Прикрепление клеток

Рнс. 1036. Схема прикрепления клеток микроорганизмов к носителю [c.559]

Не все протеогликаны являются секретируемыми компонентами внеклеточного матрикса. Некоторые из них входят в состав плазматической мембраны, и иногда гакие протеогликаны содержат сердцевинный белок, ориентированный поперек липидного бислоя. Протеогликаны клеточных мембран обычно состоят лишь из небольшого числа гликозаминогликановых цепей и, но-видимому, играют какую-то роль в прикреплении клеток к внеклеточному матриксу и в организации макромолекул матрикса, секретируемых клетками. [c.494]

Химические методы иммобилизации клеток базируются на использовании бифункциональных реагентов для прикрепления клеток к носителю либо на смешивании клеток между собой, в результате чего образуются бактериальные пленки или определенные конгломераты. При иммобилизации химическими методами используется способ ковалентного связывания клеток с силикагелем, активированным хлоридом хрома или титана применяется метод закрепления клеток на желатиноподобном матриксе гидроокисей титана и циркония. [c.94]

Посеять 8" 10 клеток на чашку Петри диаметром 90 мм. При посеве в бутыли Ру в каждый сосуд вносить по 20-10 —30-10 клеток. Только половина внесенных в сосуд эмбриональных клеток оказывается способна к прикреплению и дальнейшему росту. При снижении концентрации клеток в суспензии происходит снижение доли способных к прикреплению клеток, особенно если величина инокулята становится меньше 10 клеток на чашку диаметром 90 мм (10 клетка/мл). [c.71]

Нитевидные псевдоподии — своеобразные органы чувств , распознающие состав внеклеточной среды, прикасаясь и прилипая ко всем препятствиям (веществам или к обломкам клеток).. Они могут служить средством прикрепления клеток к различным поверхностям. [c.22]

Хотя капсулы, слизистые вещества и чехлы являются необязательными структурами прокариотной клетки, им приписывают определенные полезные для клетки функции. Вязкость внеклеточной среды, обусловленная наличием слизистых веществ, очевидно, благоприятна для клетки. Они защищают клетку от механических повреждений, высыхания, создают дополнительный осмотический барьер, служат препятствием для проникновения фагов. Иногда слизистые образования могут служить источником запасных питательных веществ. С помощью слизи осуществляется связь между соседними клетками в колонии, а также прикрепление клеток к различным поверхностям. В настоящее время способность определенных бактерий синтезировать эти своеобразные внеклеточные полимеры находит практическое применение их используют в качестве заменителя плазмы крови, а также для получения синтетических пленок. [c.33]

Если это изменение в методике не повышает выход гибридных клеток, более успешной может оказаться альтернативная методика слияния, пригодная для растущих на подложке прикрепленных клеток (табл. 3). [c.15]

Таблица 3. Методика слияния для прикрепленных клеток

Во многих лабораториях в настоящее время для культур тканей используется пластмассовая посуда одноразового применения. Эти сосуды оптически прозрачны и подготовлены для использования в культивировании тканей путем модификации пластика, увеличивающей его смачиваемость и облегчающей прикрепление клеток. Некоторые культуральные сосуды выпускаются в стерилизованном виде. В целом пластмассовую посуду удобно применять и в процессе наращивания клеток, и для решения экспериментальных задач. В то же время одноразовая культуральная посуда является дорогой. [c.20]

Вызывает прикрепление клеток к субстрату Подавляет активность трипсина Облегчает прикрепление клеток Связывает Ре + [c.28]

Вызывает прикрепление клеток, индуцирует клеточную дифференцировку Митогены [c.28]

III. Используйте субстрат, облегчающий прикрепление клеток, покрывая поверхность культуральной посуды (а) поли-О-лизином, (б) коллагеном или (в) фибронектином (см. разд. 6). [c.49]

Поверхности клеток животных и поверхности традиционных культуральных сосудов из стекла и пластика несут отрицательные заряды. Поэтому для прикрепления клеток необходимо образование поперечных сшивок с гликопротеинами, а также присутствие двухвалентных катионов Са +, Наиболее изученным из таких гликопротеинов является фибронектин. Он имеет молекулярную массу 220000 дальтон, синтезируется многими клетками и присутствует в сыворотке и других физиологических жидкостях. И хотя клетки могут, по-видимому, прикрепляться за счет одних только электростатических взаимодействий, было показано, что механизм прикрепления оказывается [c.76]

Клеточная иммобилизация — это процесс, при котором клетки прикрепляются к какой-либо поверхности так, чтобы их гидродинамические характеристики отличались от характеристик окружающей среды. Обычно это достигается путем значительного увеличения эффективного размера или плотности клеток при агрегации или с помощью прикрепления клеток к какой-либо несущей поверхности. Такие флокулированные клетки в виде больших агрегатов, в которых клетки прикреплены друг к другу, могут рассматриваться как иммобилизованные, если флокулы могут быть быстро отделены от жидкости с помощью относительно грубых фильтров или быстрого осаждения. Другим примером иммобилизованных клеток являются клетки, прикрепленные к твердым частицам со сравнительно высокой относительной плотностью, что делает возможным их отделение от жидкости. [c.166]

Внеклеточный матрике содержит несколько адгезивных 1ликонротеинов, которые связываются и с клетками, и с другими макромолекулами матрикса, способствуя прикреплению клеток к матриксу. Из них лучше всего охарактеризован фибронектин - крупный, образуюш,ий фибриллы гликопротеин, встречаюш,ийся во всем животном царстве. Это димер, состояш,ий из двух одинаковых субъединиц (каждая почти из 2500 аминокислотных остатков) субъединицы соединены парой дисульфидных связей вблизи от карбоксильных концов и свернуты в серию глобулярных доменов, разделенных участками гибкой полипептидной цепи (рис. 14-46). Как показывает секвенирование, молекула фибронектина состоит в основном из трех коротких много раз повторяюш,ихся последовательностей аминокислот, и это позволяет предполагать, что ген, кодируюший фибронектин, образовался в результате многократной дупликации трех малых геиов. [c.504]

Для трансфекции используйте 10 мкг ДНК плазмиды трансфекцию проводите СаР04-методом, описанным в гл. 6 книги II из этой серии [34]. После завершения трансфекции инкубируйте клетки в неселективной среде, чтобы нормализовать клеточные процессы. На этом этапе эксперимента можно точно установить число трансфицированных клеток, если подсчитать число клеток на параллельрюй чашке (методы подсчета прикрепленных клеток изложены в гл. 6). В качестве контроля используйте клетки, обработанные СаР04 без плазмидной ДНК- [c.246]

Ионы Са + необходимы для прикрепления клеток к стеклянной или пластиковой поверхности и в связи с этим не входят в состав СБСР для суспензионных культур в таких СБСР концентрация фосфата увеличивается обычно в 10 раз (Eagle, 1959). [c.77]

В роли селективного фактора могут выступать антитела. При этом мы получаем возможность выделять клетки с определенным набором антигенов клеточной поверхности [31]. Применение антител лежит в основе ряда методов, среди них отбор клеток с помощью клеточного сортера, розеткообразование с эритроцитами, связанными антителами, избирательное прикрепление клеток к поверхности с иммобилизованными на ней антителами. Хотя эффективность селекции клеток с помощью антител недостаточно высока (и более правильным было бы назвать этот метод обогащением), тем не менее селекция с использованием антител применяется во всех методах переноса генов, описываемых здесь, за исключением MMGT. [c.12]

Ксенон подавлял также прикрепление клеток HeLa к стеклу. [c.169]

Исходный маточный раствор коллагена может быть также нейтрализован и разведен культуральной средой. В этом случае коллаген образует гель благодаря повышенным значениям pH и концентрации солей. Денатурированный (высушенный на воздухе) коллаген облегчает прикрепление клеток (например, клеток эндотелия и скелетных мышц), а нативный (неденату-рированный) коллаген может оказаться необходимым для правильной фенотипической экспрессии. [c.53]

II. Плуроник F-68 (полигликоль) (BASF Wyandot orp. In ., USA) часто добавляется в среды до концентрации 0,1% для снижения количества пены, образующейся в культурах в результате вращения мешалки или искусственной аэрации, особенно при использовании сывороток. Препарат предотвращает прикрепление клеток к стеклу благодаря подавлению стимулирующего действия сыворотки на этот процесс. [c.61]

Большой культуральный сосуд фирмы Sterlin, размерами 25X10 см снабжается патроном, содержащим свернутую по спирали пластиковую пленку с общей поверхностью 8500 см . Строго говоря, эта система не относится к вращающимся бутылям, поскольку вращение со скоростью 2—3 об/ч осуществляется только на фазе прикрепления клеток (3—16 ч). После прикрепления клеток сосуд устанавливается вертикально, и, поскольку весь он заполнен средой (1,8 л), аэрация осуществляется путем пробулькивания. Эта система успешно используется для линий гетероплоидных клеток, таких как ВПК и ЗТЗ, [c.79]

Значительно более крупный вариант с использованием титановых дисков, обеспечивающий общую рабочую поверхность 1,7 м , поставляется фирмой Biote In , Эта система в настоящее время почти не используется, так как пласты клеток, достигшие полного монослоя, часто отделяются от диска. Однако принципы этой системы были перенесены в ферментёр со стопой пластин (разд. 3.6.2). Главным недостатком систем с вертикальными пластинами является сложность достижения равномерного прикрепления клеток при заполнении сосуда наполовину. [c.81]

VI. После прикрепления клеток начните перфузию колонки средой, сначала с низкой скоростью (1 см в 10 мин). Визуально контролируйте помутиение оттекаюш,ей среды, свидетельствующее об отсутствии прикрепления клеток (в этом случае прекратить перфузию). [c.85]

VI. Если при смепе среды обнаруживается значительное прикрепление клеток к поверхности культурального сосуда, особенно на границе среды и воздуха, добавьте в сосуд после удаления среды смесь трипсина (0,01%) и версена (0,01%) и инкубируйте при перемешивании в течение 30 мин при 37 °С. Открепившиеся клетки соберите центрифугированием. Если в суспензии появляются агрегаты клеток, их также можно обработать смесью трипсина и версена, Такая обработка обычно необходима при первой и второй сменах среды, но в дальнейшем необходимость в ней, как правило, отпадает. Если агрегация клеток сохраняется, добавьте в ростовую среду трипсин (50 мкг/мл) или диспазу (Boehringer). [c.96]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология