РНКаза

РНКаза Р представляет собой удивительную модель, пригодную для выяснения закономерностей белково-н клеинового узнавания и позволяющую исследовать, каким образом белок, необходимый для работы фермента в клетке, может облегчать катализ, осуществляемый РНК- [c.170]

Рис, 4. Направленное расщепление полинуклеотидной цепи РНК ферментом РНКазой Н [c.15]

Благодаря сходству структуры своего лиганда со структурой РНК (гепарин является конкурентным ингибитором для РНКазы) гепарин-сефароза широко используется для очистки РНК-полиме-раз, обратной транскриптазы, факторов трансляции и др. [c.422]

Аналогичные принципы лежат в основе ферментативных методов анализа вторичных структур РНК- Известно большое число РНКаз, которые направленно гидролизуют фосфодиэфирные связи в однотяжевых участках РНК. Обнаружено также несколько нуклеаз, [c.39]

Неспецифическая ДНКаза, 3 5 -экзоиук-леаза Специфическая РНКаза, эндонуклеаза [c.14]

РНКазы 80—90 нуклеотидов, так что каждый мономер связывает по 12—14 нуклеотидов РНК- [c.157]

УФ-поглощение при 280 нм 2 — кислая РНКаза 3 — основная РНКаза i — кислая ДНКаза [c.232]

Два фермента обеспечивают высокую избирательность инициации синтеза ДНК, ограничивая инициацию репликации только ориджином. Это топоизомераза I и РНКаза Я, избирательно гидролизующая РНК в составе гибридных дуплексов с ДНК-Действие этих фер.ментов направлено против гибридных ДНК—РНК-участков, которые могут случайно образоваться на ДНК при транскрипции и послужить затравками для начала синтеза ДНК. Возможная роль в этом процессе РНКазы Н очевидна она способна непосредственно гидролизовать РНК во всех таких участках. Что касается роли топоизомеразы I, то необходимо отметить, что гибриды ДНК— РНК образуются лишь в том случае, если ДНК сверхспирализована (образование гибридного дуплекса снимает часть избыточной энергии сверхспирализации), причем сверхспирализована достаточно сильно, чтобы локальные нарушения нормальной вторичной структуры ДНК могли способствовать гибридизации с РНК- Топоизомераза I может релаксировать сверхспиральную ДНК лишь в том случае, если она сверхспирализована отрицательно и достаточно сильно, т. е. в условиях, способствующих возникновению на ДНК упомянутых локальных нарушений вторичной структуры. Таким образом, можно думать, что одна из функций этого ( рмента состоит в поддержании нормальной вторичной структуры ДНК, препятствующей ее гибридизации с РНК и образованию затравки. В мутантах Е. oli по РНКазе Н (ген rnh) или по топоизомеразе I (ген [c.62]

РНК полимераза П транскрибирует все гены эукариот, кодирующие белки, а также малые ядерные РНК и, по-видимому, РНК-компонент РНКазы Р. Рассмотрим лишь наиболее изученный механизм процессинга транскриптов, приводящий к образованию зрелых молекул мРНК, обычно содержащих 1500—2000 нуклеотидов. [c.172]

На следующей стадии в качестве затравки выступает уже (—) - strong-stop ДНК элонгация этой затравки приводит к синтезу (—) цепи ДНК, в которой, впрочем, может отсутствовать комплемент района ги5, поскольку соответствующий участок (+) матрицы был разрушен РНКазой Н (рис. 160). [c.311]

Рассмотрим теперь совсем недавний пример разделения ДНК и РНК. Здесь решалась более тонкая задача разделения НК, соизмеримых по своим размерам, а именно очистки ДНК плазмиды pBR 322 от примеси РНК. Присутствие РНК в препаратах плазмидной ДНК мешает протеканию некоторых ферментативных реакций и затемняет результаты введения концевой радиоактивной метки. Оказалось, что даже интенсивная обработка РНКазой (50 мкг/мл, 37°, 1 ч) не расщепляет РНК полностью, а лишь дробит ее на фрагменты, не обнаруживаемые электрофорезом в 1%-ном геле агарозы (они уходят вперед), но переосаждающиеся этанолом вместе с плаз-мидной ДНК. Кроме того, обработка РНКазой вообще нежелательна. Несмотря на предварительный прогрев, в ней остается небольшая [c.143]

Еще более крупнопористую жесткую матрицу — сефакрил S-1000 — недавно было предложено использовать для быстрой препаративной очистки ДНК плазмид от примеси ДНК бактерии-хозяина. Последняя при гель-фильтрации на указанной матрице выходит на переднем фронте высокомолекулярного пика ДНК, и ее можно отбросить. РНК в этом случае предварительно переваривали РНКазой [Bywatpr et al., 1983]. [c.144]

Наконец, отметим возможность быстрой и эффективной очистки гель-фильтрацией целых вирусов и фагов. Например, в недавней работе из 1 л суспензии Е. соИ, зараженных фагом X, после обработки бактериального лизата ДНКазой, РНКазой и концентрирования фагов переосаждением полиэтиленг иколем ПЭГ-6000 за одну операцию гель-фильтрации на колонке биогеля А-5т объемом 125 мл удавалось полностью очистить до 65% инфекционного материала [Sain, Erdei, 1981]. [c.145]

С и А но заряжены, но различаются по степени гидрофобности). За ними следуют UMP н GMP — здесь, помимо гидрофобности, играют роль отрицательные заряды U и G. Далее выходят динуклеотиды в том порядке, который диктуется зарядами входящих в их состав оснований АС—GG—AU—GU (последнее основание после гидролиза панкреатической РНКазой — всегда пиримидин). Затем элюируются тринуклеотиды также в соответствии с пропорцией в их составе незаряженных и отрицательно заряженных оснований, начиная с ААС (этот тринуклеотид выходит даже раньше динуклеотида GU) и кончая GGU. Разделение занимало около 20 ч [Aste-riadis et al., 1976]. [c.320]

Молекулярная биология. Структура и биосинтез нуклеиновых кислот (1990) -- [ c.14 , c.15 , c.38 , c.39 , c.56 , c.62 , c.63 , c.64 , c.157 , c.164 , c.165 , c.169 , c.172 , c.293 , c.298 , c.308 , c.311 ]

Хроматография белков и нуклеиновых кислот (1985) -- [ c.0 ]

Молекулярная биология (1990) -- [ c.14 , c.15 , c.38 , c.39 , c.56 , c.62 , c.65 , c.157 , c.164 , c.165 , c.169 , c.172 , c.293 , c.298 , c.308 , c.311 ]

Биологическая химия Изд.3 (1998) -- [ c.487 , c.499 ]

Жидкостная колоночная хроматография том 3 (1978) -- [ c.3 , c.80 ]

Гены (1987) -- [ c.316 , c.317 , c.408 ]

Биохимия человека Т.2 (1993) -- [ c.78 ]

Биохимия человека Том 2 (1993) -- [ c.78 ]

Химия протеолиза Изд.2 (1991) -- [ c.0 ]

Нейрохимия (1996) -- [ c.344 ]

Вирусология Методы (1988) -- [ c.0 ]

Искусственные генетические системы Т.1 (2004) -- [ c.0 ]

Гены и геномы Т 2 (1998) -- [ c.129 ]

Молекулярная биология клетки Сборник задач (1994) -- [ c.153 , c.154 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология