Определение изоэлектрической точки казеина

При некотором (определенном для каждого белка) значении pH среды степень диссоциации макромолекул по кислотному и основному типам становится одинаковой, из-за чего макромолекулы белка становятся нейтральными (положительные заряды одних их ионогенных групп полностью нейтрализуются отрицательными зарядами других ионогенных групп). Такое состояние белка называется изоэлектрическим его состоянием, а pH среды, отвечающее этому состоянию, — изоэлектрической точкой (ИЭТ). Например, ИЭТ казеина и желатина равны соответственно 4,6 и 4,7. Поскольку [c.361]

Определение изоэлектрической точки казеина [c.31]

Раствор белка — казеина — устойчив только в определенной области pH. При приближении к изоэлектрической точке раствор казеина становится все менее и менее устойчивым, что выражается в выпадении его в осадок. Наибольшее количество осадка выпадает при изоэлектрической точке. На этом основан описываемый ниже метод определения изоэлектрической точки казеина. [c.175]

Работа 18. Определение изоэлектрической точки казеина [c.31]

Опыт И. Определение изоэлектрической точки казеина. Казеин представляет собой белок. Общую формулу молекулы белка можно записать так [c.155]

Белки благодаря своему большому молекулярному весу находятся в коллоидальном состоянии. Белковые молекулы содержат некоторое количество свободных карбоксильных и аминных групп, и поэтому белки относятся к амфотерным электролитам. В щелочной среде белок диссоциирует, как кислота, в кислом растворе — как щелочь. Отсюда следует, что в щелочном растворе молекулы белка заряжены отрицательно, а в кислом — положительно. При прохождении постоянного электрического тока через щелочной раствор белка молекулы его движутся к аноду, а через кислый раствор белка — к катоду. При определенной для каждого белка концентрации водородных ионов количество положительных и отрицательных зарядов в молекуле белка становится одинаковым, и белки перестают передвигаться в электрическом поле. Концентрация водородных ионов реакция среды), при которой в молекуле белка устанавливается равенство положительных и отрицательных ионов, носит название изоэлектрической точки данного белка. Изоэлектрическая точка для различных белков оказывается неодинаковой. Так, например, для казеина изоэлектрическая точка находится при pH 4,7, для яичного альбумина — при pH 4,8, сывороточного глобулина — при pH 5,4, для эдестина из семян конопли — при pH 5,5, для зеина кукурузного зерна — при pH 6,2 и т. д. [c.36]

Ход определения. 0,2 г полученных ранее препаратов альбуминов и глобулинов или казеина растворяют при осторожном нагревании на водяной бане в 5 мл 0,5 и. СНзСООМа. Раствор доводят водой до объема 25 мл. Для определения изоэлектрической точки растворенного белка берут 8 пробирок и в каждую из них вносят по 1 мл раствора, а также добавляют воду и 0,01 н. или 0,1 и. растворы уксусной кислоты в количествах, указанных в таблице 3. Содержимое пробирок осторожно перемешивают. При значении pH, равном или очень близком к ИЭТ белка, белок выпадает в осадок, что можно установить по появлению небольшой мути в соответствующей пробирке. [c.54]

Определение изоэлектрической точки казеина. В 7 пробирок наливают 0,1 н. раствор уксусной кислоты и дистиллированную воду в количествах, указанных в таблице (см. таблицу). В каждую пробирку прибавляют по 0,2 мл 0,4% раствора казеина в 0,2 М растворе уксуснокислого натрия. При смешивании уксуснонатриевого раствора казеина с уксусной кислотой в каждой пробирке устанавливается определенный pH. Во есех пробирках, кроме крайних, появляется муть, постепенно оседающая на дно. Наибольшее количество осадка наблюдается в той пробирке, pH которой соответствует изоэлектрической точке казеина. [c.30]

Описанный метод определения изоэлектрической точки казеина является косвенным. Его можно лроверить путем электрофореза, наблюдая за движением границы раствор казеина — ацетатный буфер того же состава. За передвижением границы можно проследить из-за раствора мутности казеина при условии хорошего освещения прибора сбоку. Измерения производятся с растворами 1, 2, 3, 4, 7, 8, 9. Изоэлектрическая точка находится по графику и = /(pH) как точка пересечения кривой оси абсцисс. [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология