для 81 это v , а для 83 = а-Время (объем) удерживания при постоянных условиях хроматографирования представляет собой величину, характерную для данного вещества. Поэтому наряду с другими методами обнаружения для идентификации веществ можно использовать значения времени (объема) удерживания. Количества же разделенных веществ пропорциональны площадям их пиков. Это используют для проведения количественных определений. Можно также собрать отдельные порции элюата и определить содержание в них разделяемых веществ с помощью подходящих методов количественного анализа. [c.258]

Ступенчатое элюирование проводят различными растворителями так, что новый растворитель поднимается по пластине выше уровня предыдущего. При этом методика элюирования может быть различной сначала пластину помещают в более полярный, а затем в менее полярный растворитель нли наоборот. Это и отличает ступенчатое элюирование от градиентного, в условиях которого свойства элюента изменяют в определенном направлении. Чаще всего компоненты движутся от менее к более полярным элюен-там. Зачастую разделение компонентов смеси значительно улучшается при элюировании в двух взаимно перпендикулярных направлениях. Этот метод называют двумерной ТСХ. В том случае, когда пластины покрыты тонким плотным слоем сорбента с однородными сферическими частицами небольшого размера (5—10 мкм), можно достичь лучшего разделения компонентов смесн на более коротких пластинах. При этом хроматографируют меньшие пробы. Такой вариант получил название в1.1сокоэффективной ТСХ (ВЭТСХ). [c.612]

В дальнейшем оба процесса (создание градиента растворителей и разделение образца на группы) были осуществлены в одной хроматографической колонке (см. рис. 1, б). Реализация этого способа элюирования подбором растворителей и других условий разделения с использованием жидкостного хроматографа позволила предложить методику разделения мальтеновой части нефтяных остатков на три группы [2, 4]. [c.6]

На рис. 3 представлены хроматограммы, полученные прн определении I) -бензола (Б), дихлорэтана (В), диизоамило-вого эфира (Г) и этилацетата (Д). Для сравнения здесь же дана хроматограмма, полученная только с подвижной фазой (А). В этих условиях было определено относительное время удерживания двадцати двух растворителей, образующих, элюотропный ряд (табл. 1). Р.стественно, что этот элюотропный ряд не исключает возможности применения других растворителей для разделения нефтепродуктов. Следует иметь в виду, что растворители, применяемые для хроматографического разделения нефтепродуктов, должны иметь низкую-температуру кипения, не вступать в химическое взаимодействие с компонентами пробы адсорбентом и другими растворителями. Широкие возможности такого способа элюирования хорошо иллюстрируются хроматограммами, приведенными на рис. 4. Разделение осуществлялось в капиллярной колонке высотой 250 мм, диаметром 1,2—1,4 мм на силика-, [c.8]

Две группы смол и асфальтены характеризовались одноимен- ыми группами, полученными методом ВНИИ НП при разделении гудрона котуртепинской нефти. При таком подходе качественный состав группы определяется следующим условием концентрация растворителя, элюирующего данную группу, должна обеспечивать полное элюирование её граничного компонента, е увлекая с собой значительных количеств компонентов следующей группы. Исходя из условия необходимой воспроизводимости и удобства дозирования растворителей был выбран следующий состав подвижной фазы для аналитического разделения высококипящих нефтепродуктов, не содержащих асфальтены. [c.11]

Разнообразны техн. приемы, используемые в БХ. Бумаге придают любую форму, удобную для техн. осуществления элюирования компонентов, что обеспечивает определ. скорость протекания р-рителя. БХ можно проводить в центробежном поле нлн в условиях градиента т-ры, что увеличивает эффективность и скорость разделения. [c.669]

Компьютерные системы обработки данных являются наиболее сложными и дорогими. Они делятся на две группы. Устройства первой группы предназначены только для обработки данных и представляют собой малогабаритные вычислительные машины с большим объемом памяти, которые выполняют разнообразные сложные расчеты (например, в эксклюзионной хроматографии) и представляют результаты в цифровой и графической форме. Устройства, относящиеся ко второй группе, кроме обработки данных, осуществляют управление различными элементами хроматографической системы. К тагим элементам относят, в частности, установку параметров процесса (температура, скорость потока, условия детектирования и др.) и состав подвижной фазы в изократическом и градиентном элюировании, режим работы автоматического дозатора и т.п. Все необходимые параметры постоянно контролируются, что гарантирует их стабильность в процессе разделения. [c.160]

Выделение свободного 3-аланина или его соли. Метод выделения зависит от того, в виде какой соли получают 3-аланин при гидролизе. Если этот процесс осуществляют соляной кислотой, то получают хлоргидрат 3-ала-нина. Для выделения из этой соли свободного 3-аланина предложены различные реагенты гидрат окиси лития [40, 51], окись свинца, а затем обработка водородом [40]. Эти реагенты либо дороги, либо требуют сложной обработки во вредных условиях. Наиболее эффективным является метод ионообмена на катионите КУ-2 [52] с элюированием 2%-ньм раствором аммиака с последующим выпариванием и кристаллизацией. Выход 92,0%. [c.140]

В качестве ионитов обычно используют ионообменные высо молекулярные соединения — ионообменные смолы кислого или новного характера, нерастворимые в воде и органических раство] телях. Полученные извлечения пропускают через колонку, зап( ненную сорбентом. Сорбент и условия адсорбции должны бь выбраны такие, чтобы адсорбция извлекаемого вещества (или ществ) была избирательной и максимальной. Десорбция (элюиро ние) алкалоидов проводится подходящим растворителем, обеспе вающим максимальное элюирование. [c.134]

В зависимости от положения пластинки и направления потока элюента различают восходящую, нисходящую и горизонтальную ТСХ. По технике работы выделяют фронтальный анализ (когда подвижной фазой служит анализируемая смесь) и обычно используемый элюционный вариант. Применяют также круговую (когда анализируемый р-р и р-ритель последовательно подаются в центр пластинки) и антикруговую ТСХ (когда анализируемый р-р наносится по окружности и элюент перемещается от периферии к центру пластинки), ТСХ под давлением (когда р-ритель под давлением пропускают через слой сорбента, покрытый плотно прижатой полиэтиленовой пленкой), а также ТСХ в условиях градиента т-ры, состава сорбента н т. п, В т. наз. двухмерной ТСХ хроматографич. процесс осуществляют последовате.чьно в двух взаимно перпендикулярных направлениях с разл. элюентами, что увеличивает эффективность разделения, С этой же целью применяют многократное элюирование в. одном направлении. [c.608]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология