Градиенты плотности растворов метризамида

Метризамид имеет определенные преимущества перед сахарозой в отношении плотности и вязкости его растворов. При одинаковой концентрации вязкость раствора метризамида несколько меньше, чем раствора сахарозы, а плотность — существенно выше. Это означает, что для создания устойчивых градиентов плотности растворов метризамида требуются заметно меньшие его концентрации. И все же метризамид практически почти не используют для зонально-скоростного центрифугирования, что объясняется рядом причин. Одна из них, как будет видно ниже,— очень низкие значения плавучих плотностей нуклеиновых кислот в его растворах и, следовательно, малые скорости осаждения [c.209]

ГРАДИЕНТЫ ПЛОТНОСТИ РАСТВОРОВ МЕТРИЗАМИДА [c.270]

Вязкость и плотность растворов глицерина, особенно в области высоких концентраций, нарастают медленнее, чем растворов сахарозы и метризамида, но таким образом, что для растворов глицерина и сахарозы с одинаковой плотностью вязкость оказывается значительно выше у глицерина. Поэтому центрифугирование в градиенте плотности глицерина используют главным образом в тех случаях, когда это диктуется какими-либо дополнительными соображениями, например стабилизирующим действием глицерина на активность некоторых ферментов. [c.209]

Но есть и недостаток — относительно высокая вязкость ра тво-ров метризамида. Градиент его плотности при центрифуги]рова-нии образуется медленно. Растворы метризамида при концентрации более 40% настолько вязки, что их вносят не пипеткой, а шприцем. [c.272]

Ниже рассмотрены особенности каждого из названных солевых градиентов. Различные технические аспекты их приготовления и использования подробно проанализируем на примере самого распространенного — градиента плотности растворов s l. Затем отметим особенности и принципиальные отличия других солевых градиентов. Отдельно остановимся на равновесном центрифугировании в градиентах плотности растворов метризамида. [c.250]

В угловом роторе, где длина градиента мала, можно обойтись без преформирования. Форма равновесного градиента плотности раствора -метризамида получается довольно сложной, близкой к экспоненциальной (из-за вмешательства вязкости). Иногда она оказывается слишком крутой, поэтому предпочитают преформировать неравновесный линейный градиент, и воспользоваться его устойчивостью для сравнительно непродолжительного центрифугирования. [c.272]

Сопоставляя данные по плавучим плотностям со значениями плотности растворов метризамида, легко видеть, что плавучие плотности всех перечисленных биологических объектов перекрываются относительно умеренными концентрациями водных растворов метризамида. Вместе с тем высокая плотность самого метризамида (2,17 г/см — за счет трех атомов йода) придает ему способность, подобно s l или KI. образовывать градиент плотности при длительном центрифугировании и большой скорости вращения ротора. Отсюда вытекает возможность использования водных растворов метризамида в качестве среды для равновесного центрифугирования в градиентах плотности. Малая плавучая плотность биополимеров в растворах метризамида, его химическая инертность и отсутствие диссоциирующего воздействия дают ему преимущества по сравнению с солевыми растворами. [c.271]

Плотность сухого и сырого вещества оценивают с помощью равновесного центрифугирования в градиенте плотности (разд. 5.2.3). Однако использование этого метода для клеток, а не для субклеточного материала сопряжено со скрытыми трудностями. При определении таким способом плотности сырого вещества гидратированных клеток (например, в растворах метризамида и ренографина) активность воды и осмотическая сила имеют по ходу градиента разные значения к тому же градиентный раствор может проникать в водное пространство матрикса клеточной стенки. При определении [c.237]

Для создания градиентов плотности среды при зонально-скоростном центрифугировании нашли применение растворы следующих веществ сахарозы, глицерина, метризамида ( Ме1п8ат1-с1е ), фиколла ( р1соП ) и перколла ( РегсоИ ). Первые два вещества общеизвестны, поэтому приведем краткие характеристики трех остальных. [c.206]

При фракционировании нуклеиновых кислот для воздействия на их плавучую плотность можно варьировать добавки соли и pH среды. Фракционирование белков в градиентах метризамяаа не очень удобно ввиду высокой вязкости необходимых для этой цели довольно концентрированных растворов метризамида (40—50% rnlV). Особенно ценен метризамид для равновесного фракционирования нуклеопротеидов, которые в его растворах Hf диссоциируют и имеют небольшую плавучую плотность. Метризамид. можно использовать в щелочной среде (pH 12), когда ДНК денатурирует, и удается, например, изучать распределение белков по комплементарным нитям молекул ДНК [Russev, Tsa-nev, 1976]. [c.272]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология