Ферментативные методы анализа

ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА, основаны на использовании хим. р-ций с участием ферментов. О содержании определяемого компонента судят либо по кол-ву конечного продукта ферментативной р-ции, либо, чаще, по начальной скорости процесса, положенного в основу методики определения (см. Кинетические методы анализа). Для наблюдения за скоростью ферментативной р-ции применяют обычно инструментальные методы, чаще других - люминесцентные, спектрофотометрич., электрохимические. Достоинства Ф. м. а. высокая чувствительность, обусловленная активностью ферментов, природой индикаторных р-ций (с помощью к-рых определяют в-во) и способами детекции аналит. сигна- [c.78]

ФЕНХОН - ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА [c.205]

Ферментативные методы анализа — это частный случай так называемых кинетических методов анализа, когда вещество определяют по скорости реакции, которая пропорциональна концентрации этого вещества. Рассмотрим простейшую реакцию превращения вещества (А) в продукт (Р) [c.85]

ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА - [c.205]

Каталитические ферментативные методы анализа используют преимущественно для определения многих органических соединений, п частности таких, которые содержатся в биологических объектах (в крови, моче, тканях и др.). Таким способом можно определять мочевину, мочевую кислоту, аминокислоты и другие органические кислоты, глюкозу и другие сахара, антибиотики и т. д. [c.450]

Аналогичные принципы лежат в основе ферментативных методов анализа вторичных структур РНК- Известно большое число РНКаз, которые направленно гидролизуют фосфодиэфирные связи в однотяжевых участках РНК. Обнаружено также несколько нуклеаз, [c.39]

Многообразие веществ, которое можно определять с помощью ферментов,— одно из важнейших достоинств ферментативных методов анализа. Многие вещества — это либо субстраты, либо эффекторы (активаторы или ингибиторы) ферментов. Ученые, все глубже проникая в тайны живой клетки, открывают новые специфические ферменты, выясняют механизм действия на ферменты различных веществ, которые активируют или ингибируют биохимические реакции. Поэтому постоянно увеличивается число веществ, определяемых с помощью ферментов, и сейчас уже трудно назвать такое органическое соединение, которое нельзя было бы анализировать с использованием ферментных методов. [c.84]

ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА — ФЕРМЕНТЫ [c.206]

Бурно развиваются ферментативные методы анализа. Материальной основой для них служит большой набор ферментов, с недавнего времени появившихся в продаже в очищенном и стандартизованном виде. Их выделяют из биологических материалов, главным образом из мутантов микробов и грибов. [c.216]

Наряду с применением микрохимических методов анализа, цветных реакций и физических методов исследования большую роль в этом играет также разработанный за последние годы ферментативный метод анализа, отличающийся чувствительностью, точностью и специфичностью. Основой для аналитического использования оксистероид-дегидрогеназ послужила разработка методов их выделения и очистки в больших количествах, а также установление факторов, влияющих на равновесие катализируемых этими ферментами реакций. В настоящее время для целей анализа стероидов используются За-, Зр,17р- и 20р-окси-стероид-дегидрогеназы, методики применения которых имеют некоторые различия [76]. [c.134]

Несмотря на явные преимущества ферментативных методов анализа, их применение до недавнего времени ограничивалось лишь областью клинической биохимии. Это объясняется несколь- [c.86]

Ферменты растительного или животного происхождения постепенно заменяются на микробные ферменты. Биотехнологи и генные инженеры научились получать по заказу такие штаммы-мутанты, которые синтезируют необходимый фермент в десятки и сотни раз больших количествах, чем исходные штаммы. Понятно, насколько упрощается работа по получению и выделению ферментов из таких источников. Особо важную роль в расширении использования ферментативных методов анализа сыграло внедрение в аналитическую практику иммобилизованных ферментов. Методами инженерной энзимологии можно получать различные формы гетерогенных стабилизированных биокатализаторов, которые лишены многих недостатков, присущих растворимым ферментам. Иммобилизованные ферменты могут применяться многократно, обладают повышенной стабильностью и к тому же менее чувствительны к действию случайных примесей в анализируемых смесях. Иммобилизованные ферменты во многих случаях оказались более эффективными, чем химические реагенты. [c.87]

В качестве маркеров применяют также ферменты. Основгшная на этом принципе специальная аппаратура для высокочувствительного ферментативного иммунохимического анализа выпускается серийно. В этом случае определяемый компонент метят ферментом. С антителами взаимодействуют как свободные, так и связанные с ферментом соединения, причем активность фермента при образовании комплексов АГ-АТ. как правило, подавляется (иногда усиливается). Концентрацию исследуемого вещества определяют путем измерения активности фермента по отношению к соответствующему субстрату. Чем больше концентрация немаркированного соединения, тем меньше фермента связьшается антителами и тем выше его активность. При этом достигается высокая чувствительность определений, характерная для ферментативных методов анализа. Использование ферментов-маркеров для контроля за ходом иммунохими- [c.299]

Повышение стабильности ферментов вследствие иммобилизации значительно облегчает их хранение, транспортировку, применение в экспедиционных УСЛ0ВИ51Х, а возможность многократного использования иммобилизованных ферментов значительно повышает экономичность ферментативных методов анализа. [c.111]

Рассмотренное выше действие нескольких полисахараз, участвующих в гидролизе крахмала, иллюстрирует специфическую природу различных реакций ферментативного расщепления. Ферментативный метод анализа дает такие сведения относительно тонкой структуры полисахаридов, которые нельзя получить современными химическими методами. [c.301]

Ферментативные методы анализа рассмотрены Гильбо [4]. Автор приводит перечень более 150 ферментов и источников для их получения многие из них доступны в очищенном виде. Уреаза была первым ферментом, полученным в чистой кристаллической форме [53]. [c.437]

Применяя ферментативные методы анализа, Эрнст и Бёме [89, 90] показали, что все гидроксилированные метаболиты выделяются с мочой в виде глюкуронидов или сульфатов. Как и у растений, [c.108]

Повышение в сыворотке крови активности креатинкиназы наблюдается при таких тяжелых заболеваниях, как инфаркт, инсульт или мышечная дистрофия. Биолюминесцентный метод позволяет устанавливать активности этого фермента от 0,1 до 1000 МЕ (в норме сыворотка содержит менее 10 МЕ креатинкиназы). Ферментативный метод анализа креатинкиназы основан на следующих реакциях [c.96]

Ферментные электроды относятся к самым последним достижениям аналитической химии. Эти устройства сочетают в себе селективность и чувствительность ферментативных методов анализа со скоростью и простотой измерений с помощью ИСЭ. В результате появилось устройство, позволяющее быстро измерять концентрацию определенного соединения в растворе, и метод, требующий минимальной пробоподготов-ки. Разработаны ферментные электроды для определения глюкозы, мочевины, Ь-ами-нокислот, пенициллина и других веществ, важных в клинической практике. [c.116]