Культивирование тканей человека

Недавно для длительного культивирования взрослых тканей человека, таких как эпителий бронхов и молочной железы, пищевод и шейка матки [20—23], был успешно использован новый метод, обеспечивающий попеременное экспонирование ткани в среде и в газовой фазе. Для этого эксплантаты прикрепляются к дну пластикового культурального сосуда н покрываются средой. Сосуды затем помещают в камеру, заполняемую соответствующей газовой смесью. Камеру устанавливают на специальную платформу, которая в ходе культивирования качается с определенной -скоростью. [c.217]

Длительное культивирование взрослых тканей человека [c.238]

Исходя-из этих задач, был разработан метод культивирования, согласно которому ткань человека попеременно подвергается воздействию жидкой среды и соответствующей газовой фазы. С помощью этого метода можно поддерживать рост и дифференцировку ткани в культуре в течение продолжительного времени. [c.238]

В искусственных условиях культивирования клетки человека прикрепляются к поверхности сосуда с питательной средой и начинают активно делиться. Нормальные клетки, полученные из разных типов тканей, делятся до тех пор, пока не покроют поверхность сосуда полностью и не начнут контактировать между собой. То есть нормальные клетки образуют однослойные культуры. Опухолевые же клетки преодолевают барьер контактного торможения и могут образовывать многослойные культуры. [c.232]

Техническую вооруженность биотехнологических процессов целесообразно условно ограничить аппаратурным оформлением производств, базирующихся на культивировании 1) бактерий и грибов, 2) клеток и тканей растений, 3) клеток и тканей животных организмов и человека Такое подразделение обусловлено тем, что бактерии и грибы в большинстве своем выращивают в однотипных биореакторах, имеющих почти однотипную обвязку, в которую входят ферментатор, многокорпусный вентиль стерильный (для подачи питательной среды, посевного материала, подпитки и пр ), системы регулирования pH, 1°, подачи пеногасителя, система контроля расхода воздуха, пробоотборник, электродвигатель [c.296]

Первоначальная информация о структуре вируса гриппа была> получена методом электронной микроскопии. Вирусы гриппа, прошедшие несколько циклов культивирования на хорион-аллантоис-ной мембране куриного эмбриона, выглядят в электронном микроскопе при негативном контрастировании как регулярные структуры диаметром 80—120 нм. Штаммы же вируса, выделенные ог человека или животных и накопленные ограниченной серией пассажей в культуре ткани, демонстрируют более выраженную [c.31]

Многие методы органной культуры обеспечивают рост и дифференцировку эксплантированного органа in vitro только в течение ограниченного периода времени. Часто решение какой-либо проблемы может быть достигнуто в течение дней или недель культивирования, но в других случаях требуется более долгий период поддержания органной культуры. Такая необходимость возникает, в частности, при изучении канцерогенеза тканей человека, требующего длительного воздействия канцерогенных агентов. [c.238]

Идея культивирования тканей in vitro принадлежит профессору Харьковского университета И. П. Скворцову (1886), который в 1885 г. провел опыты по культивированию клеток крови лягушки, птиц и человека во влажной камере. Он выращивал ткани в течение нескольких месяцев, добавляя к культурам свежую питательную Н4ИДкость, состоящую из 1% раствора либиховского экстракта. Свои первые работы по культивированию ткани вне организма И. П. Скворцов опубликовал в Трудах Медицинскои секции Общества опытных наук при Харьковском университете в 1S86 г. [c.2]

Следует отметить, что методом переживающих тканей была установлена возможность размножения вируса полиомиелита в тканях не нервного происхождения (Эндерс, Уеллер, Роббинс, 1949). Для культивирования вируса полиомиелита были использованы различные ткани человека и обезьяны. Наиболее удовлетворительные результаты получены на почечной ткани обезьяны. Среды состояли либо из снеси 75% раствора Хэнкса и 25% ультрафильтрата коровьей сыворотки, либо из среды 199. Наибольшая концентрация вируса 13 питательной среде культуры наблюдалась между 8-м и 12-м днем инкубации. [c.53]

Культивирование. Большинство энтеровирусов, за исключением вирусов Коксаки А, хорошо репродуцируются в первичных и перевиваемых клеточных культурах из тканей человека и обе- [c.222]

Кровь, лнмфа, тканевые жидкости человека представляют собой водные растворы молекул н ионов многих веществ. Их суммарное осмотическое давление при 37° С составляет 7,7 атм. Такое же давление создает и 0,9%-ный (0,15 М) раствор Na l, являющийся, следовательно, изотоничным крови. Его называют чаще физиологическим раствором, хотя этот термин в настоящее время признается неудачным. Это объясняется тем, что в состав крови входит не только Na I, но и ряд других солей и белков, представляющих собой также осмотически активные вещества. Поэтому более физиологическими будут растворы, включающие соли, белки и другие вещества в пропорциях, соответствующих их содержанию в крови человека. Указанные растворы находят применение в хирургии в качестве кровезаменителей, а также при культивировании клеток и тканей. [c.41]

Важным достижением в этой области оказалась разработка метода культивирования фибробластов эмбриона с целью проведения внутриутробной (пренатальной) диагностики наследственных нарушений метаболизма (дополнение 1-Г). Легче всего удается культивировать эмбриональные или раковые клетки, но в определенных условиях можно получить культуры многих других тканей. Следует иметь в виду, что клетки, которые лучше всего растут, не вполне нормальны например, широкоизвестная линия клеток HeLa (клеток рака человека, которых выращивают уже много лет в лабораториях всего мира) содержит 70—80 хромосом вместо обычных 46. [c.55]

Для всестороннего изучения морфолого-физиологических свойств и продуктов обмена, прежде всего, микробов все ранее предложенные способы их выращивания оказались малопригодными Более того, накопление однородной по возрасту большой массы клеток оставалось исключительно трудоемким процессом Вот почему требовался принципиально иной подход для решения многих задач в области биотехнологии В 1933 году А. Клюйвер и Л X Ц Перкин опубликовали работу "Методы изучения обмена веществ у плесневых грибов", в которой изложили основные технические приемы, а также подходы к оценке и интерпретации получаемых результатов при глубинном культивировании грибов С этого времени начинается третий период в развитии биологической технологии — биотехнический Началось внедрение в биотехнологию крупномасштабного герметизированного оборудования, обеспечившего проведение процессов в стерильных условиях Особенно мощный толчок в развитии промышленного биотехнологического оборудования был отмечен в период становления и развития производства антибиотиков (время второй мировой войны 1939 — 1945 гг, когда возникла острая необходимость в противомикробных препаратах для лечения больных с инфицированными ранами) Все прогрессивное в области биологических и технических дисциплин, достигнутое к тому времени, нашло свое отражение в биотехнологии Следует отметить, что уже в 1869 г Ф Мишер получил "нуклеин (ДНК) из гнойных телец (лейкоцитов), В Оствальд в 1893 г установил каталитическую функцию ферментов, Т Леб в 1897 г установил способность к выживанию вне организма (в пробирках с плазмой или сывороткой крови) клеток крови и соединительной ткани, Г Хаберланд в 1902 г показал возможность культивирования клеток различных тканей растений в простых питательных растворах, Ц Нейберг В 1912 г раскрыл механизм процессов брожения, Л Михаэлис и М Л Ментен в 1913 г разработали кинетику ферментативных реакций, а А Каррел усовершенствовал способ выращивания клеток тканей животных и человека и впервые применил экстракт эмбрионов для ускорения их роста, Г А Надсон и Г С Филлипов в 1925 г доказали мутагенное действие рентгеновских лучей на дрожжи, а в 1937 г Г Кребс открыл цикл трикарбоновых кислот (ЦТК), в 1960 [c.16]

Гистохимическими методами изучена динамика содержания гликогена в клетках первично-эксплантированных (почечная ткань макаки-резус, клетки амниона человека, фибробласты куриного эмбриона) и перевиваемых (амнион человека, сердце макаки-циномоль-гус, НеЬа, Нер-2) однослойных культур ткани. Обнаружена зависимость интенсивности отложения гликогена от количества его в исходных тканевых клетках. В первично-эксплантированных культурах в течение первых суток культивирования отложение гликогена незначительно, оно усиливается на 3—4-е сутки культивирования. В перевиваемых клеточных линиях уже на первых этапах культивирования отмечены значительные отложения гликогена. Это связано, очевидно, с разной степенью адаптации клеток двух категорий [c.217]

Примеры зимограмм для шести таких аллоферментов из линий клеток человека приведены на рис. 4.7. В случае АДА для простоты приведены только эритроцитарные формы. В клетках человека из некоторых других тканей обнаруживаются дополнительные АДА. Они могут представлять собой вторичные формы изоферментов АДА, образующиеся из изозимов АДА эрит-роцнтарного типа путем посттрансляционной модификации. Более того, экспрессия изоферментов АДА может зависеть также и от условий культивирования [23]. [c.138]

Кроветворная и лимфоидная ткани составляют в организме во многих отношениях единую систему. Хорошо известно, что степень разделенности этих тканей в кроветворных органах у разных животных не одинакова. В частности, для грызунов (ткани которых чаще всего используются для эксплантации) характерен так называемый лимфоидный тип кроветворения, при котором содержание лимфоцитов в периферической крови и лимфоидных клеток в костном мозге выше, чем у человека. Несмотря, однако, на эту очевидную общность, между кроветворной и лимфоидной тканью есть ряд существенных функциональных и, что особенно важно при эксплантации, гистогенетических отличий. Целесообразно поэтому рассмотреть отдельно проблемы, связанные с культивированием каждой из этих тканей. [c.7]

Использование культивируемых клеток вне организма для диагностики наследственных болезней является логическим продолжением метода биопсии, при котором изъятый из организма фрагмент ткани подвергается немедленному (преимущественно морфологическому) исследованию. Однако благодаря культивированию возможности исследования и диагностики расширяются практически беспредельно, так как имеется возможность оценки не только морфологических и биохимических изменений, но и изменений в поведении клеток, их реакций на различные агенты, в том числе на лекарственные воздействия. Воспроизведение культивируемыми клетками в ряду поколений какого-либо дефекта или изменения, свойственного клеткам in vivo, свидетельствует о наследственной природе этого дефекта или изменения. Именно это обстоятельство делает культивируемые фибробласты ценным объектом физиологической генетики [8. Благодаря методу культивирования клеток патология человека и антропология становятся экспериментальными науками. [c.251]

Впервые такая культуральная система была разработана Е. А. Лурия с соавторами в ИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи (Москва) в органных культурах фрагментов печени мышиных эмбрионов размножение СКК и миелоидное кроветворение поддерживаются около 10 нед и находятся в тесной зависимости от состояния стромальной ткани — печеночного эпителия (см. [5]). Перспективной представляется система культивирования клеточных суспензий кроветворных органов в коллагеновом геле, где развиваются колонии стромальных фибробластов [6], тесно связанные с областями активного гемопоэза [7]. Однако наиболее разработанной и открывающей самые широкие возможности для всестороннего изучения гемопоэза является в настоящее время система, предложенная Декстером [8] для культивирования костного мозга мыши, а позднее приспособленная для костного мозга тупайи и человека. Особенностью этой системы является ее двухфазность, благодаря которой кроветворные и лимфоидные элементы становятся доступными для использования в клинических целях и всестороннего исследования без какого-либо повреждения стромальной подложки. [c.266]

Клеточные культуры развивающегося миокарда. Ткань миокарда (эмбрионы крысы — 14—20-суточные, курицы — 7—11-суточные, человека— 7—16-недельные) отмывают от крови в бескальциевом растворе Хэнкса и, измельчив, инкубируют в 0.15 %-ном растворе трипсина, содержащем 0,05 % коллагеназы, в течение 20 мин при 37 °С. После удаления протеолитических ферментов ткань промывают дважды в питательной среде с 10 % сыворотки и суспензируют клетки встряхиванием флакона или пипетированием (5—8 раз пипеткой на 10 мл с широким отверстием) 15—20-минутные циклы трипсинизации повторяют до полной диссоциации ткани и перехода в суспензию свободных клеток (обычно 3—4 раза). Процедура диссоциации проводится в бескальциевой среде. Клетки высевают либо сразу, либо после центрифугирования (1000 об/мин в настольной центрифуге в течение 7—10 мин), позволяющего удалить часть погибших клеток. Мышечная фракция очищается методом раздельного прикрепления или культивированием в среде без глютамина. Применение для эмбриональных культур цитостатиков нецелесо- [c.296]

Клеточные линии получаются спонтанно при культивировании периферической крови и лимфоидных тканей больных лимфомами и лейкозами, а также клинически здоровых людей и обезьян, имеющих антитела к лимфотропным вирусам герпеса, вирусу Эпстайн-Барр (ВЭБ) человека и лимфотропному герпесвирусу павианов (ГВП) [5—11]. Успешное получение лимфоидных клеточных линий [c.299]

Изложен метод органного культивирования фрагментов и клеточных суспензий костного мозга взрослых животных и человека, позволяющий получить in vitro образование зрелой, минерализованной, костной ткани. Описаны способы эксплантации, параметры культивирования и методы обработки культур, дан сравнительный морфологический анализ полученных результатов в зависимости от особенностей культивирования. Рассмотрены некоторые пути применения этой культуральной системы. Бнблиогр. 13 назв. [c.318]

Соматические клетки - это клетки всех органов и тканей организма за исключением половых клеток. Усовершенствование методов культивирования соматических клеток вне организма определило возможность новых путей изучения генетики высших организмов, применяя наряду с методами классической генетики методы молекулярной биологии. Это послужило предпосылкой для возникновения нового раздела генетики - сначала генетики соматических клеток, а затем, с развитием методов генной инженерии, и молекулярной генетики соматических клеток. Специфические особенности соматических клеток позволяют успешно эксплантировать из организма различные типы клеток и поддерживать их в культуре в течение длительного времени в специально разработанных питательных средах, включающих наборы аминокислот, витаминов, сахаров, а также сыворотки крови, содержащей различные ростовые факторы. Наибольшее развитие получила молекулярная генетика соматических клеток млекопитающих, что, безусловно, связано с появившейся возможностью постановки прямых экспериментов с клетками человека. В настоящее время разработаны специальные методы культивирования различных клеток человека (фибробластов, глиальных и эндотелиальных клеток, клеток крови и др.) при сохранении нормального кариотипа и других признаков нормальных клеток в течение длительных сроков культивирования. Такие диплоидные штаммы используются для различных экспериментов, в частности, при приготовлении противовирусных вакцин. [c.249]

В настоящее время использование плазмированных культур для изучения большинства вирусов оставлено в связи с внедрением в практику однослойных культур. Тем не менее этот метод еще не утратил своего значения для культивирования и титрования Tie-которых вирусов. Г. Д. Засухиной и Е. Н. Левкович в 1957 г. бы-ло обнаружено цитопатогенное действие вируса весенне-летнего клещевого энцефалита (штамма Фатеев и Софьин ) на фибробласты человека. Для приготовления культур использовали кусочки кожно-мышечной ткани 8—12-недельных эмбрионов человека. Клетки выращивали в среде 27. Культуры заражали на 2-е сутки. В качестве инфекционного материала использовали 10% суспензию мозга белых мышей, зараженных вирусом весенне-лет-н его клещевого энцефалита, или культуральную жидкость предыдущего пассажа. После 15-минутного контакта ткани с 0,2 мл инфекционного материала в пробирки вносили по 1,3 мл питательной смеси, состоящей из 70% коровьей амниотической жидкости, 10% инактивированной лошадиной сыворотки и 20% раствора Хэнкса. В некоторых опытах использовали среду 199 с 2% лошадиной сыворотки. [c.132]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология